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电离辐射对不同放射敏感性细胞中高迁移率簇蛋白B1的诱导表达作用
目的 探讨电离辐射对已建立的宫颈癌放射抗拒细胞对比模型中高迁移率簇蛋白B1(HMGB1)和mRNA诱导表达的差异性,分析HMGB1对宫颈癌放射敏感性调控的可能性.方法 人宫颈癌细胞系HeLa重复照射12次后,传代培养调整细胞状态至细胞增殖稳定,筛选得抗拒细胞系HeLaR.以2、5、10 Gy X射线分别照射亲代HeLa和HeLaR细胞,于照射后0、0.5、2、4、6、12、18、24、36、48 h收集细胞,提取蛋白质和RNA,采用Western blot和实时荧光定量PCR法分别检测样本中HMGB1蛋白和mRNA的表达情况.结果 在蛋白水平,2、5、10 Gy X射线照射后,HeLaR细胞在48 h内均表现为HMGB1表达量下降,在48 h达到未照射水平,后有增加趋势,与照射后0h比较,2、5、10 Gy照射后6～36 h各时间点,差异具有统计学意义(t=3.574 ～9.754,P＜0.05);相反,HeLa细胞在照射后6h,其HMGB1表达逐渐增多,尤其在5和10 Gy表现明显,与照射后0h比较,2 Gy照射后6、12、48 h(t=3.945～4.864,P＜0.05)、5 Gy照射后6、36、48 h(t=-2.875～3.295,P＜0.05)及10 Gy照射后36、48 h(t=-4.480、-4.517,P＜0.05),差异具有统计学意义.在mRNA水平其趋势与蛋白水平基本一致.结论 不同剂量X射线照射后可诱导人宫颈癌细胞中HMGB1的表达变化,且其变化在人宫颈癌放射敏感细胞及放射抗拒细胞中不同.HMGB1可能参与人宫颈癌放射抗拒机制.
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阻断细胞外高迁移率簇蛋白B1抑制阿霉素诱导的小鼠心肌损伤
探讨阻断细胞外高迁移率簇蛋白B1 (HMGB1)功能对阿霉素诱导型心肌损伤的预防作用及其机制.HMGB1阻断剂甘草甜素于阿霉素造模前1 h及造模后每天按10 mg/只的剂量腹腔注射,第14天结束实验.利用超声心动和血流动力学检测心脏功能,免疫组化和天狼猩红染色观察心脏局部炎症及胶原沉积情况,免疫共沉淀和免疫共聚焦显微镜分析HMGB1与TLR2相互作用,Immunoblot检测HMGB1、MyD88、p65NF-κB及phospho-p65NF-κB蛋白含量.结果表明,与正常对照组相比,阿霉素处理引起HMGB1表达明显增加.阻断HMGB1抑制阿霉素引起的心功能失调、炎症反应及心肌纤维化.甘草甜素抑制HMGB1与TLR2相互作用以及TLR2下游信号激活.以上结果提示,阻断HMGB1通过抑制TLR2信号通路,可以改善阿霉素诱导的心肌损伤.
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蓝萼甲素通过HMGB1信号通路调节滋养细胞炎症反应
目的:研究蓝萼甲素(GLA)对JAR细胞HMGB1炎症信号通路的调节作用,探讨GLA与HMGB1相互作用的机制.方法:不同浓度GLA(0.01、0.1、1、10μg/ml)刺激培养JAR细胞48 h后,qRT-PCR与Western blot分别检测HMGB1 RNA与蛋白水平的表达;荧光素酶报告基因检测NF-κB表达活性;激光共聚焦检测HMGB1在细胞中的分布情况;ELISA检测培养液HMGB1的含量.结果:0.1μg/ml GLA刺激培养JAR细胞,HMGB1表达与NF-κB活性升高显著,随着GLA浓度的增加,两者表达水平反而下降;GLA刺激培养JAR细胞可引起HMGB1从胞核转移入胞浆,进而分泌到胞外.结论:GLA通过HMGB1信号通路调节JAR细胞炎症反应,且作用效果与剂量密切相关.
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急性颅脑损伤患者血清及脑脊液HMGB1的表达及临床意义
目的 探讨颅脑损伤患者血清及脑脊液中高迁移率簇蛋白B1 (HMGB1)的表达及预后的关系.方法 选择2009年1月至2011年6月在我院就诊的急性颅脑损伤患者80例,入院后并根据Glasgow昏迷评分(GCS)分成三组:轻度组25例(GCS 12～15分)；中度组31例(GCS 9～11分),重度组24例(GCS 3～8分).另外选择同期在我院因退行性椎间盘病变行骨科手术患者25例作为对照组(N组).颅脑损伤患者出院后3个月,根据格拉斯哥治疗结果分级(GOS)分级评定,分为三组:死亡及植物状态组(GOS 1 ～2级)；残废组(GOS 3～4级)；恢复良好组(GOS 5级).所有患者均采集上肢静脉血及脑脊液,并采用ELISA方法测定其中HMGB1的表达.结果 ①急性颅脑损伤患者血清、脑脊液中HMGB1水平均比对照组明显增高(P＜0.05)；血清、脑脊液中HMGB1水平随颅脑损伤GCS评分增加而逐渐增高；②预后不良患者(死亡及植物状态、残废组)血清、脑脊液中HMGB1水平较预后良好者明显增高(P＜0.05).结论 急性颅脑损伤患者早期监测血清及脑脊液中HMGB1水平可判断病情的轻重,并且可作为了解病情与转归的参考指标.
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血清E-cadherin、HMGB1水平在卵巢癌中的价值及其与化疗疗效的关系
目的 探讨血清上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)、高迁移率簇蛋白B1(HM GB1)在卵巢癌中的价值及其与化疗疗效的关系.方法 选取2012年10月至2014年10月应用ELISA 法测定80例初治卵巢癌患者行NAC化疗方案前后血清E-cadherin、HMGB1水平,并与60例健康体检者进行比,化疗后对患者随访36~60个月,分析血清 E-cadherin、HM GB1水平与卵巢癌近远期疗效的关系.结果 卵巢癌化疗前血清 E-cadherin、HM GB1水平高于卵巢良性肿瘤及对照组,差异有统计学意义(P<0.05),而化疗后血清E-cadherin、HMGB1水平低于化疗前,但仍高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).化疗后CR+PR组血清E-cadher-in、HM GB1水平低于化疗前,差异有统计学意义(P<0.05),且与对照组相当;而SD+ PD组患者血清E-cad-herin、HMGB1水平明显高于对照组及CR+ PR组,差异有统计学意义(P<0.05).患者化疗后E-cadherin、HMGB1水平与临床分期、肿瘤大小及淋巴结转移有关(P<0.05),经Cox风险模型分析可知,肿瘤临床分期、淋巴转移、化疗后E-cadherin>2.10 mg/L、化疗后 HMGB1>115 μg/mL是卵巢癌无进展生存期的独立危险因素(P<0.05).结论 化疗前后动态监测血清E-cadherin、HM GB1水平将有助于评价卵巢癌预后情况及复发情况,为下一步治疗提供指导.
