首页 > 文献资料
-
LAMP联合基因芯片技术在肺炎衣原体检测中的应用
目的 开发一种可以快速、准确检测肺炎衣原体的检测方法.方法 采用环介导等温核酸扩增技术(LAMP)对肺炎衣原体的特异性DNA保守片段进行扩增,将扩增的DNA与基因芯片进行杂交,观察是否可在芯片相应的区域出现杂交信号.结果 只有肺炎衣原体DNA经LAMP反应后出现特异性的扩增条带,经LAMP扩增后的产物与基因芯片杂交,仅肺炎衣原体区域出现杂交信号.结论 LAMP技术联合基因芯片技术具有高度敏感性、高度特异性的特点,可快速准确地检测肺炎衣原体.
关键词： 环介导等温核酸扩增技术 基因芯片 肺炎衣原体 杂交 -
环介导等温扩增技术在肠道传染病检测中的研究进展
环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术是一种新型的分子生物学检测技术,该技术在60～65 ℃恒温条件下,反应1h内,可把目的基因扩增到109倍.LAMP方法简单,检测快速,灵敏特异,无需特殊仪器,已广泛应用于多种细菌、病毒以及寄生虫等检测研究.充分利用LAMP技术优势,建立肠道传染病LAMP检测方法,可以提高诊断检测的效率与可靠性,节约检测时间及成本,为肠道传染病的防治提供有力的技术支持.该文综述了近年来LAMP在细菌性肠道传染病检测中的研究进展,并对LAMP方法在肠道传染病诊断中的应用前景做了展望.
关键词： 肠道传染病 环介导等温核酸扩增技术 检测 -
环介导技术在细菌性痢疾检测中的应用
目的:建立环介导等温扩增法(LAMP)检测肠道门诊感染性腹泻病例志贺菌.方法:应用Primer Explorer V5软件设计针对志贺菌的保守区引物,建立LAMP检测方法,采用荧光定量PCR法、LAMP法和分离培养法三种方法,对760例承德医学院附属医院肠道门诊腹泻患者粪便标本进行检测.对建立的方法进行特异度、灵敏度试验,与荧光定量PCR、培养法进行比对.结果:3种方法的检测结果差异无统计学意义(P>0.05).LAMP检测方法具有良好的敏感度和特异度.结论:LAMP法使用水浴锅进行等温扩增,结果可在可见光或紫外灯下直接肉眼观察.LAMP检测方法灵敏特异,简单快速,无需特殊仪器,可广泛用于基层疾控医疗机构志贺菌的检测.
关键词： 志贺菌 荧光定量PCR法 环介导等温核酸扩增技术 检测 -
环介导技术在感染性腹泻沙门菌检测中的应用与研究
目的 建立并应用环介导等温扩增法(LAMP)检测肠道门诊感染性腹泻中的沙门菌.方法 通过在线软件Primer Explorer V5设计针对沙门菌的保守区引物,建立LAMP检测方法,采用荧光定量PCR法、LAMP法和分离培养法,对本院2015年肠道门诊137例患者的粪便标本进行检测.对建立的方法进行特异度、灵敏度试验,与荧光定量PCR法和培养法进行比对.结果 137份标本中,荧光定量PCR法检出28份阳性,LAMP法检出28份阳性,分离培养法检出23份阳性.3种方法的检测结果差异无统计学意义(P＞0.05).LAMP对6株沙门菌属扩增的结果均为阳性,而对志贺菌等5株致病菌株扩增的结果均为阴性.LAMP检测方法具有良好的灵敏度和特异度.结论 LAMP检测方法灵敏特异,简单快速,比荧光定量PCR法更适用于基层疾病预防控制机构,有着较为广泛的发展前景.
关键词： 沙门菌 荧光定量PCR法 环介导等温核酸扩增技术 检测 -
LAMP结合基因芯片技术在快速检测嗜肺军团菌中的应用
目的:开发一种可以快速、准确检测嗜肺军团菌的检测方法.方法:采用环介导等温核酸扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)对嗜肺军团菌的特异性DNA保守片段和其他对照菌种DNA进行扩增,将扩增的DNA与基因芯片进行杂交,观察是否可在芯片相应的区域出现杂交信号.结果:只有嗜肺军团菌DNA经LAMP反应后出现特异性的扩增条带,与PCR扩增基因的低稀释倍数1 05相比,LAMP低稀释倍数可达107,反应的灵敏度比PCR高100倍左右,同时将经LAMP扩增后的基因与基因芯片杂交,相应的嗜肺军团菌区域可出现杂交信号.结论:LAMP技术结合基因芯片杂交技术具有灵敏度高,特异性好,简便快速等优势,可提高检验鉴定结果的准确性.
关键词： 环介导等温核酸扩增技术 基因芯片 嗜肺军团菌 检测 -
LAMP技术在肺部非典型感染病原体检测中的应用
目的 探讨利用现代生物技术开发一套可以快速、准确而且高通量检测肺部3种常见非典型感染病原体的检测方法.方法 采用环介导等温核酸扩增技术(LAMP)对导致肺部非典型感染的肺炎支原体、肺炎衣原体及嗜肺军团菌3种常见病原体的特异性DNA片段进行扩增,结合基因芯片杂交技术鉴定这3种肺部非典型感染的病原体.结果 采用LAMP技术对目的 核酸进行扩增,肺炎支原体、肺炎衣原体及嗜肺军团菌3种致病菌特异性核苷酸片段同时布阵在一张芯片上,证明该鉴定系统可检测出的DNA浓度为104拷贝大小,特异性高,芯片质量稳定.结论 LAMP技术结合基因芯片杂交技术可发挥独特的检测优势,能为常见的肺部非典型感染病原体终鉴定提供进一步佐证,可提高检验鉴定结果的准确性,具有简便快速、灵敏度高、特异性好等优势.
