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改良ELISA一步法检测小儿粪便轮状病毒
目的探讨改良ELISA一步法检测小儿腹泻粪便的轮状病毒,为临床提供可靠的诊断依据.方法应用快速轮状病毒抗原酶标诊断试剂盒(RotaFast)进行改良的ELISA一步法检测小儿腹泻粪便轮状病毒抗原695例.结果经检测小儿腹泻粪便695例,阳性率达75.97%(528/695).结论改良ELISA一步法检测小儿粪便轮状病毒,具有快速、敏感,方法简单,结果准确等优点.
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金标法与ELISA在检测脐血HBsAg中的应用
目的:探讨金标法和ELISA在检测脐血HBsAg中的应用价值.方法:对108例脐血血清同时应用金标法和ELISA(一步法)测定HBsAg,对结果进行分析.结果:通过Kappa分析,两种测定方法具有一致性,但一致性不是很强.用ELISA两步法对结果不一致标本进行复核,经判读都为阳性(有1例为污染,两步法仍为阴性).结论:建议脐血测定HBsAg应用ELISA两步法.
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乙型肝炎表面抗原检测的钩状效应
目前,检测乙肝表面抗原(HBsAg)普遍采用ELISA双抗体夹心一步法.但在日常工作中会发现HBsAg阴性而HBeAg阳性的现象,其原因就是当标本中的抗原浓度过高时产生的钩状效应(HOOK)现象,从而出现假阴性造成真阳性的漏检.
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无偿献血者HBsAg筛查阳性结果确证分析
目的 通过分析献血人群中HBsAg筛查阳性标本确证试验结果,以寻找佳筛查手段,提高输血安全的同时又能大限度的降低血液资源的浪费.方法 对本中心ELISA两步法(2种试剂)筛查出HBsAg阳性的120份标本(含单一试剂阳性),同时采用ELISA一步法和电化学发光法进行复查,并对阳性结果进行中和试验确证分析,评估3种方法检测灵敏度及假阳性率.结果 120份HBsAg筛查阳性标本,确证阳性为50份.其中国产试剂ELISA两步法检出假阳性率为40％；用同厂家一步法试剂检出假阳性率为60％；用电化学发光法检出假阳性率为16.67％,经统计学分析3种方法比较差异有统计学意义.国产与进口试剂ELISA两步法检出的阳性标本不同的S/C区段确证试验阳性率差异有统计学意义.结论 ELISA两步法替代一步法进行HBsAg的常规筛查具有提高检出率、降低假阳性率的优势；电化学发光法的灵敏度和假阳性率均优于ELISA一步法和两步法.
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人脱嘌呤脱嘧啶核酸内切酶单克隆抗体抗原表位的鉴定及应用
目的:研究鉴定人脱嘌呤脱嘧啶核酸内切酶单克隆抗体(hAPE1 mAb)的抗原表位,并建立定量检测hAPE1的ELISA一步法.方法:设计并合成:LPE1-15肽阵列,鉴定hAPE1 mAb 2-G1和4-F6的抗原表位,应用三维立体结构观察软件Molsoft.ICM-Pro模拟hAPE1 mAb抗原表位的立体结构;采用改良的过碘酸钠法标记抗体,以hAPE1 mAb为捕获抗体和酶标抗体,建立hAPE1的ELISA一步检测法.结果:APE1-15肽阵列检测结果和抗原表位三维结构显示,2-G1 mAb的抗原表位对应为hAPE1天然蛋白氨基酸残基序列的76-90位和109-123位,位于氧化还原区域,为构象型抗原表位;4-F6 mAb的抗原表位对应为hAPE1天然蛋白氨基酸序列的109-147位,位于DNA修复内切酶活性区.ELISA一步法检测hAPE1蛋白的线性范围为8.0～200μg/L,低检测限为2.0μg/L.平均批内变异系数为8.67%,平均批间变异系数为12.45%,平均回收率为105.47%.结论:hAPE1 2-C1 mAb和4-F6 mAb具有不同的抗原表位,成功建立的hAPE1 ELISA一步法为简便、快速、准确检测血清中hAPE1的含量奠定了基础.
关键词： 人脱嘌呤脱嘧啶核酸内切酶 单克隆抗体 抗原表位 ELISA一步法
