首页 > 文献资料
-
人牙源性间充质细胞构建牙本质-牙髓复合体样结构的实验研究
目的以复合生长因子的陶瓷化骨和Collagraft为载体建立人牙源性间充质细胞的体内立体培养模型,构建牙本质-牙髓复合体样结构.方法将经生长因子诱导的人牙源性间充质细胞接种于复合同种生长因子的陶瓷化骨和Collagraft复合材料上,将细胞-支架复合物移植到裸鼠皮下,建立牙源性间充质细胞的体内立体培养模型.4周和10周后取材,对移植物进行组织学观察和人牙本质涎蛋白(DSP)的免疫组化染色.结果 10周的实验组标本中,植入细胞在复合生长因子支架上形成了较典型的牙本质-牙髓复合体样结构,人DSP在新生牙本质样组织中呈阳性表达.对照组及4周标本中未观察到此现象.结论用人牙源性间充质细胞和复合生长因子的陶瓷化骨或Collagraft支架材料在裸鼠体内可成功构建出牙本质-牙髓复合体样结构.
-
TGF－β对鼠牙源性间充质细胞生物学行为的影响
探讨TGF－β对大鼠牙源性间充质细胞增殖和分化的影响。取出生后4 d S D大鼠牙源性间充质细胞，5 ng／mL TGF－β为刺激组并设立对照组，于第1、3、5、7 d采用MTT法计算细胞增殖情况及碱性磷酸酶活性测定，应用统计学方法分析刺激组与对照组有无统计学意义。TGF－β能诱导牙源性间充质细胞的细胞学和功能上分化并分泌胞外基质。TGF－β可促进牙源性间充质细胞的增殖与分化。
-
大鼠牙源性细胞复合nHAC/PLA支架的体外生物相容性研究
目的:探讨大鼠牙源性上皮细胞(rDECs)、牙源性间充质细胞(rDMCs)分层复合纳米羟基磷灰石-胶原/聚乳酸(nHAC/PLA)支架共生长的生物相容性.方法:①.应用酶消化法和差速消化法分离培养rDECs和rDMCs,经cytokeratin、vimentin免疫荧光染色鉴定其来源.②.应用扫描电镜观测rDECs、rDMCs分层复合nHAC/PLA支架后的生物相容性.结果:①.成功分离培养、鉴定大鼠牙源性上皮细胞和间充质细胞,免疫荧光染色鉴定rDECs、rDMCs分别表达cytokeratin、vimentin,证明rDECs、rDMCs分别来源于牙源性上皮组织、中胚层间充质.②.扫描电镜显示:rDECs、rDMCs复合nHAC/PLA共培养5d后,椭圆形的rDECs和长梭形的rDMCs胞体充分伸展,胞质中胶原纤维和基质分泌丰富,细胞与支架相互交织成网状.10d后,rDECs、rDMCs胞质中基质分泌更加丰富,覆盖部分细胞,并与支架相融合.结论:rDECs、rDMCs在nHAC/PLA支架上增殖、分化旺盛,具有良好的生物相容性.
-
猪牙源性间充质与胶原类材料复合移植的实验研究
目的:探讨经体外培养的出生后的猪牙源性间充质细胞成牙能力. 方法:将体外培养第4代的猪牙胚细胞接种到胶原凝胶基质中,体外培养3 d后进行裸鼠体内移植,6 W后取材观察.结果:猪牙胚细胞原代培养过程中可见上皮样细胞与成纤维样细胞混杂存在,传代3次后上皮样细胞消失.细胞-胶原基质复合物取材结果显示细胞聚集的区域可见牙本质-牙髓复合体样结构.结论:经体外传代培养后未经体外诱导的牙胚细胞接种到胶原凝胶基质所构建的组织工程牙齿有牙本质-牙髓复合体样结构形成,说明牙胚细胞经体外培养后其所获得的发育信息仍可保持,是研究牙齿发育构建模型及组织工程牙齿的理想的种子细胞.
