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有机磷化合物体外全血胆碱酯酶检测方法学研究
目的 建立一种在体外快速测定乙酰胆碱酯酶(AChE)活性的方法,为有机磷毒剂中毒的诊断及救治提供依据.方法 用改良的5,5-连硫代-双-2-硝基苯甲酸(DTNB)法测定AChE活性,以兔全血作为酶源进行方法学研究,并用不同种属动物全血进行了适用性考察,用SPECTRA MAX 190读板机测定412 nm处光密度的变化即可测定AChE活性.结果 不同动物全血40倍稀释后作为酶源较为合适,批内差异为0.44%～0.67%,批间差异为1.03%～2.27%,该方法适用于兔、比格犬、豚鼠和猴全血AChE测定.梭曼和沙林对兔全血AChE活性抑制具有明显的量效关系.结论 该方法简便、易行,适用于不同种属动物全血AChE活性的测定.
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DTNB法对食用真菌谷胱苷肽过氧化物酶的检测
目的 检测几种市售食用菌子实体中谷胱苷肽过氧化物酶活性.方法 采用二硫代二硝基苯甲酸(DTNB)直接法检测谷胱苷肽过氧化物酶活性.结果 鲜菌菇与干菌菇的酶活性不同.鲜菌菇谷胱苷肽过氧化物酶活性高于干菌菇.香菇、鸡腿菇谷胱苷肽过氧化物酶活性高于平菇、草菇.结论 食用真菌中的谷胱苷肽过氧化物酶活性与菌种和保存方法有关.
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谷胱甘肽的简便测定法
目的:建立一种快速简便测定谷胱甘肽的新方法.方法:样品1式2份,pH 8.0条件下分别和甲醛反应2 min和60 min,各取1 mL加入5 mL DTNB溶液,25 ℃反应5 min后分别测定在波长412 nm的吸光度,算出2者的差值ΔA,代入标准曲线计算得出谷胱甘肽含量.结果:谷胱甘肽浓度在0.19～0.95 g.L-1之间线性关系良好,回归方程为:Y=0.715 4X-0.000 4,r=0.999 9,大误差不超过6%.结论:方法成本低廉,简单易行,特别适合于有干扰物质存在时还原型谷胱甘肽浓度的分析.
