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动脉粥样硬化及其相关疾病的研究及方法学探索
目的:对"AS引发的一系列疾病是紧密相关的整体,其共同病机为痰瘀化热,共同治则是活血、化痰、清热"这一假设进行验证.方法:采用整体、系统、反证法进行验证.结果:软脉胶囊(0.81 g/kg,2.43 g/kg)可抑制实验性脑血栓形成;对大鼠不全性脑缺血再灌注损伤有一定保护作用;可抑制角叉菜胶诱导的大鼠血栓形成,改善血液流变学异常.软脉胶囊(0.24g/kg,0.96 g/kg)可增加麻醉犬脑血流量,降低脑血管阻力,对血压、心率无明显影响,并可明显增加麻醉犬心肌缺血后再灌注15 min,30 min,45 min和60 min时冠脉血流量,减轻因缺血所致心肌细胞损伤程度.软脉胶囊(0.42 g/kg,1.26 g/kg)可调节实验性动脉硬化家兔脂质代谢紊乱,缩小斑块面积,促进平滑肌细胞凋亡,抑制动脉粥样硬化形成.结论:假设成立,所采用的科研思路和方法可行.
关键词： 动脉粥样硬化及相关疾病 脑梗塞 冠心病 软脉胶囊 科研思路和方法 -
动脉粥样硬化及其相关疾病的研究及方法学探索(4)
3.2.4 软脉胶囊对家犬脑血流量的影响3.2.4.1 试验材料药物:软脉胶囊(0.5 g/kg),由课题组制备.批号990122.动物:健康成年杂种犬16只,雌雄不拘,体重14～18 kg,从农村购买.仪器:MPA-IV型多道生物信号分析系统,第二军医大学生产;MPV 1*!100电磁流量计,日本光电公司;XDH-3B型心电图机,上海医用电子仪器厂.
关键词： 动脉粥样硬化及相关疾病 脑梗塞 冠心病 软脉胶囊 科研思路和方法 -
软脉胶囊质量标准的研究
目的:建立软脉胶囊的质量控制标准.方法:采用显微镜和TLC法分别对软脉胶囊中珍珠、何首乌进行鉴别,双波长扫描法测定盐酸小檗碱含量.结果:小檗碱在0.039～0.31 μg范围内线性关系良好(r=0.9993),平均回收率为97.33%,RSD为1.99%.结论:方法简单,重现性好,能有效控制该制剂的质量.
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软脉胶囊对犬急性缺血再灌注心肌代谢和心肌缺血面积的影响
目的:观察软脉胶囊(RM)对犬急性缺血再灌注模型中心肌代谢和心肌缺血面积的影响.方法:采用结扎犬左冠状动脉前降支(LAD)造模,股动脉取血测定血浆6-Keto-PGF1α、TXB2含量变化.结果RM高1.26 g(kg/d)、低剂量组0.42 g(kg/d)和阳性药物步长脑心通组0.252 g(kg/d),6-Keto-PGF1α,均较模型组明显降低(P＜0.01),且具有明显缩小心肌梗塞范围的作用.结论:软脉胶囊对犬急性心肌缺血再灌注具有良好的预防作用.
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软脉胶囊对家兔动脉粥样硬化预防作用的实验研究
目的:观察软脉胶囊对家兔动脉粥样硬化模型中脂质代谢和主动脉斑块面积形成的影响.方法:采用喂养法复制家兔动脉硬化模型,同时分组给药,3个月后测定家兔有关生化指标并进行病理形态学检查.结果:软脉胶囊高(1.26 g/kg·d)、低剂量组(0.42 g/kg·d)和阳性药物步长脑心通组0.252 g/kg·d的甘油三脂(TG)、血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL)均较模型组明显降低(P＜0.05和P＜0.01),软脉胶囊高剂量组还能升高高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c)、载脂蛋白A1(ApoA1)(P＜0.05和P＜0.01),降低载脂蛋白B100(ApoB100)(P＜0.01).病理形态学检查显示软脉胶囊高、低剂量组兔主动脉斑块面积明显减少,动脉内膜增厚不明显,可见少量平滑肌细胞增生及弹力纤维形成.结论:软脉胶囊能明显抑制主动脉粥样硬化斑块的形成,是预防动脉粥样硬化的理想而有效的药物.
