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microRNA-1Ob促进人低转移肺癌细胞株95-C的增殖及侵袭
目的 探讨microRNA-10b(miRNA-10b)对人低转移肺癌细胞95-C的增殖、细胞周期、凋亡以及侵袭及迁移能力的影响.方法 用脂质体法将miRNA-10b真核表达质粒瞬时转染入95-C,实验设置空白对照组、空载体转染组和miRNA-10b质粒转染组,转染后荧光显微镜下观察转染效率,实时定量RT-PCR检测各组细胞miRNA-10b的表达,细胞增殖实验检测各组细胞的增殖情况,流式细胞仪检测各组细胞周期及细胞凋亡率,Transwell实验检测各组细胞侵袭能力,细胞划痕实验检测各组细胞迁移能力.结果 转染后miRNA-10b质粒转染组细胞增殖速度明显增快,细胞凋亡率降低,细胞侵袭及迁移能力增强,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 miRNA-10b可以促进95-C细胞的增殖,降低细胞凋亡,增加95-C细胞的侵袭及迁移能力.
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microRNA-10b与胰腺癌吉西他滨耐药的相关性及机制研究
目的:探讨microRNA-10b(miR-10b)与胰腺癌细胞吉西他滨(gemcitabine,GEM)化疗耐药的相关性及可能机制.方法:RT-qPCR检测吉西他滨相对耐药的胰腺癌细胞株PANC-1及吉西他滨相对敏感的CFPAC-1中miR-10b的表达情况;用不同浓度的吉西他滨作用于上述细胞,RT-qPCR检测二者miR-10b的表达变化;CFPAC-1细胞转染miR-10b mimics上调miR-10b表达量,CCK-8法及流式细胞仪检测细胞对吉西他滨药物敏感性的变化,Western blot检测抗凋亡相关蛋白(如PI3K、p-Akt、Bcl-2、Survivin)的表达,RT-qPCR检测PTEN基因的表达变化.结果:PANC-1细胞中miR-10b的表达显著高于CFPAC-1细胞,且上述两种细胞中miR-10b的表达量与吉西他滨呈浓度梯度依赖;高表达miR-10b后CFPAC-1细胞对吉西他滨的敏感性下降,PI3K、p-Akt、Bcl-2、Survivin蛋白的表达升高,PTEN mRNA的表达水平降低.结论:miR-10b可能通过负性调控PTEN的表达水平,从而增加PI3K、p-Akt、Bcl-2、Survivin蛋白的表达,减少凋亡来降低CFPAC-1对吉西他滨的敏感性,终导致胰腺癌细胞对吉西他滨化疗耐受.
关键词： MicroRNA-10b 胰腺癌 吉西他滨 化疗耐药 -
microRNA-10b调控SW480结肠癌干细胞生物学行为的研究
目的 探讨microRNA-10b对SW480结肠癌干细胞迁移及侵袭功能影响.方法 流式细胞仪分选SW480结肠癌干细胞,通过转染技术抑制SW480结肠癌干细胞microRNA-10b表达,划痕愈合实验观察癌干细胞迁移能力变化,Transwell法观察癌干细胞侵袭能力变化.结果 抑制SW480结肠癌干细胞microRNA-10b表达,癌干细胞转染48 h后,其迁移率(45.4±3.1)％与转染前(86.8±12.4)％比较明显下降(P<0.05);转染后癌干细胞侵袭力也明显下降,转染前侵袭细胞数为(486.4±124.7)个,转染后为(297.5±48.0)个(P<0.05).结论 microRNA-10b基因可调控SW480结肠癌干细胞迁移及侵袭功能,抑制其表达可降低SW480结肠癌干细胞迁移力及侵袭力.
关键词： MicroRNA-10b 结肠癌 癌干细胞 迁移 侵袭 -
MicroRNA-10b对人肺腺癌细胞株A549增殖及侵袭能力的影响
目的 探讨miRNA-10b对人肺腺癌细胞A549的增殖及侵袭能力的影响.方法 用脂质体法将miRNA-10b真核表达质粒转染入A549,实验设置空白对照组、阴性对照组和miRNA-10b质粒转染组,转染后荧光显微镜下观察转染效率,实时定量PCR检测各组细胞miRNA-10b的表达,细胞增殖实验检测各组细胞的增殖情况,Transwell实验检测各组细胞侵袭能力.结果 与空白对照组和阴性对照组相比,miRNA-10b质粒转染组细胞转染后增殖速度加快,细胞侵袭能力增强 (P<0.05).结论 miRNA-10b可以促进A549细胞的增殖及侵袭能力.
