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牛血清白蛋白脂质体包封率的测定方法研究
在较温和的实验条件下,制备粒径约100 nm包载模型药牛血清白蛋白(BSA)脂质体,将双波长考马斯亮蓝G-250染料结合法用于测定BSA脂质体包封率时游离蛋白质含量.BSA包封率测定运用凝胶柱色谱法,考察不同型号的葡聚糖凝胶对游离药物和脂质体的分离性能;对于游离BSA的测定,比较了双波长紫外分光光度法、考马斯亮蓝G-250染料法(Bradford法)、双波长考马斯亮蓝G-250染料法3种测定方法.在吸收度和线性均良好的情况下,双波长考马斯亮蓝G-250染料法的检测范围为0.25～32 μg·mL-1,与Bradford法的检测范围(5～80 μg·mL-1)相比,检测灵敏度提高了20倍,检测范围更宽.由此可见,双波长考马斯亮蓝G-250染料法测定蛋白质含量时,检测限较低,线性良好,检测线性范围更宽,可作为测定BSA脂质体包封率时蛋白质含量的测定手段.
关键词： BSA脂质体 凝胶柱色谱法 包封率 双波长考马斯亮蓝G-250染料法 -
米托蒽醌类脂质纳米球包封率和包封产率的测定
目的:比较透析法和凝胶拄色谱法测定米托蒽醌类脂质纳米球的包封率和包封产率的结果,阐明包封率和包封产率的准确含义.方法:以透析法和葡聚糖凝胶柱色谱法,分离、收集,采用紫外-可见分光光度法测定药物的吸光度,分别测定游离药物和载药类脂质纳米球两部分的含药量.结果:分别测定游离的和类脂质纳米球内的药物量,求得包封率和包封产率.结论:透析法和葡聚糖凝胶柱色谱法分别测得类脂质纳米球未包封药物量与包封药物量,求得包封率和包封产率是可行的,进一步明确了包封率和包封产率的含义.
关键词： 米托蒽醌类脂质纳米球 透析法 凝胶柱色谱法 包封率 包封产率 -
参环毛蚓中溶栓活性蛋白酶的纯化和检测
参环毛蚓Pheretima aspergillum(E.Perrier)为<中华人民共和国药典>2000年版一部中收载的地龙药材来源之一.地龙始载于<神农本草经>,具有通络、利尿、清热、定惊、平喘之功,临床常用于高热神昏、惊厥抽搐、关节痹痛、半身不遂、高血压等.日本学者从赤子爱胜蚓中提取出类似尿激酶的物质,用于治疗血栓性疾病[1].近年来,随着分离技术的飞速发展及其广泛应用,对不同品种蚯蚓溶栓活性蛋白酶进行了一系列的研究,但参环毛蚓(广地龙)作为药典品种及市场上流通广的地龙药材研究相对较少.本实验对其抗栓活性部位进行了考察,采用凝胶柱色谱法在溶栓活性部位中分离得到一种溶栓活性的蛋白酶.
