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MED19基因对体内胃癌细胞增殖抑制作用机制的探讨
目的 探讨MED19基因靶向RNA干扰重组慢病毒载体对体内胃癌组织抑制的机制.方法 对3组(control组、negative组及shRNA组)完成胃癌成瘤实验的裸鼠离体的胃癌组织SGC-7901细胞分别采用实时聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹(Western blot)法检测胃癌组织细胞中MED19基因的沉默效率,研究MED19基因沉默在胃癌SGC-7901细胞成瘤小鼠胃癌组织细胞增殖中的作用,采用噻唑蓝(MTT)法检测MED19基因沉默对小鼠胃癌组织细胞增殖的影响,并用流式细胞术检测MED19基因沉默后对胃癌组织细胞增殖周期的影响.结果 shRNA组裸鼠胃癌组织SGC7901细胞中MED19蛋白的表达水平低于negative组和control组(P﹤0.05);与control组和negative组相比,shRNA组裸鼠胃癌组织SGC-7901细胞的增殖能力在第3～5天降低(P﹤0.05);shRNA组胃癌组织SGC-7901细胞的G1期细胞所占比例高于control组和negative组(P﹤0.05).结论 MED19基因靶向RNA干扰重组慢病毒载体对胃癌SGC-7901细胞成瘤小鼠胃癌组织细胞的增殖和细胞周期均有明显影响.
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MED19基因靶向RNA干扰重组慢病毒对体内胃癌细胞的增殖抑制作用
目的 探讨MED19基因靶向RNA干扰重组慢病毒对体内胃癌细胞的治疗效果.方法 将SGC7901胃癌细胞株分为3组:空白对照(正常培养的SGC7901胃癌细胞,不用病毒颗粒转染)标记为BC组,阴性对照(感染阴性对照病毒颗粒)标记为NC组,病毒干扰(感染MED19-shRNA慢病毒颗粒)标记为VI组.36只实验用裸鼠随机分为3组,以BC、NC和VI标记,分别接种对应的3组不同的细胞,观察接种后3组裸鼠体内胃癌细胞的增殖情况.每7天测量1次肿瘤体积,绘制肿瘤生长曲线图.成瘤35 d后的裸鼠,统一以脱颈法处死,分离出完整瘤体,分析3组瘤体的平均质量差异及病理类型、形态学变化.结果 裸鼠皮下接种肿瘤细胞后,生长状态均良好,裸鼠的总成瘤率为94.4%.肿瘤生长曲线显示,VI组裸鼠体内肿瘤瘤体生长的速度明显低于BC组和NC组.3组瘤体经常规HE染色后光镜下观察,确认肿瘤的病理类型为低分化胃腺癌,VI组癌组织在光镜下显示细胞的形态学变化明显,细胞缩小、皱缩,呈片状坏死等征象.结论 沉默MED19表达,对肿瘤的生长、增殖有明显的抑制作用.
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Med19基因表达变化在骨肉瘤Saos2细胞增殖中的功能研究
背景与目的:近有多项研究表明,Med19基因参与多种肿瘤的形成,如肺癌、乳腺癌和胃癌等.本研究旨在探讨Med19基因表达水平的变化对骨肉瘤Saos2细胞株增殖能力和细胞周期的影响.方法:构建Med19-siRNA及Med19-0E(overexpression)慢病毒载体感染骨肉瘤SaoS2细胞,用real time-PCR验证Med19基因的沉默效率及过表达效率,MTT法检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞周期,BALB/c裸鼠移植瘤实验检测肿瘤生长情况.结果:转染Med19-siRNA后细胞增殖能力较阴性对照组显著降低(P＜0.05),G0/G1期细胞由(36.93±2.96)％上升至(54.95±2.49)％(P＜0.05).转染Med19-0E后细胞增殖能力较阴性对照组显著增加(P＜0.05),S期细胞由(13.44±0.76)％上升至(16.50±1.67)％(P＜O.05).BALB/c裸鼠移植瘤实验显示,Med19-siRNA组肿瘤体积及体质量均较对照组显著缩小和降低(P＜0.05).结论:Med19基因沉默可显著抑制SaoS2细胞体外的增殖能力,并抑制裸鼠Saos2细胞移植瘤的生长,其抑制增殖作用与诱导G0/G1期阻滞有关.过表达Med19基因可促进Saos2细胞增殖,其促进增殖作用与诱导细胞由G0/G1期向S期过渡有关.
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Medl9基因与肿瘤关系的研究进展
中介体(Mediator)是真核生物转录起始过程中的基因特异调控蛋白和RNA聚合酶Ⅱ重要的转录组成部分,早发现于酵母菌中,是由多个蛋白质亚基组成的生物大分子复合物,属于RNA聚合酶Ⅱ通用转录装置的基本组分,在真核生物mRNA合成的活化和抑制中发挥关键作用,对RNA聚合酶Ⅱ活力进行调节.Med19基因在酵母中又名ROX3(或SSN7、RMRl等).初是在研究CYC7基因突变体中发现的.野生型ROX3基因的克隆序列表示,它编码一个220个氨基酸的蛋白质.Med19基因在人体又称肺癌转移相关蛋白(LCMR1),定位于染色体chr11q12.1,蛋白质244个氨基酸组成,基因全长1605 bp.Med19(Rox3)是中介体的一个亚单位,构成了酵母RNA聚合酶Ⅱ的头部组件,在转录激活和抑制中发挥重要作用.本文就Med19基因的特点、功能及其与肿瘤等关系的新研究进展作一综述.