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动脉粥样硬化及其相关疾病的研究及方法学探索(3)
3.2.3 软脉胶囊对大鼠体内血栓形成及血液流变学的影响 3.2.3.1 试验材料 药物：软脉胶囊(0.5 g/粒)，由河北医科大学中医学院制备，批号990122；角叉菜胶(Carrageenan,Type I,C 1013)，Sigma公司产品。 动物：SD大鼠，雄性，体重200～250 g，河北省实验动物中心提供。合格证号为医动字第04057号。
关键词： 动脉粥样硬化及相关疾病 脑梗塞 冠心病 软脉胶囊 科研思路和方法 -
动脉粥样硬化及其相关疾病的研究及方法学探索(2)
3.2.2 软脉胶囊对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用 3.2.2.1 试验材料 药物：软脉胶囊(0.5 g/粒)，由课题组制备，批号990122。 试剂：超氧化物岐化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、过氧化氢酶(CAT)、ATP酶及乳酸(LA)测定试剂盒，均购自南京建成生物工程公司；天门冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)、甘氨酸(Gly)、牛磺酸(Tau)、γ-氨基丁酸(γ-GABA)，分别购自BDH、Sigma公司。甲醇、乙酸、乙酸钠、柠檬酸、柠檬酸钠、巯基乙醇、磷苯二甲醛均为国产，分析纯。 动物：SD大鼠，雄性，体重200～250 g，河北省实验动物中心提供，合格证号为医动字第04057号。 仪器：LC-4A高效液相色谱仪、RF-530荧光检测器、C-R2Ax数据处理机均为日本岛津公司生产。 3.2.2.2 试验方法：将32只SD大鼠，随机分为4组，每组8只，分别为伪手术组(手术，但不结扎血管及迷走神经)、脑缺血再灌注模型组、软脉胶囊低剂量组(0.81 g/kg)、软脉胶囊高剂量组(2.43 g/kg)。给药组灌胃给药，容量为1 mL/100 g体重。伪手术组及模型对照组灌服等容量蒸馏水，连续10天。末次给药2 h后，分别用10%水合氯醛麻醉(35 mg/kg,ip)，分离并用无损伤动脉夹夹闭大鼠两侧颈总动脉及迷走神经，缺血45 min后，将颈总动脉及迷走神经松开，再灌注30 min［4］，然后断头取血，分离血清，检测SOD、MDA及NO含量。取左侧大脑，迅速在冰盘上分离皮层及海马，参照文献制备匀浆［5］，高效液相色谱法测定兴奋性氨基酸(Glu、Asp)和抑制性氨基酸(γ-GABA、Gly、Tau)、照试剂盒方法检测CAT活性、ATP酶活性及LA含量另取大鼠右侧大脑称湿重后，置85°C恒温干燥箱内，干燥60 h，准确称其干重，按ELLIOT公式计算含水量。数据用x±s表示，统计学处理采用组间t检验。
关键词： 动脉粥样硬化及相关疾病 脑梗塞 冠心病 软脉胶囊 科研思路和方法 -
软脉胶囊含药血清对PC12细胞损伤的保护作用
目的探讨软脉胶囊对PC12细胞损伤的保护作用.方法采用血清药理学方法体外培养PC12细胞,研究软脉胶囊对缺氧、GLU、NO引起的PC12细胞损伤的影响.结果软脉胶囊含药血清可明显对抗缺氧、GLU、NO引起的PC12细胞形态改变,降低胞外LDH活性,增加细胞存活率.结论软脉胶囊含药血清对PC12细胞损伤具有保护作用.
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软脉胶囊含药血清对PC12细胞缺氧损伤细胞凋亡及凋亡相关蛋白表达的影响
目的通过软脉胶囊含药血清对PC12细胞缺氧损伤细胞凋亡及凋亡相关基因Bcl-2、Bax蛋白表达的影响,探讨软脉胶囊治疗血管性痴呆(VD)的机制.方法采用TUNEL法和流式细胞仪检测PC12细胞的凋亡率及Bcl-2和Bax蛋白的表达率.结果软脉胶囊含药血清可明显对抗缺氧引起的PC12细胞的凋亡率,使Bcl-2蛋白的表达率明显增加,同时使Bax蛋白表达率明显降低.结论软脉胶囊对VD具有治疗作用.
