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异体同型输血检测方法研究
目的:探讨异体同型输血的科学检测方法.方法:将若干份单一血液按比例实施体外两两混合,分别采用流式细胞的免疫血液学检测法及PCR-STR分析技术检测样本是否为混合血.结果:流式细胞仪检测法检测205份有效混合血样,检测出为混合血样的198份,其中2例为真正的输血病人,疑似混合血样品7份,无假阴性报告;相对于洛桑的8种目标检测抗原,采用21种目标检测抗原提高了确诊率.对291份有效混合血样采用PCR-STR分析技术进行检测,结果确定为混合血样的240份,其中1份为真正的输血病人,疑似混合血样39份,其中1份为输血病人,未检测出混合血迹象的12份;当血样混合比例高于1:10时,确诊率才明显下降.结论:在现阶段,流式细胞仪检测法和PCR-STR分析法是可行的异体同型输血检测方法.
关键词： 异体同型输血 流式细胞仪 混合血样 检测方法 PCR-STR分析技术 -
核酸检测技术在国内外血液筛检中的应用
核酸检测技术(nueleic acid test,NAT)是一种新兴的血液传染病检测方法.研究表明.混合血样NAT检测可将HBV、HCV和HIV感染的平均"窗口期"缩短9、59和11d[1,2];此外NAT还可检测出因病毒变异、免疫沉默性感染、人工操作错误等原因而漏检的污染血液.
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单细胞分离荧光原位杂交法用于男女混合血DNA分型
目的 采用单细胞分离荧光原位杂交法精确分离混合血样中男性和女性细胞并进行分型检验.方法 收集男、女性血,按照男:女为1∶5、1∶10、1∶20制备混合血样,加入0.075mol/L KC1600μL,轻混、放置30min后加入150μL固定液离心留沉淀涂片,利用Vysis30-161050试剂盒进行荧光原位杂交,并用PALM激光显微捕获系统分离出男、女性细胞,使用Identifiler试剂盒复合扩增并进行检测.结果 捕获8个血细胞即可得到完整的DNA分型,且随着细胞数目的增多,检出率逐渐提高而等位基因丢失率逐渐降低.10个血细胞的检出率高,为93.75％.5μL男性血液与本实验各比例女性血混合用本文方法检验均可获得男性分型.案例混合血斑经检验获得单一男性和女性分型.结论 单细胞分离荧光原位杂交法可用于男女混合血样本中DNA分型检验.
