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绝经后妇女长期低剂量激素替代疗法中外周血内吗啡肽1和2的分析研究
目的：在长期低剂量激素替代疗法（HRT）下,观察绝经后妇女外周血中内吗啡肽1（EM-1）和内吗啡肽2（EM-2）的变化,并对内吗啡呔与雌激素进行相关性分析。方法研究对象系北京协和医院已绝经女职工共169人,全员根据年龄共分为4组,包括50~59岁,60~64岁,65~69岁,70岁以上,每年龄段内均包括HRT组和对照组。用酶联免疫反应测试仪测定受试者血浆性激素水平,用放射免疫法检测血浆内EM-1和EM-2的含量。结果各年龄段HRT治疗组E2的水平均显著高于对照组（P<0.05）；各年龄段HRT治疗组EM-1和EM-2的水平均低于对照组,且全体受试者血浆雌激素E2的水平与EM-1具有Pearson’s相关性。结论首次观察了在长期低剂量HRT疗法下绝经后妇女外周血中内吗啡肽1和2的变化,该结果对如何保护绝经后妇女的脑认知具有一定的临床意义。
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单发佐剂性关节炎大鼠脊髓3种神经肽的变化规律
目的:观察慢性佐剂性关节炎大鼠脊髓3种神经肽含量及释放量的动态变化,以阐明其与炎症痛的关系.方法:采用完全弗氏佐剂在大鼠右后肢造成单发性关节炎模型,用放射免疫分析法检测致炎前及致炎后1～9周大鼠脊髓背半侧和脊髓灌流液中与疼痛有关的神经肽:八肽胆囊收缩素(cholecystokinin octapeptid,CCK-8)、孤啡肽(orphanin FQ,OFQ)、内吗啡肽-2(endornorphin-2,EM-2)的含量及释放量的动态变化.结果:(1)炎症期间,脊髓中CCK-8-ir释放量显著降低,脊髓背半侧含量于炎症第2周呈一过性增高;(2)OFQ-ir释放量于炎症后的第3、7周明显升高,而含量则在3周后降至正常水平以下,并以患侧变化更为明显;(3)EM-2-ir释放量于第1～2周明显降低,此后恢复正常,患侧脊髓含量1～9周均显著降低.结论:单发佐剂性关节炎大鼠脊髓背角和脊髓灌流液中有关的神经肽CCK-8、OFQ、EM-2均发生了可塑性变化.
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大鼠内吗啡肽2和μ阿片受体参与内脏感觉和运动调控的形态学证据
目的:寻找内吗啡肽2(EM2)和μ阿片受体(MOR)在内脏感觉和运动调控过程中发挥作用的形态学证据.方法:(1)麦芽糖凝集素(WGA)示踪与免疫荧光组织化学染色技术相结合的多重标记方法;(2)用稀盐酸刺激胃,制作内脏痛动物模型;(3)免疫荧光组织化学多重染色方法.结果:(1)将WGA注入大鼠胃壁,在结状神经节(NG)内可见WGA标记神经元和WGA/EM2/MOR三标神经元;在孤束核(NTS)可见WGA跨节标记的纤维和终末以及WGA/EM2/MOR三标纤维和终末;在迷走神经运动背核(DMV)可见WGA逆标神经元和WGA/MOR双标神经元及其与EM2阳性纤维或终末形成的紧密接触.(2)将稀盐酸注入胃后,NG和NTS神经元内的FOS表达明显增多;在NG内可见EM2/FOS双标神经元;在NTS内可见EM2阳性纤维和终末与SP受体/FOS双标神经元形成紧密接触.结论:EM2和MOR可能影响内脏感觉和运动功能.
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脊髓的内吗啡肽参与外周炎症诱发的镜像痛
为了观察内源性抗伤害性系统在外周炎症诱发的镜像痛中的作用,本研究在大鼠一侧足底皮下注射完全弗氏佐剂(CFA),在损伤位点诱发出持续1～72 h的热痛敏和机械性异常痛觉;CFA注射后1～24h在对侧诱发出机械异常痛觉,即镜像痛.为了进一步探讨内源性抗伤害系统对镜像痛的调节作用,用三个剂量(0.2μg,2μg,20μg)的内吗啡肽2(EM2)以及20μg的EM1分别在CFA注射前10 min经鞘内给药.结果显示三个剂量的EM2均可明显反转CFA诱发的镜像机械阈值降低,而EM1对此没有作用.上述结果提示来源于内源性抗伤害性系统的EM2,而不是EM1,在脊髓阶段可能对外周组织炎症诱发的镜像机械异常痛觉发挥抑制性作用.
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神经肽FF对内吗啡肽2镇痛作用的调节
目的：研究神经肽FF （NPFF）对内吗啡肽2（EM-2）在急性痛与炎症痛中镇痛作用的调节。方法雄性昆明系小鼠，体重（20±2） g，侧脑室埋管后，水浴甩尾实验和福尔马林痛实验各随机分为8组，即盐水对照组、EM-2组、NPFF受体拮抗剂RF9组、EM-2+RF9组、低剂量NPFF+EM-2组、中剂量NPFF+EM-2组、高剂量NPFF+EM-2组、高剂量NPFF+RF9+EM-2组，每组8只小鼠。侧脑室注射药物NPFF、EM-2和RF9。小鼠水浴甩尾实验研究NPFF对EM-2中枢镇痛的调节作用，福尔马林痛实验研究NPFF对EM-2急性痛与炎症痛镇痛的调节作用。结果水浴甩尾实验结果显示，EM-27.5 nmol可延长小鼠的甩尾潜伏期， NPFF 5，10，15 nmol可剂量依赖性增强EM-2的镇痛作用。福尔马林痛实验结果显示，EM-215 nmol对第一相急性痛与第二相炎症痛均有镇痛作用， NPFF 10，15，20 nmol可剂量依赖性增强EM-2的镇痛作用。在2个实验中，RF9与NPFF联合给药后，RF9能拮抗NPFF对EM-2镇痛的增强作用。结论在小鼠水浴甩尾实验和福尔马林痛实验中，NPFF通过作用于NPFF受体拮抗剂RF9，剂量依赖性增强EM-2对急性痛和炎症痛的镇痛作用。
