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犬毛色、毛色基因型及性别与导盲犬培训成功率的相关性研究
目的 探究拉布拉多犬与金毛猎犬的毛色、毛色基因型及性别对导盲犬培训成功率的影响.方法 采用PCR/测序方法对45只拉布拉多犬和16只金毛猎犬的毛色基因MC1R(c.C916T)、TYRP1(c.C991T)位点进行多态性检测,并对基因型加以分型,探讨犬毛色及毛色基因型与导盲犬培训成功率的相关性.另外对中国导盲犬大连培训基地犬只的性别进行统计分析,探讨犬性别与导盲犬培训成功率的关系.结果 金毛猎犬共检测16只(14雄2雌),毛色表型均为金黄色,毛色基因型均为eeBB基因型;拉布拉多犬共检测45只(23雌22雄),毛色表型为黄色(23只)与黑色(22只),毛色基因型分别为eeBB、eeBb、EEBb、EeBB、EeBb.通过x2检验的关联度分析,拉布拉多犬与金毛猎犬的毛色及毛色基因型与导盲犬培训成功率无显著相关性(P＞0.05),另外,拉布拉多犬与金毛猎犬的性别与导盲犬成功率也无显著相关性(P＞0.05).结论 拉布拉多犬和金毛猎犬的毛色、毛色基因型及性别与导盲犬成功率没有显著相关性,不能作为预测导盲犬培训成功率的有效指标.
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拉布拉多犬神经类型相关基因SNP的分析
目的 检测拉布拉多犬基因组DNA中与神经类型密切相关的4个基因中的6个SNP位点,以期为拉布拉多犬神经类型的早期鉴定提供分子遗传学鉴定指标.方法 依据中国导盲犬大连培训基地成熟的导盲犬神经类型行为学评估标准,选取典型的安静、活泼、胆小型(弱型)三种神经类型的犬各4只为研究对象,采取静脉血,提取血细胞的基因组DNA样本,采用PCR/测序方法和PCR-RFLP分析法对12个样本4个基因的6个SNP位点:COMT(G482A)、MOAB(T199C)、ABCB1(A985T、T3442C、377-378 insC)、GNB1L(961-962 insG)进行变异型检测,并统计分析SNP位点的变异型与神经类型的关联度.结果 COMT基因G482A SNP位点的G/A型在胆小型犬中所占比例显著高于其在活泼型和安静型中所占比例(P =0.014;P=0.014),A/A型在活泼型犬中所占比例显著高于安静型和胆小型中所占比例(P =0.025;P=0.025);MAOB基因T199C SNP位点的T/C型在安静型犬中所占比例显著高于其在活泼和胆小型犬中所占比例(P =0.025;P=0.025);ABCB1基因A985T SNP位点的T/A型在活泼型犬中所占比例显著低于其在安静和胆小犬中所占比例(P =0.014;P=0.014);ABCB1基因T3442C SNP位点的T/C型在胆小型犬中所占比例显著高于其在活泼和安静型犬中所占比例(P =0.025;P=0.025);ABCB1基因的377-378 insC和GNB1L基因的961-962 insG均没有发现显著性差异(P＞0.05).结论 COMT基因G482A SNP位点的G/A型和A/A型,MAOB基因T199C SNP位点的T/C型,ABCB1基因A985T SNP位点的T/A和ABCB1基因T3442C SNP位点的T/C型与拉布拉多犬神经类型具有显著相关性,可做为拉布拉多犬神经类型早期鉴定的分子遗传诊断指标,但尚需大样本确认.
