首页 > 文献资料
-
miRNA-135b靶向作用于APC对三阴型乳腺癌细胞增殖、侵袭及迁移的影响
目的 探讨miRNA-135b在多种乳腺癌细胞系中表达及靶向APC基因对三阴型乳腺癌细胞增殖、侵袭及迁移能力的影响.方法 通过实时荧光定量(RT)-聚合酶链反应(PCR)检测miRNA-135b在正常乳腺细胞系Hs578Bst及乳腺癌细胞系Hs578T、MCF7、HCC1937、MDA-MB-231、MDA-MB-453、BT-549和MDA-MB-468中的表达,选取其中两种高表达miRNA-135b的MDA-MB-231、MDA-MB-468为对象,根据处理方法,实验分3组:空白组(自然生长细胞)、阴性对照组(转染阴性对照试剂)、实验组(转染miRNA-135b抑制剂).采用RT-PCR及Western印迹检测APC基因的表达;Cell Counting Kit-8 (CCK-8)实验、Transwell体外侵袭实验检测乳腺癌细胞增殖、侵袭及迁移能力.结果 miRNA-135b在三阴型乳腺癌细胞系中的表达量均高,其中在MDA-MB-231细胞中阴性对照组和实验组分别0.97 ±0.13、0.42 ±0.03;MDA-MB-468细胞转染miRNA-135b抑制剂后,1.02±0.03、0.47±0.04;实验组中miRNA-135b的表达受到显著抑制,差异有统计学意义.实验组APC基因mRNA及其蛋白的表达显著上调,MDA-MB-231中阴性对照组和实验组分别为1.01±0.11、1.75±0.13(P=0.013,P=0.021),MDA-MB-468中(P=0.017,P=0.014);实验组细胞增殖活性明显受到抑制MDA-MB-231中(P=0.00),MDA-MB-468中(P=0.01);侵袭及迁移能力明显降低MDA-MB-231中(P=0.002,P=0.00),MDA-MB-468中(P=0.01,P=0.00).结论 miRNA-135b在多种三阴型乳腺癌细胞中呈高表达,可靶向抑制APC基因,促进三阴型乳腺癌细胞系MDA-MB-231及MDA-MB-468的增殖、侵袭及迁移.
关键词： 乳腺肿瘤 miRNA-135b APC CCK-8试验 Transwell试验 -
过表达CXCR4基因对人脐带间充质干细胞迁移作用的影响
[目的]通过transwell趋化实验,观察经慢病毒转染后过表达CXCR4的人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,HUMSCs)是否具有更好的迁移作用.[方法]通过组织贴壁法,分离和培养来源于人脐带华通胶组织中的MSCs.经慢病毒转染,将CXCR4目的基因转染至第3代HUMSCs,并进行免疫荧光、western blotting检测在HUMSCs中表达CXCR4基因的情况.通过transwell小室进行HUMSCs的趋化迁移试验检测,观察转染CXCR4基因后的HUMSCs迁移能力是否增强.[结果]自脐带分离培养的HUMSCs通过慢病毒转染后,可过表达CXCR4基因.Transwell试验发现,过表达CXCR4的HUMSCs较正常HUMSCs和未转染目的基因的HUMSCs,迁移的细胞数明显增加(P＜0.05).[结论]通过慢病毒转染过表达CXCR4的HUMSCs,其趋化、迁移能力明显增强.
关键词： 人脐带间充质干细胞 CXCR4基因 Transwell试验 -
Src激酶抑制剂PP2对人舌鳞癌Tca8113细胞侵袭和转移的抑制作用
目的 探讨Src激酶抑制剂PP2对人舌鳞癌Tca8113细胞侵袭、迁移能力的抑制作用.方法 采用5、10、20μmol/L Src激酶抑制剂PP2处理Tca8113细胞24 h,分别使用Transwell小室和划痕法,测定PP2对Tca8113细胞侵袭和迁移能力的影响.结果 处理24 h后,5、10、20μmol/L Src激酶抑制剂PP2处理组的p-Src表达均较未加药组明显下降(P均<0.05);未加药组及5、10、20μmol/L PP2处理组的穿膜侵袭细胞数分别为(232.76±28.65)个、(186.53±21.34)个、(129.18±17.96)个、(37.82±12.41)个,迁移细胞数分别为(259.38±25.27)个、(193.45±20.18)个、(143.24±18.04)个、(32.94±14.39)个,细胞迁移率分别为(11.51±0.84)％、(8.06±0.51)％、(5.13±0.57)％、(2.18±0.12)％,整体差异均有统计学意义(F=73.852、85.687、48.157,P均=0.000),且与PP2剂量呈负相关.结论 Src激酶抑制剂PP2能够有效抑制人舌鳞癌细胞Tca8113侵袭和迁移能力,并且效果呈浓度依赖性,可能对治疗人舌鳞癌具有一定的临床价值.
关键词： Src激酶 抑制剂PP2 人舌鳞癌 Transwell试验 划痕法