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软脉胶囊含药血清对PCl2细胞谷氨酸损伤的保护作用
软脉胶囊(已获国家药品监督管理局药物临床研究批件,批号:2003L00893)是根据李士懋教授40多年临床实践研制的中药新药,临床治疗心脑血管疾病获得较好的疗效,药理研究证明其对脑缺血再灌注大鼠有保护作用[1],为了探讨其治疗血管性痴呆的机理,我们采用血清药理学方法研究了软脉胶囊含药血清对PCl2细胞谷氨酸损伤的保护作用,探究其治疗血管性痴呆的机理,为临床用药提供理论根据.
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软脉胶囊对脑缺血再灌注大鼠的影响
目的:观察软脉胶囊对脑缺血再灌注大鼠的影响.方法:用结扎大鼠两侧颈总动脉和迷走神经的方法复制脑缺血再灌注模型.观察血液中的NO、6-keto-PGF1a、TXB2含量变化.结果:软脉胶囊0.81g/kg、2.43g/Kg能升高6-keto-PGF1a、NO含量,有降低TXB2趋势.结论:软脉胶囊对脑缺血再灌注大鼠有保护作用,其作用可能通过抑制血小板聚集和升高NO来实现的.
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软脉胶囊提取分离工艺的研究
为优选软脉胶囊提取分离工艺,以出膏率、盐酸小檗碱、总姜黄素含量为指标,应用正交试验筛选佳提取分离工艺条件.实验表明,佳工艺为:水煎煮药材部分分别加12倍,煎2 h,药渣再加8倍水,煎1.5 h,煎液用高速离心机分离(f=14000 g);醇回流提取药材部分分别加入8倍90%乙醇,回流3 h,药渣再加入5倍80%乙醇,回流1 h.
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软脉胶囊对脑缺血再灌注大鼠兴奋性和抑制性氨基酸的影响
目的观察软脉胶囊对脑缺血再灌注大鼠的影响.方法用结扎大鼠两侧颈总动脉和迷走神经的方法复制脑缺血再灌注模型,观察大脑皮层及海马中兴奋性氨基酸和抑制性氨基酸的变化.结果软脉胶囊0.81、2.43g/kg能使大脑皮层及海马中兴奋性氨基酸含量降低,抑制性氨基酸含量升高.结论软脉胶囊对脑缺血再灌注大鼠有保护作用,其作用可能通过降低兴奋性氨基酸的兴奋毒性实现的.
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软脉胶囊对脑缺血再灌注大鼠的保护作用
目的观察软脉胶囊对脑缺血再灌注大鼠的影响.方法复制不完全性脑缺血再灌注模型,观察脑含水量、LA、SOD、MDA、CAT、Na+-K+-ATP酶的变化.结果软脉胶囊0.81、2.43g/kg能升高血中SOD和皮层中CAT、Na+-K+-ATP酶含量,降低血中MDA和皮层中乳酸含量和含水量.结论软脉胶囊对脑缺血再灌注大鼠有保护作用,其作用可能通过降低自由基和改善能量代谢实现.
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软脉胶囊含药血清对PC12细胞缺氧损伤的保护作用
目的:研究软脉胶囊对神经细胞PC12缺氧损伤的影响.方法:采用血清药理学方法,研究软脉胶囊含药血清对连二亚硫酸钠引起的PC12细胞缺氧损伤的影响.结果:软脉胶囊可明显对抗缺氧引起的PC12细胞形态改变,降低LDH的漏出,增加细胞的存活率.结论:软脉胶囊含药血清对缺氧损伤引起的PC12细胞损伤具有保护作用.
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软脉胶囊对记忆障碍小鼠学习记忆能力的影响
目的:观察软脉胶囊对记忆障碍小鼠学习记忆能力的影响.方法:采用东莨菪碱、乙醇、氧化铝致小鼠记忆障碍模型.结果:软脉胶囊能明显改善东莨菪碱、乙醇、氯化铝所致记忆障碍小鼠学习记忆能力,延长小鼠第一次跳下平台的潜伏期,减少5分钟错误次数.结论:软脉胶囊能促进小鼠学习记忆能力.