关键词： 拉布拉多犬 神经类型 单核苷酸多态性(SNP) 分子遗传学诊断 -
拉布拉多犬与金毛猎犬毛色基因MC1R(R306ter)与TYRP1(Q331ter) SNP位点的检测
目的 建立犬毛色基因MC1R R306ter (c.C916T)与TYRP1 Q331ter (c.C991T) SNP位点的检测方法.方法 采用PCR/测序的方法,对19只拉布拉多犬和15只金毛猎犬的MC1R基因c.C916T SNP位点及TYRP1基因c.C991T SNP位点的多态性进行检测,根据MC1R和TYRP1的多态性对犬的毛色基因型进行分析.结果 PCR/测序法能够对TYRP1基因c.C991T SNP位点进行明确和有效的检测.但MC1R基因c.C916T SNP位点的测序结果出现了特殊峰,经克隆/测序法确认该特殊峰型为杂合性SNP位点.毛色基因型分析表明,金毛猎犬的毛色基因型皆为纯合的eeBB(15只),未见其他基因型.拉布拉多犬的毛色基因型分别为:黑色犬EeBB(6只)、EeBb(2只);黄色犬eeBB(9只)、eeBb(2只).未发现其他如EEBB和EEBb(黑色)、eebb(黄色)的毛色基因型.另外,拉布拉多犬样本中没有巧克力色犬,也未检测出其相应的Eebb和EEbb基因型.结论 本研究成功建立了犬毛色基因MC1R R306ter(c.C916T)与TYRP1 Q331ter (c.C991T) SNP位点的检测方法,为分析毛色基因型与导盲犬培训成功率之间的相关性提供了前期工作基础.
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拉布拉多犬髋关节发育不良相关基因的SNP位点的检测
目的 检测拉布拉多犬基因组DNA中与髋关节发育不良密切相关的5个基因中的6个SNP位点,以期为拉布拉多犬的选育提供有效的遗传学诊断方法.方法 经影像学诊断,筛选出典型的6只髋关节发育不良和11只正常拉布拉多犬作为实验对象,采取静脉血,提取血细胞的基因组DNA样本,采用PCR/测序方法对17个样本的5个基因中的6个SNP位点:LAMA2(CFA1:70997779),LRR1(CFA8:29247021),SCR(CFA24:28944481),COL6A3(CFA25:51031100,51040259)和FN1(CFA37:25095511)进行变异型检测,并统计分析SNP位点的变异型与髋关节发育不良犬关联度.结果 LAMA2(CFA1:70997779),LRR1(CFA8:29247021),SCR(CFA24:28944481),COL6A3(CFA25:51031100)和FN1(CFA37:25095511)SNP位点的变异型与拉布拉多犬的髋关节发育不良没有显著相关性(P＞0.05).COL6A3(CFA25:51040259) SNP位点的A/A型与拉布拉多犬的髋关节发育不良存在极显著相关性(P=0.007).结论 COL6A3(CFA25:51040259) SNP位点的A/A型可能成为拉布拉多犬髋关节发育不良的实用性遗传学诊断指标,但尚需大样本确认.
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拉布拉多大X/Y精子分选及性别控制冷冻精液制备实验研究
目的 探讨流式细胞分选技术在分离拉布拉多犬X、Y精子方面的应用,并研究拉布拉多犬性别控制(性控)冷冻精液的制备方法.方法 人工按摩刺激法采集8只拉布拉多种公犬精液,利用SX MOFLO流式细胞仪展开X、Y精子分离实验,并对分离后的X/Y精子冷冻、解冻后进行精液重分析和品质鉴定.结果 流式细胞仪分选的X/Y精子纯度达到89％以上(89％～91％),X精子平均分离速度(4 260个/s)极显著高于Y精子分离速度(3 930个/s)(P＜0.01);常规冷冻精液和X、Y型冷冻精液性别比差异显著(P＜0.05);冻融后活率则无明显差异(P＞0.05);常规冷冻精液与X、Y型冷冻精液解冻后1h存活指数差异明显(P＜0.05),分别为0.251±0.006、0.054±0.007和0.048±0.006;冻融后顶体完整率差异显著(P＜0.05),分别为77.00％±0.98％、84.66％±1.22％和84.01％±1.23％.结论 用流式细胞分选技术可以获得高纯度的拉布拉多犬X/Y冷冻精液,性别比和精液品质达到低剂量人工授精的要求.
