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Zn3In2S6-CEA量子点荧光探针对结肠癌细胞株SW480靶向标记及生物毒性研究
目的 量子点荧光探针是量子点-抗体复合物,可用于靶向探测肿瘤细胞并在特定条件下使肿瘤细胞发光成像,同时具有对结肠癌诊断及治疗双重功效.本研究通过Zn3In2S6-CEA量子点荧光探针对结肠癌细胞株SW480靶向标记,并进一步研究其细胞毒性.方法 用免疫组化法鉴定结肠癌细胞株SW480表达癌胚抗原(carcino-embryonic an-tigen,CEA),合成水溶性量子点Zn3In2S6并与抗CEA抗体结合形成Zn3In2S6-CEA荧光探针.用Zn3In2S6-CEA荧光探针对结肠癌细胞株SW480进行荧光标记,并用免疫荧光法检测荧光信号.用M TT法和流式细胞术检测与Zn3In2S6-CEA荧光探针结合后结肠癌细胞的增殖抑制和凋亡情况.结果 新型Zn3In2S6-CEA量子点荧光探针可有效与结肠癌细胞株SW480结合,分别在荧光显微镜和共聚焦显微镜下显示其对SW480细胞株成功标记.5％ 浓度组Zn3In2S6-CEA探针在2、24、48和72 h细胞抑制率分别为0.002262、0.101111、0.213652和0.301923,CuInS2@ZnS-CEA探针分别为-0.014933、0.111301、0.235352和0.303073.细胞毒性实验析因设计的方差分析结果表明,在48 h时,Zn3In2S6-CEA探针组细胞抑制率显著低于CuInS2@ZnS-CEA探针组,t=23.928,P<0.001;其他时间点两组细胞抑制率差异无统计学意义;且两探针组的细胞抑制率均随着时间的增大而增大,不同时间点之间的细胞抑制率差异有统计学意义,F=4721.4001,P<0.001.探针和时间对细胞抑制率的交互作用差异有统计学意义,F=17.3660,P<0.001.模型拟合效果理想,R2=0.999.流式细胞术实验结果与MTT法实验结果基本一致.结论 结肠癌细胞株SW480胞膜和胞质中大量表达CEA抗原.新合成Zn3In2S6-CEA探针对其胞质和胞膜有效标记后,证实在孵育到达一定时间点时,Zn3In2S6-CEA探针的细胞毒性相比CuInS2@ZnS-CEA探针较低.
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应用量子点荧光探针检测Gfi1蛋白在结外NK/T细胞淋巴瘤中的表达
目的 探讨应用量子点(QDs)荧光探针检测结外NK/T细胞淋巴瘤(ENKTCL)中独立生长因子(Gfi1)蛋白的表达及其与临床预后的关系.方法 收集67例确诊为ENKTCL患者的临床病理资料,并进行随访.Gfi1蛋白的表达分别用QDs荧光探针法及免疫组化法检测,并比较2种方法检测的阳性率.应用Kaplan-Meier法及log-rank检验对生存资料进行分析,并比较Gfi1蛋白阳性表达组与阴性表达组的5年总生存率.结果 QDs荧光探针法及免疫组化法检测Gfi1蛋白在ENKTCL中阳性表达率分别为85.07%、73.13%,2者相比差异有统计学意义(P＜0.05);2种方法Gfi1蛋白定位相同(细胞核),但荧光探针法的荧光强度较大,亮度较高.Gfi1阳性表达组与阴性表达组的5年总生存率分别为12.90%、54.70%,Gfi1阳性表达组的预后差于Gfi1阴性表达组(P＜0.05).Gfi1蛋白表达是影响生存期的独立预后因素.结论 QDs荧光探针法较免疫组化法能有效识别ENKTCL瘤组织中的Gfi1蛋白,Gfi1蛋白在ENKTCL瘤组织中的表达与ENKTCL的预后有关,Gfi1可作为判断ENKTCL预后的重要指标.
关键词： 量子点荧光探针 独立生长因子 结外NK/T细胞淋巴瘤 预后 -
量子点荧光探针用于汉坦病毒重组抗原的检测
目的 应用量子点荧光探针对汉坦病毒(Hantavirus,HV)重组抗原进行检测.方法 合成水溶性量子点荧光纳米颗粒,并在其表面修饰G蛋白和anti-HV抗体作为量子点荧光探针,对HV重组抗原进行检测并优化检测条件.结果 量子点与抗体的佳偶联条件:pH 6.0、反应时间2h、抗体浓度为20 μg/ml.用本方法检测HV重组抗原的低检测值为5 ng/ml.结论 该探针能有效的识别HV抗原,且操作简便快速,为HV重组抗原的检测和肾出血热综合征的诊断提供了新方法.
