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肺炎支原体渗透压诱导蛋白C的分子生物克隆及生物活性分析
目的:用生物克隆的方法表达肺炎支原体(Mycoplasmsapneamoniae,Mp)渗透压诱导蛋白C(Osmotically inducible protein C,OsmC)并测定其生物活性活性.方法:根据Mp的OsmC基因序列设计特定引物,PCR扩增OsmC基因.通过构建重组质粒pET28a-MpOsmC,并转化入大肠埃希菌BL21(DE3),来诱导目的蛋白表达.我们采用镍柱亲和层析法对OsmC蛋白进行纯化,再用氧化铁二甲酚橙试剂(FOX)测定OsmC蛋白的活性.结果:我们用生物克隆的方法得到Mp的OsmC基因片段,并成功构建重组质粒pET28a-MpOsmC.重组质粒转化入大肠埃希菌BL21(DE3)后经过表达我们得到重组Mp OsmC蛋白,再经亲和层析得到高纯度的目的蛋白,且具有分解H2O2的活性.结论:重组Mp OsmC蛋白具有过氧化物酶的活性,为研究肺炎支原体的抗氧化机制提供了理论依据.
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黄连素的提取及分子活性部位研究
黄连素是从黄连、黄柏等中药中提取的生物碱类药物,抗菌疗效确切,主要用于肠道感染,细菌性痢疾等;并具有抗肿瘤,抗癌,降血压等作用.本文采用微型实验方法,从中药黄连叶片中提取黄连素,并参与其质谱实验分析结果,从结构、能量等分子层面上探讨标题化合物可能的分子反应活性部位和机理,以期为研究黄连素的药效作用机理,为药物分子全合成提供理论依据.
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双黄连注射液对血管内皮细胞NF-κB信号通道靶分子活性抑制作用的研究
目的:探讨中药复方双黄连注射液对血管内皮细胞作用.方法:用双黄连注射液与人脐静脉血管内皮细胞株(ECV-304)共同培养后,采用MTT法及形态学法观察双黄连注射液对人脐静脉血管内皮细胞的作用及细胞脱氧酶的活性,用Sandwich ELISA法定量分析法和定量免疫细胞技术,检测NF-κB活性及胞浆内IκB含量.
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微波技术在中药加工中的应用进展
随着科学技术的不断发展,微波技术已成为人们关注的一门新兴的、具有可持续发展前景的前沿交叉学科.微波加热是利用介质损耗原理,采用超高频电场对物料进行加热处理,加热速度快,内、外部温度梯度的负效应小;同时,具有独特的生物学效应,其电磁场效应可促使酶分子活性钝化.目前,国内、外微波干燥技术已在医药化工领域得到广泛应用[1~3],特别是在中药炮制、中药干燥灭菌、中药萃取等方面表现出强大的优势,但鲜见将微波技术作为社会大生产的新技术应用到中药散剂的研究.
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肿瘤细胞分泌HCGβ及其生物学意义的研究进展
国内外大量资料[1~26]表明,肿瘤的发生、发展、恶变以及转移与人绒毛膜促性腺激素β亚单位的作用密切相关.人绒毛膜促性腺激素[2,3](Human Chorionic Gonadotropin,HCG)是由胎盘合体滋养层细胞分泌的一种维持妇女妊娠的糖蛋白激素.HCG由α链和β链共价结合而成,其N端的α链与LH、TSH、FSH共用,羟基端β链是特异的,表达完整的这种激素分子活性.临床上首先应用的是其在妊娠诊断中的意义,后来在某些滋养层疾病和某些肿瘤诊断中的价值渐为人们所认识.近年来国外学者对膀胱移行细胞异位分泌HCGβ的研究日益增加,并将其确认为揭示肿瘤生物学意义的一个颇有潜力的诊断指标.