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miR-203靶向抑制survivin影响胶质瘤细胞的生长和增殖
目的 探讨miR - 203靶向抑制survivin对人胶质瘤细胞株U251生长和增殖的影响.方法 利用生物信息学预测miR -203靶基因；通过脂质体将miR - 203模拟物或表达质粒转染至U251细胞,使用Real - time PCR和Western blot检测靶基因survivin的mRNA和蛋白水平,采用双荧光素酶报告基因系统进行功能验证,应用细胞生长曲线、MTT实验、流式细胞术评价细胞生长、增殖和凋亡的变化及对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)和塞来昔布的敏感性.结果 TargetScan预测发现survivin是miR - 203的靶基因；转染miR - 203模拟物或表达质粒后,Real - time PCR与Western blot结果分别提示survivin的mRNA和蛋白水平下调(P＜0.05)；双荧光素酶报告分析技术证实抗凋亡基因survivin为miR - 203的直接靶点；细胞生长曲线结果显示miR - 203组的生长速度明显受抑(P＜0.05)；MTT实验表明miR - 203组的增殖能力减弱(P＜0.05)及药物敏感性增加；流式细胞术结果示miR -203组的凋亡比例明显升高(P＜0.01).结论 miR - 203在胶质瘤细胞中能靶向抑制survivin的表达,是一个抗增殖、促凋亡的miRNA,有可能作为今后胶质瘤干预治疗的新靶点.
关键词： MicroRNA-203 神经胶质瘤 survivin 细胞生长 细胞增殖 -
微小RNA-203与肿瘤
微小RNA (miR)-203具有细胞干性抑制潜能,可通过抑制细胞干性相关转录因子的表达来调节细胞上皮样分化.研究表明miR-203在多种肿瘤组织中表达异常,包括膀胱癌、乳腺癌、结肠癌和胰腺癌等.miR-203通过调节细胞增殖、分化和凋亡在肿瘤的发生发展中发挥重要作用.
关键词： 肿瘤 MicroRNA-203 靶基因 -
microRNA-203在膀胱癌中的表达及功能研究
目的:验证microRNA-203在膀胱癌组织中的表达水平,并观察microRNA-203对膀胱癌细胞T24增殖和转移能力的影响.方法:选取膀胱癌组织和正常组织各20例,通过实时定量PCR分析microRNA-203的表达.通过转染上调microRNA-203在T24细胞中的表达,并通过PCR验证转染效率.再进一步通过CCK-8 法检测microRNA-203上调后细胞增殖能力的变化.采用Annexin VPI双染法观察microRNA-203对膀胱癌细胞凋亡的影响,采用transwell法观察microRNA-203对膀胱癌细胞转移能力的影响.结果:与正常组织相比,膀胱癌组织的microRNA-203表达明显降低(P＜0,.05).上调T24细胞microRNA-203表达后,与对照组相比,细胞增殖能力明显减弱,并且可观察到有凋亡现象发生.进一步的transwell法可观察到microRNA-203可明显抑制T24细胞侵袭.结论:microRNA-203在膀胱癌的发生发展过程中发挥着明显的抑癌作用.
关键词： 膀胱癌 MicroRNA-203 增殖 侵袭 -
MicroRNA-203对人下咽癌细胞转移能力的影响及其机制研究
目的：研究MicroRNA-203对人下咽癌细胞迁移能力的影响及作用机理。方法利用生物信息学方法预测Mi-croRNA-203的下游调控靶分子,利用荧光素酶报告基因实验、qRT-PCR、与Westenr blot等方法对其中与调节细胞迁移有关的靶分子MEKK1进行验证,证实下咽癌细胞中MEKK1的表达是否受MicroRNA-203的影响。通过细胞迁移实验研究MicroRNA-203对下咽癌细胞迁移能力的影响,进一步阐明可能影响下咽癌转移能力的因素。结果在过表达MicroRNA-203的下咽癌细胞中,Westenr blot检测靶基因蛋白表达量分析、qRT-PCR检测靶基因mRNA表达量和双荧光素酶报告基因实验结果均提示MicroRNA-203下调靶基因MEKK1的表达。细胞迁移实验证明过表达MicroRNA-203可显著抑制下咽癌细胞的迁移能力。结论 MEKK1是MicroR-NA-203的直接下游作用靶点,MicroRNA-203有可能通过负向调控MEKK1抑制下咽癌细胞的转移能力。
关键词： MicroRNA-203 MEKK1 下咽癌 转移