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量子点荧光探针检测cN0舌鳞癌颈淋巴结微转移的研究
目的:应用特异性量子点荧光探针检测临床颈部淋巴结阴性(cN0)舌鳞癌颈部淋巴结微转移情况,比较其与免疫组化和HE染色标记转移灶的精确度.方法:用量子点荧光探针、免疫组化染色和HE染色3种方法检测39例舌鳞癌患者的586枚颈淋巴结标本,分析其微小转移灶检出率.结果:量子点荧光探针、免疫组化染色和HE染色检测颈淋巴结微转移阳性率分别是33.33％(13/39例)、25.64％(10/39例)和10.26％0(4/39例),量子点免疫荧光法检出率明显高于其他两法,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:量子点探针荧光检测技术可应用于舌鳞癌颈部淋巴结微转移的检测.
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应用量子点荧光探针检测裸鼠舌癌组织中bcl-2表达
目的:探讨应用量子点荧光探针检测裸鼠舌鳞癌移植瘤组织中bcl-2蛋白的可行性及其研究价值.方法: 10只BALB/c-nu裸鼠皮下接种舌鳞癌Tca8113细胞悬液,待瘤体长至约1 cm3时处死裸鼠,取瘤组织制成石蜡包埋组织切片和冰冻切片,经病理诊断证实为瘤组织后,应用量子点荧光探针通过间接免疫荧光法标记,在荧光显微镜下观察组织切片中的bcl-2蛋白,并与免疫组织化学检测的bcl-2蛋白进行比较.结果:量子点荧光探针可分别与石蜡和冰冻组织切片中的bcl-2蛋白结合,在紫外荧光激发下发出特定荧光,主要分布于细胞浆,与免疫组织化学检测的bcl-2蛋白定位相同.结论:量子点荧光探针可应用于裸鼠舌鳞癌移植瘤组织中检测特定蛋白.
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临床颈部淋巴结阴性舌鳞癌中肿瘤转移相关因子1的表达及与病理分级的关系
目的 应用量子点荧光探针检测临床颈部淋巴结阴性(cN0)舌鳞癌组织中肿瘤转移相关因子1(MTA1)蛋白的表达强度,探讨MTA1的表达与舌鳞癌组织病理分级的相关性.方法 量子点荧光探针及免疫组化染色法检测48例舌鳞癌标本MTA1在鳞癌组织及癌周围正常组织中的表达,同时按照组织病理分级分组比较各组间MTA1蛋白表达强度的差异.结果 量子点荧光探针检测MTA1蛋白在高分化(Ⅰ级)、中分化(Ⅱ级)及低分化(Ⅲ级)组中的阳性表达率分别为42.1％、73.3％、85.7％,各组间差异有统计学意义(P＜0.05);免疫组化染色检测MTA1蛋白在3组中的阳性表达率分别为36.8％、66.7％、78.6％,各组间差异有统计学意义(P＜0.05),即分化程度越低,其阳性表达率越高.结论 MTA1蛋白表达强度与cN0舌鳞癌病理分化程度关系密切,MTA1蛋白可能在cN0舌鳞癌的局部浸润生长中起重要作用.
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量子点荧光探针在人舌鳞状细胞癌组织中的应用研究
目的 通过免疫荧光技术,利用量子点荧光探针在人的舌鳞状细胞癌组织中检测特定蛋白,探讨量子点荧光探针在人舌鳞状细胞癌组织中的应用.方法 相同粒径的量子点通过问接免疫荧光技术分别对人舌鳞状细胞癌组织中的P53及Bcl-2蛋白进行特异荧光标记,荧光显微镜观察蛋白定位表达;不同粒径的量子点通过间接免疫荧光技术,在同一张舌鳞状细胞癌组织切片上分别标记P53蛋白与Bcl-2蛋白,并对其定位表达进行观察.结果 相同粒径的量子点荧光探针可分别与组织中的P53、Bcl-2蛋白结合,在紫外荧光激发下发出特异红色荧光,P53蛋白结合物主要分布于细胞核;Bcl-2蛋白结合物丰要分布于细胞质;不同粒径的量子点荧光探针在同一张组织切片上可同时对P53蛋白与Bcl-2蛋白进行标记,在紫外荧光激发下2种蛋白结合物发出2种不同颜色的荧光形成鲜明对比,显示量子点荧光探针标记的蛋白定位准确,特异性高.结论 量子点荧光探针可应用于人舌鳞状细胞癌组织中的2种蛋白的特异免疫荧光标记.
