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磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶在p,p’-DDE致青春期雄性大鼠生殖功能障碍中的作用
目的 探讨磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶( PHGPx)在p,p’-DDE对大鼠睾丸生精细胞脂质过氧化及诱导生精细胞凋亡中的作用.方法 将20只健康清洁级50日龄雄性SD大鼠按体重随机分为4组,分别为对照(玉米油)组及低(20mg/kg)、中(60 mg/kg)、高(100mg/kg)剂量P,P’-DDE染毒组,每组5只.采用腹腔注射方式染毒,注射容积为10ml/kg,每隔ld染毒1次,连续进行10d.测定血清中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活力和丙二醛(MDA)的含量.采用Western blotting方法和检测大鼠睾丸组织PHGPx蛋白相对表达情况,采用实时荧光定量PCR(FQ-PCR)测定大鼠睾丸组织PHGPx及B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bcl-2 associated proteinX,Bax),细胞色素C(cytC)、凋亡蛋白酶活化因子-1(Apaf-1)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3 )mRNA的表达水平.结果 与对照组相比,60 mg/kgp,p’-DDE染毒组血清SOD、GSH-Px活力和睾丸组织PHGPx蛋白表达水平均降低,l00mg／kgP,P’-DDE染毒组大鼠睾丸组织中PHGPx、CytC、Apaf-1 mRNA表达水平和60 mg/kgP,P’-DDE染毒组Caspase-3 mRNA表达水平较高,60 mg/kg、100 mg/kgp,p’-DDE染毒组Bax mRNA表达水平均升高,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 PHGPx在P,P’-DDE所致男(雄)性生殖功能紊乱中起拮抗作用.
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兔红细胞PHGPx活性研究及中药干预
目的:探讨磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶(PHGPx)在动脉粥样硬化发生中的作用,以及中药补阳还五汤对PHGPx水平的影响.方法:检测动脉粥样硬化兔模型红细胞PHGPx水平,同时分组应用补阳还五汤干预治疗,观察PHGPx水平的改变及与血脂的关系.结果:实验组兔平均PHGPx活性明显低于对照组(P＜0.01),而中药组PHGPx活性水平高于实验组(P＜0.05).结论:PHGPx酶活性降低可能是动脉壁氧化损伤的机制之一,补阳还五汤对提高PHGPx水平,降血脂有作用.
关键词： 磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶 补阳还五汤 动脉粥样硬化 -
磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶的克隆及在大肠埃希菌中的表达
目的在大肠埃希菌中表达磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶(phospholipid hydroperoxide glutathioneperoxidase,PHGPx),以期用于抗PHGPx抗体的制备.方法用特异引物从基因文库中扩增出PHGPxcDNA,与表达载体重组,转化大肠埃希菌.重组体中的PHGPx经点突变作用,编码硒半胱氨酸的密码子UGA变为编码半胱氨酸的UGU.结果序列分析表明,克隆载体中包含PHGPx的完整编码序列及3'未翻译区序列;经SDS-PAGE及Western Blot证实PHGPx在大肠埃希菌中获得了成功表达.结论突变的PGPGx可以在大肠埃希菌中高效表达并可用于制备抗PHGPx抗体.
关键词： 磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶 克隆 点突变 表达 -
人类磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶的真核表达及其多克隆抗体的制备
目的在真核细胞中表达人磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶(PHGPx)并制备抗PHGPx多克隆抗体.方法用特异引物从人睾丸组织cDNA文库中扩增出人线粒体型PHGpx cDNA,与真核表达载体pcDNA3.1/His重组,在COS-1细胞内表达PHGPx.用大肠杆菌表达的突变的PHGPx免疫动物,制备抗PHGPx抗体.结果重组体pcDNA-PHGPx转染的COS-1细胞表达了人PHGPx融合蛋白,PHGPx活性为111.5μmol·mg-1·min-1,高于对照组5倍.免疫扩散测得抗PHGPx多克隆抗血清滴度为1:16;用于蛋白印迹时稀释倍数为1:500,可见特异免疫沉淀条带.结论人PHGPx在COS-1细胞内获得了表达,抗PHGPx多克隆抗体有特异性,可以用于重组表达的PHGPx的鉴定.
关键词： 磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶 基因表达 抗体 硒 -
硒与几种酶的关系
通过对硒与谷胱甘肽过氧化物酶系、磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶系、碘甲腺原氨酸脱碘酶系、硫氧还蛋白还原酶系关系的研究,阐述硒对人体健康的影响.
关键词： 硒 谷胱甘肽过氧化物酶 磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶 5′-脱碘酶 硫氧还蛋白还原酶 -
动物硒蛋白-磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶
磷脂的过氧化过程与多种疾病有关,包括炎症、动脉粥样硬化、神经退行性变化、衰老等.磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶是目前发现唯一可以直接减少膜系统及脂蛋白上的磷脂氢过氧化物,联合维生素E可抑制磷脂过氧化.磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶是谷胱甘肽过氧化物酶家族中的第2个被鉴定的含硒酶,是相对分子质量为19000(Mr)的单体酶,其基因位于人类19号染色体上.磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶曾被认为是一种保护质膜的普通的抗氧化酶,现在认为具有多种功能,与人类多种疾病的发生发展有关.
关键词： 磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶 谷胱甘肽过氧化物酶 线粒体 氧化应激 细胞凋亡
