首页 > 文献资料
-
八肽缩胆囊素调节脂多糖诱导ECV-304细胞核转录因子-κB表达的受体机制研究
目的探讨八肽缩胆囊素(CCK-8)调节脂多糖(LPS)诱导血管内皮细胞核转录因子-κB(NF-κB)表达的受体机制.方法培养人脐静脉内皮细胞株ECV-304;用溶剂(生理盐水)、LPS、CCK-8、CCK受体(CCK-R)非特异性拮抗剂丙谷胺、CCK-A受体(CCK-AR)特异性拮抗剂CR-1409、CCK-B受体(CCK-BR)特异性拮抗剂CR-2945分别或联合刺激ECV-304细胞1 h.用蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测NF-κB p65蛋白表达;用免疫细胞化学技术检测NF-κB p65蛋白核移位.结果与溶剂对照组比较,LPS可诱导ECV-304细胞NF-κB p65蛋白核移位,且其表达明显上调;CCK-8可呈剂量依赖性地抑制LPS诱导的核移位及表达上调;CCK受体拮抗剂可翻转CCK-8的上述抑制效应,其中CR-1409、CR2945、丙谷胺作用依次增强.结论 CCK-AR和CCK-BR参与介导了CCK8对LPS诱导ECV-304细胞NF-κB表达的抑制作用,其中CCKBR的作用比CCK-AR稍强.
-
八肽缩胆囊素对脂多糖诱导血管内皮细胞诱生型一氧化氮合酶表达变化的抑制作用
目的探讨八肽缩胆囊素(CCK-8)对脂多糖(LPS)诱导血管内皮细胞诱生型一氧化氮合酶(iNOS)表达变化的影响.方法培养人脐静脉内皮细胞株ECV-304细胞,用0.01、0.1和1 mg/L LPS处理2～24 h,用生理盐水、10-7 mol/L CCK-8和0.1 mg/L LPS+10-6、10-7、10-8 mol/L CCK-8处理16 h;用比色法检测培养液中一氧化氮(NO)含量、细胞NOS活性,免疫细胞化学及蛋白质免疫印迹法检测iNOS蛋白表达.结果与生理盐水处理的对照组比较,LPS诱导培养液NO含量增多、细胞NOS活性增高、iNOS蛋白表达上调;CCK-8剂量依赖性抑制LPS的上述效应,而单独作用对iNOS蛋白表达、NOS活性和NO含量均无明显影响.结论 CCK8可以明显抑制LPS引起ECV-304细胞iNOS蛋白表达上调,减少NO生成.
-
八肽胆囊收缩素对周围神经元损伤的保护作用
目的 探讨八肽胆囊收缩素(CCK-8)对硝普钠所致大鼠周围神经元(背根神经节神经元(DRGn))一氧化氮损伤是否有保护作用.方法 大鼠DRGn 培养至72 h后,随机分为正常对照组、模型组(硝普钠损伤)及实验组(损伤前先予3种不同浓度CCK-8进行干预),同时按浓度1×10-8 mol/L、1×10-7 mol/L和1×10-6mol/L将实验组分为实验组A、实验组B和实验组C.损伤后24 h用荧光染色进行形态学观察、TUNEL法检测原位细胞凋亡、免疫细胞化学检测神经生长因子(NGF)及生长相关蛋白43(GAP-43)蛋白的表达.结果 模型组DRGn的凋亡率达(49.77±0.0315)%,损伤后NGF及GAP-43蛋白可有轻度增加.实验组B和实验组C的DRGn凋亡率降至(28.38 4+0.0372)%,且NGF及GAP-43蛋白水平显著升高,与模型组相比,差异有显著性(P<0.05).结论 CCK-8对硝普钠诱导的DRGn一氧化氮损伤具有保护作用,其作用机制可能与上调NGF及GAP-43表达有关.
