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亲和超滤结合液质技术在中药有效成分发现中的应用
亲和超滤结合液质技术是一种快速、简单、有效的活性成分发现模式,尤其适用于成分组成复杂的中药提取物.通过亲和超滤可以简化活性成分的提取步骤,快速筛选具有潜在活性的小分子化合物;液质技术则可以实现活性成分的快速发现及鉴定,二者的结合在揭示中药药效物质基础以及以中药为基础的新药研发中均有重要作用.本文结合笔者近几年的研究,对亲和超滤结合液质技术在中药有效成分发现中的应用做简要综述,内容主要包括该技术的原理、特点及其应用成果与进展.
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茶叶防癌有效成分及作用机制研究
国内外的实验研究表明茶对动物的化学致癌或移植性肿瘤都有不同程度的抑制作用,但尚缺乏使用不同加工方式的茶,对动物消化道肿瘤预防作用的系统研究.在茶叶防癌有效成分方面,国内外科学家都侧重于研究茶多酚及其单体儿茶素(以EGCG为主)的作用,而缺乏对茶中其他可能的有效成分的作用以及这些成分的相互作用的研究.在茶叶防癌机制的研究方面,国内外的初步结果表明茶能减少致癌物与靶细胞DNA加合物的生成、具有抗氧化功能(清除自由基)、能恢复促癌剂所致的细胞间信息交流、能改善机体的免疫功能以及能杀伤多种肿瘤细胞株.但尚缺乏系统地从化学致癌各个关键环节同时研究多种作用机制的报道.此外缺乏有说服力的人体直接证据.本研究从整体动物试验、有效成分筛选、机制研究、以及人群干预试验四个方面对茶叶防癌作用进行了深入研究.
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中药视神经保护有效成分筛选的方法学研究
目的:(1)建立大鼠视网膜神经细胞体外培养模型;(2)建立视网膜神经节细胞(RGCs)培养模型;(3)用噻唑兰比色法(MTT法)测试不同培养时间视网膜神经细胞及RGCs存活率;(4)绘制体外培养视网膜神经细胞和RGCs存活曲线.方法:(1)取出生72h内的SD乳鼠视网膜,制成细胞悬液,放于已包被多聚鸟氨酸和层粘连蛋白的培养皿中,加20%EMDM培养液、于5%二氧化碳孵箱中培养,分别于4小时,24小时,48小时,72小时观测细胞存活情况;(2)在混合培养的视网膜神经细胞中加入5'-溴-2'-脱氧脲苷(Brdu),并于4小时,24小时,48小时,72小时观测细胞存活情况;(3)利用羊抗鼠IgG和小鼠抗大鼠Thy1.1抗体纯化视网膜神经节细胞,分别于4小时,24小时,48小时,72小时观测细胞存活情况;(4)采用MTT法测定体外培养的视网膜混合细胞和RGCs在体外培养4小时,24小时,48小时的存活率,绘制细胞生长曲线.