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脂肪来源干细胞的基础研究及成脂应用进展
目前已经证实可以从脂肪组织中获取具有多向分化能力的细胞[1-2],这些细胞一般被称之为脂肪来源干细胞( adipose derived stem cells,ADSC)、脂肪来源基质细胞(adipose derived stromal cells,ADSC)、脂肪来源的间充质祖细胞(adipose derived progenitor cells)或前脂肪细胞(preadipocytes),然而这些不同的命名在文献中往往混淆使用,为有利于文献的发表交流,国际脂肪利用科技学会(international society of fat to use technology)已经达成了共识,采用“脂肪来源干细胞”( ADSC)来定义从脂肪组织中分离出来的具有多向分化潜能的细胞群.
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子痫前期患者胎盘间充质干细胞抑制淋巴细胞增殖的研究
目的：纯化和体外培养子痫前期患者的胎盘间充质干细胞（ pMSCs），研究子痫前期患者pMSCs的免疫抑制能力。方法从子痫前期患者及正常妊娠者胎盘组织中纯化培养pMSCs，应用Transwell板将pMSCs与混合淋巴细胞共培养，检测淋巴细胞数，计算淋巴细胞增殖抑制率。在培养基中加入干扰素γ，分别从mRNA水平和蛋白质水平检测pMSCs的吲哚胺双加氧酶（indoleamine 2，3-dioxygenase，IDO）表达水平。结果来源于子痫前期患者的PMSCs和正常妊娠者的形态相同，表达CD44、CD29、CD73、CD90、CD105、HLA-I类分子，极少表达CD34、CD45、CD14及HLA-Ⅱ分子。能够在体外被诱导分化为成骨细胞及成脂细胞。细胞释放的可溶性分子具有抑制淋巴细胞增殖的作用；细胞表达低水平的IDO，但当受到IFN-γ刺激后，表达水平显著提高（ P ＜0．05）。对照正常妊娠组和子痫前期组pMSCs对淋巴细胞增殖的抑制率和表达IDO水平，差异均不具有显著性（ P ＞0．05）。结论 pMSCs所表达的IDO和释放的可溶性分子可能与PE的发生、发展无关；由于现有体外培养技术不能反映pMSCs在体内的状态，也可能导致原本存在的差异难以体现出来。
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不同成脂条件下人骨髓间充质干细胞的早期成脂特性
背景：目前骨髓间充质干细胞的成脂诱导方法众多，其主要诱导成分包含吲哚美辛或罗格列酮。各种方法均能诱导骨髓间充质干细胞成脂分化，但其成脂诱导效率和机制尚缺少相互对比。
目的：比较不同成脂诱导方法对人骨髓间充质干细胞的早期成脂效果，并探讨其成脂诱导差异的可能机制。
方法：分离培养人骨髓间充质干细胞，通过油红O染色和成脂相关基因检测，比较3种不同诱导方法对人骨髓间充质干细胞的成脂效果。在诱导早期不同时间点(0，1，3，7 d)检测成脂相关基因PPARγ， C/EBPα，Adiponectin，Leptin mRNA表达。Western blot检测成脂诱导第7天时PPARγ、C/EBPβ蛋白表达，并比较DIMI，DIMR对PPARγ-Ser273位点磷酸化作用。
结果与结论：①油红O染色和成脂相关基因检测结果显示，在骨髓间充质干细胞成脂诱导分化第7天， DIMR组成脂效果明显强于DIM组和DIMI组；②Western blot检测结果显示在成脂第7天，DIMI组PPARγ、C/EBPβ蛋白表达量高于其他组，差异有显著性意义；③DIMR组PPARγ-Ser273位点磷酸化比例低于DIMI组；④结果表明，含罗格列酮的成脂培养基DIMR对人骨髓间充质干细胞的早期成脂诱导作用强，且该作用可能与减少PPARγ-Ser273位点磷酸化有关。 -
Pluronic F-127水凝胶复合骨髓间充质干细胞构建组织工程化脂肪的体外研究
本实验应用Pluronic F-127水凝胶三维培养大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),观察其生物相容性,并研究其对BMSCs诱导分化成脂肪细胞的影响.原代培养SD大鼠BMSCs,经诱导分化成脂、成骨和成神经鉴定后,用MTT法检测Pluronic F-127水凝胶对BMSCs的细胞毒性；将P4 BMSCs均匀混合于水凝胶中,复合BMSCs的水凝胶经成胶后分别用成脂诱导液和完全培养基培养,观察并记录脂滴、脂肪细胞及脂肪组织形成情况,培养2周后油红O染色鉴定.结果表明BMSCs在Pluronic F-127水凝胶中能较好的黏附、生长及增殖.成脂诱导的水凝胶中BMSCs可分化为脂肪细胞,其中少部分聚集成脂肪细胞团,形成脂肪样组织,并经油红O染色鉴定证实.而仅加入完全培养基的水凝胶内BMSCs则未发生分化.提示BMSCs可在Pluronic F-127水凝胶三维支架中培养并被成功诱导分化为脂肪细胞,利用水凝胶负载BMSCs向脂肪细胞诱导分化可望为组织工程化脂肪提供新的思路,PluronicF-127水凝胶可作为BMSCs治疗体外培养的良好支架.
