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2-BFI对星形胶质细胞糖氧剥夺损伤的保护及抗线粒体凋亡的研究
目的 探讨2-BFI对星形胶质细胞糖氧剥夺损伤(oxygen-glucose deprivation,OGD)的保护作用,并从抗线粒体凋亡途径探讨2-BFI抗糖氧剥夺损伤的机制.方法 原代培养星形胶质细胞,制成糖氧剥夺损伤模型,分为对照组、OGD组、OGD+ 2-BFI组,药物组分为0.75、1.5、3.0、6.0、12.0(μg/ml)五个浓度,2-BFI干预后测定细胞活力,选出佳的药物浓度,以该浓度进一步在细胞水平上研究2-BFI对线粒体膜电位、caspase-3活性、细胞凋亡率的影响.组间比较采用SPSS 17.0进行单因素方差分析.结果 各个浓度的2-BFI均能提高糖氧剥夺损伤后的星形胶质细胞存活率,其中以1.5μg/ml的效果佳;给予浓度为1.5 μg/ml 2-BFI干预OGD组能显著提高线粒体膜电位(13.50±5.88,8.48 ±4.79,P＜0.05),抑制caspase-3活性(4.56 ±0.10,4.85±0.10,P＜0.05)、降低细胞凋亡率[(24.6±1.60)％,(46.5±1.10)％,P ＜0.05].结论 星形胶质细胞糖氧剥夺损伤后,2-BFI具有提高细胞存活率,稳定线粒体膜电位、抑制caspase-3活性,进而降低细胞凋亡率的作用.
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2-BFI对EAE大鼠的脊髓TGF-β和IL-10免疫组化表达的影响
目的 探讨2-BFI对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠脊髓转化生长因子-β(TGF-β)和白介素-10(IL-10)表达的影响.方法 50只雌性SD大鼠根据随机数字表法随机分为5组:对照组、EAE组、低剂量2-BFI干预组(1.5mg/kg)、中剂量2-BFI干预组(3mg/kg)和高剂量2-BFI干预组(6mg/kg),每组10只,采用豚鼠脊髓匀浆(GPSCH)免疫诱导SD大鼠建立EAE模型,观察每组大鼠发病情况并进行临床症状评分,采用常规HE染色和LFB髓鞘染色观察中枢神经系统(CNS)的病理变化,免疫组化法检测TGF-β和IL-10表达.结果 与EAE组比较,大、中、小剂量2-BFI干预组大鼠EAE发生率下降,临床症状减轻,潜伏期延长,CNS内炎性细胞浸润减少,但仅中等剂量2-BFI在EAE临床症状和CNS内炎性细胞浸润方面差异有统计学意义(P＜0.05)；与EAE组比较,中等剂量2-BFI干预组脊髓中TGF-β和IL-10表达明显增多,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 中等剂量2-BFI对EAE大鼠的神经保护作用佳,其作用推测与上调TGF-β和IL-10的表达有关.
关键词： 2-BFI 实验性自身免疫性脑脊髓炎 多发性硬化 转化生长因子β 白介素-10 -
不同剂量2-BFI对大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎的影响
目的 观察不同剂量的2-BFI对大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)的影响.方法 将60只SD大鼠分为对照组、EAE组和2-BFI(0.75、1.5、3及6mg/kg)组,采用动物行为学、常规HE染色和LFB髓鞘染色观察大鼠的发病情况与中枢神经系统(CNS)的病理变化.结果 EAE组9只大鼠出现典型的EAE行为学改变,CNS炎性细胞浸润和髓鞘脱失.经2-BFI干预后,大鼠EAE发病率下降,临床症状减轻,潜伏期延长,CNS内炎性细胞浸润减少和髓鞘脱失减轻.但与EAE组比较,仅3 mg/kg 2-BFI在EAE临床症状和CNS内炎性细胞浸润方面差异有统计学意义(P＜0.05).结论 3 mg/kg 2-BFI对EAE大鼠有神经保护作用.
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EAE大鼠脑组织咪唑受体变化的研究
目的 观察炎性脱髓鞘脑病动物模型(EAE)大鼠脑组织咪唑啉2受体(12R)的变化,探讨12R是否参与了炎性脱髓鞘白质脑病的病理过程.方法 将大鼠分为EAE模型组及CFA对照组,EAE模型组通过免疫当天予四足垫皮下注射豚鼠脊髓匀浆(GPSCH)-CFA的方式免疫大鼠,后予腹腔注射NS0.4mL每12h一次,于发病高峰期处死.CFA对照组大鼠通过免疫当天予四足垫皮下注射NS-CFA的方式免疫大鼠,后予腹腔注射NS0.4mL每12h1次,连续19d;所有大鼠均予免疫0,48h腹股沟皮下注射百日咳菌苗0.1mL(1×109菌体).两组大鼠脑组织12R进行饱和结合试验,检测其密度和亲和力变化.结果 CFA对照组大鼠没有发病,EAE组6只大鼠,发病4只.CFA对照组脑组织12R的Kd和Bmax值分别是3.367±0.94nM和162±22.19fmol·mg-1蛋白.EAE组大鼠脑组织12R的Kd和Bmax值分别是5.416±1.153nM和263.0±31.99fmol·mg-1蛋白;与CFA对照组相比,其受体密度明显上调(n=6,P＜0.05),而亲和力明显下降(n=6,P＜0.01).结论 炎性脱髓鞘脑病模型EAE大鼠脑内12R受体密度上调,亲和力降低.
关键词： 左旋咪唑 实验性过敏性脑脊髓炎 咪唑啉2受体 放射性受体配基结合试验 2-BFI -
2-BFI对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠脊髓内IFN-γ、TNF-α的影响
目的:探讨2-BFI对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)大鼠脊髓内IFN-γ和TNF-α的影响.方法:50只雌性SD大鼠随机分为5组,对照组、EAE组、低、中、高剂量2-BFI干预组,每组10只,采用豚鼠脊髓匀浆(GPSCH)免疫诱导SD大鼠建立EAE模型,观察每组大鼠发病情况；采用HE染色观察中枢神经系统(CNS)的病理变化,对其炎症浸润程度加以评分；ELISA法测定颈髓IFN-γ和TNF-α含量.结果:中剂量2-BFI组在EAE临床症状和病理学改变差异有统计学意义(P＜0.05)；中剂量2-BFI组脊髓内IFN-γ和TNF-α下降为显著(P＜0.05).结论:中剂量2-BFI对EAE大鼠具有神经保护作用,其作用机制可能与2-BFI抑制了IFN-γ、TNF-α表达有关.
关键词： 2-BFI 实验性自身免疫性脑脊髓炎 IFN-γ TNF-α
