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血管内皮生长因子及其受体mRNA在前列腺癌组织中的表达
目的:探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial cell growth factor,VEGF)及其受体Flt1、KDR mRNA在前列腺癌组织中的表达.方法:采用逆转录聚合酶链反应技术对手术的33例前列腺癌和11例正常前列腺组织标本中VEGF及其受体KDR、Flt1 mRNA的表达进行检测.结果:在78.79%(28/33)前列腺癌组织和63.64%(7/11)正常前列腺组织中检测到VEGF121、VEGF 165 mRNA的表达,表达水平分别为1.03±0.54和1.39±0.66,显著高于正常前列腺组织的0.38±0.31和0.54±0.26,t值分别为3.73和3.89,P值分别为0.000 6和0.000 2.KDR、Flt1 mRNA在部分前列腺癌组织中表达,分别为48.48%(16/33)和33.33%(11/33),而在正常前列腺组织组织中未见表达;VEGF mRNA表达与KDR mRNA、Flt1 mRNA表达密切相关,P值分别为0.002和0.000.结论:前列腺癌组织中VEGF121、VEGF165及其受体KDR、Flt1 mRNA表达水平升高,且VEGF表达与其受体KDR及Flt1表达密切相关.提示VEGF及其受体KDR、Flt1在前列腺癌发生发展过程中起重要作用.
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可溶性FLT-1基因的克隆以及原核表达
目的:克隆可溶性血管内皮生长因子受体1(soluble vascular endothelial growth factor receptor 1, sVEGFR1或sFLT-1)基因的第1～3个Ig样区域,并在原核表达系统中表达.方法:采用RT-PCR的方法从人脐静脉内皮细胞中扩增sFLT-1基因的第1～3个Ig样区域,并克隆到PMD-18T载体中,经酶切及测序证实.然后采用BamHI/EcoRI双酶切,亚克隆到原核表达载体pGEX-4T-2中,并转化至E.coli BL21菌株.应用IPTG进行诱导表达,对表达产物进行Western Blot分析.结果:经RT-PCR成功扩增了sFLT-1基因第1～3个Ig样区域;成功地克隆了sFLT-1基因第1～3个Ig样区域;经IPTG诱导的重组质粒pGEX-sFLT表达出相对分子质量约为62×103的融合蛋白,与预期的结果相符.结论:成功克隆sFLT-1基因第1～3个Ig样区域,并在E.coli BL21中表达出GST-sFLT融合蛋白,为进一步研究sFLT-1蛋白在肿瘤治疗中的作用奠定了技术基础.
关键词： 内皮生长因子 受体 细胞表面/生物合成 遗传学技术 重组融合蛋白质类/遗传学 -
VEGF和受体FLT-1、FLK-1在大肠癌中的表达
目的 探讨血管内皮生长因子(VEGF) 和其受体(VEGFR:FLT-1、FLK-1)在大肠癌组织中的表达以及与大肠癌临床病理之间的关系.方法 应用免疫组织化学SP法,检测82例大肠癌及14例正常大肠组织中VEGF和FLT-1、FLK-1的表达,分析大肠癌组织中VEGF和FLT-1、FLK-1的表达与大肠癌临床病理参数之间的关系.结果 大肠癌组织VEGF和受体FLT-1、FLK-1阳性表达率与正常大肠组织比较差异有显著性(P<0.05).VEGF的表达在有无淋巴结转移组和不同的Duke's分期中差异亦有显著性(P<0.05).FLT-1和FLK-1在大肠癌组织的阳性表达呈显著正相关,(rs=0.457,P=0.000).结论 VEGF和受体FLT-1、FLK-1与大肠癌的发生密切相关,VEGF与大肠癌的预后有关.