-
干细胞技术与牙齿再生的研究进展
牙齿是一个复杂的生物器官，由多种组织组成，包括牙釉质、牙本质、牙骨质和牙髓，牙齿脱落是常见的器官衰竭[1]。牙齿及其支持组织是由上下颌突和额鼻突的外胚层及外胚间叶细胞发育而来，其发育是一个长期、复杂的生物学过程，包括细胞与细胞、上皮与间充质的相互作用，细胞分化，形态发生，组织矿化和牙齿的萌出，而牙胚的分化和发育过程是依赖于特定牙齿发生部位的上皮组织及其下方的间充质组织相互作用而形成的，故对于再生的牙齿来说，其发育至少需要两种细胞，即牙源性上皮细胞及牙源性间充质细胞，而牙齿再生研究的方向多半是寻找这两种细胞的替代物。
-
人牙源性间充质细胞向成牙本质细胞的诱导分化
目的:建立人牙源性间充质细胞向成牙本质细胞分化的体外诱导方案.方法:应用bFGF+IGF-1或TGF-β1分别对培养早期的人牙源性间充质细胞进行平面定向诱导,观察诱导后细胞的形态学改变,采用免疫荧光染色和RT-PCR方法检测成牙本质细胞标志物--DSP蛋白和DSPP mRNA在诱导后细胞中的表达,并通过Von Kossa染色检测诱导后细胞的矿化能力.结果:诱导后部分细胞出现单侧较长的细胞突起,表达DSP蛋白和DSPP mRNA,体外连续培养可自发形成矿化结节,出现较典型的成牙本质细胞的形态和功能特征.结论:bFGF+IGF-1或TGF-β1可促进牙源性间充质细胞向成牙本质细胞分化.
-
用人牙源性上皮和间充质细胞构建组织工程化牙齿样结构的实验研究
目的:以人牙源性上皮和间充质细胞作为种子细胞在裸鼠体内构建牙齿样结构.方法:将体外培养的人牙源性上皮细胞和经生长因子诱导后的牙源性间充质细胞分层接种于经塑形的陶瓷化骨或Collagraft三维支架上,将形成的细胞/支架复合物移植到免疫缺陷小鼠的皮下,建立牙源性上皮细胞复合间充质细胞的体内立体培养模型.14～18周后取材,采用HE染色、改良丽春红三色法、免疫组化和原位杂交方法检测移植物中的组织新生情况.结果:细胞在三维支架上形成了包含釉质样组织和牙本质牙髓复合体的牙齿样结构.新生的釉质样组织表达人成釉蛋白,其周围残留的牙源性上皮细胞表达人釉原蛋白mRNA.同时,人DSP蛋白在牙本质样组织中呈阳性表达.所有对照组标本中均未观察到该现象.结论:以优选出并经塑形的三维支架为载体,在裸鼠体内建立牙源性上皮细胞复合间充质细胞的立体培养模型,成功构建出组织工程化牙齿样结构.
-
人牙源性间充质细胞体内立体培养模型的建立--构建组织工程化牙本质和牙髓组织
目的:以陶瓷化骨和Collagraft复合材料为载体建立人牙源性间充质细胞的体内立体培养模型,构建组织工程化牙本质和牙髓组织.方法:将经生长因子诱导的人牙源性间充质细胞接种于陶瓷化骨和Collagraft复合材料上,将细胞/支架复合物移植到裸鼠皮下,建立牙源性间充质细胞的体内立体培养模型.4周和10周后取材,对移植物进行组织学观察和DSP的免疫组化染色.结果:10周的实验组标本中,植入的细胞在支架上形成了不太典型的牙本质和牙髓样组织,新生的牙本质样组织和其内侧出现极化的细胞均表达人DSP.对照组和4周标本中未观察到此现象.结论:用人牙源性间充质细胞和Collagraft或CBB载体在裸鼠体内可成功构建出组织工程化牙本质和牙髓样组织.