关键词： MicroRNA-10b A549 细胞增殖 侵袭能力 -
肺腺癌患者血浆microRNA-10b表达及临床意义
目的 探讨肺腺癌患者血浆microRNA-10b(miR-10b)与临床特征的关系及其作为肺腺癌肿瘤标志物的可行性.方法 46例肺腺癌患者(肺腺癌组)与42例体检健康者(对照组),采用实时荧光定量PCR检测2组血浆miR-10b水平,分析miR-10b与肺腺癌临床特征间关系.绘制ROC曲线,评估miR-10b的诊断效能.结果 肺腺癌组血浆miR-10b水平(1.632(0.836,2.313))较对照组(0.497(0.221,0.766))上调3.284倍(P＜0.01);miR-10b表达在淋巴结转移上差异有统计学意义(P＜0.05),在肿瘤原发灶情况、TNM分期上差异无统计学意义(P＞0.05);miR-10b为1.212时,诊断肺腺癌的敏感性为64.3％,特异性为82.4％,AUC为0.765.结论 肺腺癌患者血浆miR-10b表达明显上调,miR-10b有望成为肺腺癌的早期诊断标志物.
关键词： 肺腺癌 MicroRNA-10b 肿瘤标志物 -
microRNA-10b表达变化对人胰腺癌细胞生物学行为的影响
目的:探讨microRNA-10b( miR-10b)的表达变化对人胰腺癌细胞ASPC-1生物学行为的影响.方法:胰腺癌细胞ASPC-1细胞株分别以脂质体法转染正义、反义miR-10b真核表达载体和空载体,用荧光显微镜观察转染效率.以未转染的ASPC-1细胞为空白对照,检测各转染组miR-10b和RhoC蛋白表达,并检测各组细胞生长、凋亡及侵袭能力.结果:各组转染48 h后,转染效率达50％～70％;与空白对照组比较,正义miR-10b转染组细胞miR-10b表达和RhoC蛋白表达量明显增加,凋亡率明显降低,生长活性和侵袭能力明显增强(均P＜0.05);而反义miR-10b转染组细胞以上检测结果与正义miR-10b转染组细胞呈相反改变(均P＜0.05);空载体转染组所有指标与空白对照组间无明显差异(均P＞0.05).结论:上调miR-10b的表达,能促进胰腺癌细胞ASPC-1的生长、侵袭并抑制凋亡,该作用可能与其调控RhoC表达有关.
关键词： 胰腺肿瘤 MicroRNA-10b 转染 细胞增殖 细胞凋亡 -
MicroRNA-10b与早期乳腺浸润性导管癌的临床及预后研究
目的 探讨早期乳腺浸润性导管癌中microRNA-10b(miR-10b)表达与临床指标及预后关系.方法 采用原位分子杂交技术,检测305例中早期乳腺浸润性导管癌组织miR-10b表达,采用Pearsonχ2检验分析miR-10b表达在不同临床指标间的差异性;采用Spearman秩和相关分析早期乳腺浸润性导管癌中miR-10b、年龄、淋巴结、雌激素受体α(ERα)、孕激素受体(PR)及人类表皮生长因子受体2(HER-2)之间的相关性.采用Kaplan-Meier法计算累计无瘤生存时间,应用Log-rank检验比较miR-10b不同表达组间无瘤生存时间的差异.结果 早期乳腺浸润性导管癌中miR-10b表达与年龄、肿瘤大小和复发转移,差异具有统计学意义(P<0.05);与月经状态、临床分期、化疗、放疗及内分泌治疗比较,差异无统计学意义(P>0.05).miR-10b阳性表达与HER-2阳性表达呈正相关,差异有统计学意义(P<0.05).miR-10b表达阴性中位无瘤生存时间较miR-10b表达阳性时间长,两者比较差异有统计学意义(P<0.05);淋巴结阴性时miR-10b阴性表达的中位无瘤生存时间较阳性表达长,两者比较差异有统计学意义(P<0.05);相反,miR-10b表达在淋巴结阳性中位无瘤生存时间无统计学意义(P>0.05).结论 miR-10b表达水平与早期乳腺浸润性导管癌复发转移相关,特别在无淋巴结转移且miR-10b阳性表达组的中位无瘤生存时间短,预后差.miR-10b阳性表达是早期乳腺浸润性导管癌的预后因素.
关键词： 早期乳腺浸润性导管癌 MicroRNA-10b 临床 预后