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健康种植体咬合创伤后龈沟内Emmprin及其临床表现的变化
目的 探究种植体过度负载后,种植体龈沟液中Emmprin的表达情况以及与临床表现之间的关系.方法 选用3只雄性拉布拉多犬,在其下颌骨两侧分别植入3个种植体.待3个月愈合后,实验组采用高愈合帽模拟咬合创伤,对照组维持低愈合帽没有咬合.观察12周,每两周对种植体周围龈沟液进行滤纸条提取,-24℃保存,之后采用ELISA法检测各样本的Emmprin浓度;同时检测种植体周探诊深度(iPD)、牙龈指数(iGI)和出血指数(iBI).采用配对t检验和方差分析进行数据统计.结果 实验组的Emmprin浓度在2～12周比对照组显著上升,其浓度先升后降,在6周达到峰值,而对照组基本呈稳定状念;两者之间具有统计学差异.同时,实验组的iPD、iGI以及iBI也都发生显著性改变,并在8～10周达到数值高峰.结论 咬合创伤使种植体周围龈沟液内Emmprin浓度发生改变,Emmprin浓度在过度负载后明显上升,在6周左右达到峰值,之后浓度下降;受过度负载的种植体的iPD、iGI和iBI都产生明显改变,并且在8～10周左右达到高峰;对于过度负载的种植体,Emmprin的升高较临床指征的出现更早,提示Emmprin可作为一种早期炎症因子对种植体周围炎症状况进行监测.
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荷兰免费导盲犬
很多人都看过《导盲犬小Q》,电影中那条可爱而固执的导盲犬,用自己的一生向人类诉说了忠诚、仁爱、信赖和永恒.事实上也是如此,经过训练的导盲犬是主人不可或缺的亲密伙伴,也是完全无害于公众安全的.导盲犬的挑选和训练有着严格的要求,在荷兰,所有的导盲犬都由成立于1935年的荷兰皇家导盲犬基金会(KNGF)这个非盈利公益机构培育、训练和管理.能被训练担任导盲犬的只有三个品种,拉布拉多犬、德国牧羊犬以及金毛猎犬.
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颅内支架置入比格犬和拉布拉多犬基底动脉的比较
目的 通过脑血管造影和支架置入前后神经功能评分观察比格犬和拉布拉多犬颅内血管直径的差异及神经功能,探讨拉布拉多犬基底动脉作为颅内支架置入动物模型的可行性.方法 6条比格犬和6条拉布拉多犬全身麻醉下行脑血管造影,分别测量每条犬左侧颈内动脉颈段、大脑中动脉、大脑嘴侧动脉及基底动脉的血管直径,并比较两组犬颅内血管直径的差异;采用犬神经功能评分方法比较两组犬支架置入前后神经功能评分.结果 两组犬的头颈部血管未见明显变异,两组犬左侧颈内动脉颈段、大脑中动脉、大脑嘴侧动脉及基底动脉的血管直径分别为:比格犬:(1.27±0.04)、(0.96±0.05)、(0.55±0.08)、(1.35±0.07) mm,拉布拉多犬:(1.87±0.06)、(1.34±0.07)、(0.86±0.06)、(1.65±0.04) mm.比格犬和拉布拉多犬支架置入后神经功能评分分别为(5.50±0.73)分和(2.16±0.19)分.拉布拉多犬组左侧颈内动脉颈段、大脑中动脉、大脑嘴侧动脉及基底动脉血管直径明显大于比格犬组(t =7.367、5.485、4.872、4.328,P=0.000、0.000、0.001、0.001),拉布拉多犬组支架置入后神经功能评分明显小于比格犬组(t=9.579,P=0.000).结论 拉布拉多犬的颅内血管直径变异较小,与比格犬比较其基底动脉血管较粗,适合建立颅内支架置入的动物模型.
