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miRNA-135b靶向作用于APC对三阴型乳腺癌细胞增殖、侵袭及迁移的影响
目的 探讨miRNA-135b在多种乳腺癌细胞系中表达及靶向APC基因对三阴型乳腺癌细胞增殖、侵袭及迁移能力的影响.方法 通过实时荧光定量(RT)-聚合酶链反应(PCR)检测miRNA-135b在正常乳腺细胞系Hs578Bst及乳腺癌细胞系Hs578T、MCF7、HCC1937、MDA-MB-231、MDA-MB-453、BT-549和MDA-MB-468中的表达,选取其中两种高表达miRNA-135b的MDA-MB-231、MDA-MB-468为对象,根据处理方法,实验分3组:空白组(自然生长细胞)、阴性对照组(转染阴性对照试剂)、实验组(转染miRNA-135b抑制剂).采用RT-PCR及Western印迹检测APC基因的表达;Cell Counting Kit-8 (CCK-8)实验、Transwell体外侵袭实验检测乳腺癌细胞增殖、侵袭及迁移能力.结果 miRNA-135b在三阴型乳腺癌细胞系中的表达量均高,其中在MDA-MB-231细胞中阴性对照组和实验组分别0.97 ±0.13、0.42 ±0.03;MDA-MB-468细胞转染miRNA-135b抑制剂后,1.02±0.03、0.47±0.04;实验组中miRNA-135b的表达受到显著抑制,差异有统计学意义.实验组APC基因mRNA及其蛋白的表达显著上调,MDA-MB-231中阴性对照组和实验组分别为1.01±0.11、1.75±0.13(P=0.013,P=0.021),MDA-MB-468中(P=0.017,P=0.014);实验组细胞增殖活性明显受到抑制MDA-MB-231中(P=0.00),MDA-MB-468中(P=0.01);侵袭及迁移能力明显降低MDA-MB-231中(P=0.002,P=0.00),MDA-MB-468中(P=0.01,P=0.00).结论 miRNA-135b在多种三阴型乳腺癌细胞中呈高表达,可靶向抑制APC基因,促进三阴型乳腺癌细胞系MDA-MB-231及MDA-MB-468的增殖、侵袭及迁移.
关键词： 乳腺肿瘤 miRNA-135b APC CCK-8试验 Transwell试验 -
miRNA-135b对鼻咽癌细胞侵袭和转移的促进作用
目的 研究miRNA-135b对鼻咽癌CNE1细胞系侵袭和转移的影响和作用机制.方法 用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测miRNA-135b在鼻咽癌CNE1细胞系中的表达,分别在鼻咽癌CNE1细胞系中过表达和下调miRNA-135b,通过微孔滤膜培养小室及双室联合培养系统(Transwel TM)检测肿瘤细胞迁移和侵袭能力,采用Western blotting检测大型肿瘤抑制因子同源蛋白2(LATS2)的表达.结果 miRNA-135b在鼻咽癌CNE1细胞系中高表达,通过增强miRNA-135b表达,鼻咽癌CNE1细胞的侵袭和转移能力有所提升;通过靶向miRNA-135b干扰载体,下调miRNA-135b表达,鼻咽癌CNE1细胞的侵袭和转移能力有所下降.增强miRNA-135b表达,LATS2活性和表达下降,而下调miRNA-135b表达,LATS2活性和表达上升.结论 miRNA-135b过表达会提升鼻咽癌CNE1细胞的侵袭和转移能力,下调miRNA-135b表达可有效抑制鼻咽癌细胞增殖,促进细胞凋亡.miRNA-135b的表达可能通过影响LATS2活性影响鼻咽癌细胞的生长.
关键词： 鼻咽肿瘤 miRNA-135b 侵袭 转移
