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二氧化氯灭活水中肠道腺病毒及其分子机制研究
目的 探讨二氧化氯对肠道腺病毒41型(AdV41)核酸的破坏在灭活病毒中的作用,并对病毒基因组受损区域进行定位,阐明二氧化氯灭活腺病毒的消毒规律和机制.方法 在25℃,pH 7.2条件下,以不同剂量(0.1、0.5、0.7、1.0、2.0 mg/L)的二氧化氯对AdV41作用不同时间(0、0.5、1、2、3、4、5、7、10、20、30、60 min);采用大片段逐步步移PCR(long-overlapping PCR)分析二氧化氯对病毒全基因组的损伤,以细胞培养法检测病毒感染性.结果 二氧化氯浓度变化符合幂函数Ct=a0×e-kt规律；病毒的灭活率随着Ct值的增加而逐渐增高；当Ct=0.773 mg/(L· min)时,二氧化氯对AdV41可以达到4log的灭活对数值(即灭活率为99.99％).AdV41基因组各部分对二氧化氯的抵抗力不同,其5’的1～2 081 nt区域的破坏与AdV41感染性的消失一致.结论 AdV41基因组5’的1～2 081 nt区域对二氧化氯为敏感,且与病毒的感染性相关；在25℃,pH 7.2时二氧化氯灭活4log AdV41的G值为0.773 mg/(L·min).
关键词： 水消毒 腺病毒 二氧化氯 大片段逐步步移PCR -
二氧化氯灭活水中脊髓灰质炎病毒的机制
目的 探讨二氧化氯对脊髓灰质炎病毒核酸和衣壳蛋白的损伤在病毒灭活中作用,阐明二氧化氯灭活脊髓灰质炎病毒机制.方法 观察不同质量浓度(0.1、0.2、0.4、0.8、1.2 mg/L)和不同作用时间(0、1、2、4、8和12 min)二氧化氯对脊髓灰质炎病毒的作用,用大片段逐步步移RT-PCR(long-overlapping RT-PCR)分析二氧化氯对病毒全基因组的损伤,用ELISA分析病毒衣壳蛋白的损伤,通过细胞培养检测病毒感染性.结果 脊髓灰质炎病毒衣壳蛋白对二氧化氯抵抗力强于核酸;基因组各部分对二氧化氯抵抗力强弱存在差异;二氧化氯对PV15'-NCR 124-679 nt区域的损伤与PV1的灭活一致.结论 二氧化氯主要通过破坏脊髓灰质炎病毒核酸而不是衣壳蛋白来灭活病毒;病毒基因组5'-NCR内二级结构区域的破坏对脊髓灰质炎病毒具有致死效应.
关键词： 脊髓灰质炎病毒 二氧化氯 大片段逐步步移PCR ELISA 非编码区
