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组织工程化脂肪填充材料的构建及脂肪颗粒存活研究
目的 研究组织工程化脂肪填充材料的构建及脂肪颗粒存活情况.方法 从兔脂肪组织提取血管基质部分(SVF)混合自体成熟脂肪颗粒,加或不加人生长因子神经肽Y(NPY),构建聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)组织移植复合体,并移植到兔背部皮下,同时进行对照实验.按不同组合分5组:A组为PLGA+成熟脂肪颗粒+无NPY小球;B组为PLGA+成熟脂肪颗粒+NPY小球;C组为PLGA+ SVF与成熟脂肪颗粒混合物+无NPY小球;D组为PLGA+ SVF与成熟脂肪颗粒混合物+ NPY小球;E组为SVF与成熟脂肪颗粒混合物+NPY小球.于2周、1个月、3个月后通过大体观察、组织学、荧光示踪等方法来评价不同构建方式的差异及脂肪颗粒的存活情况.结果 D组1个月、3个月时在存活体积、质地、再血管化程度方面均优于A组、B组、C组、E组,脂肪平均存活率(57.5±2.5)%,脂肪细胞生长良好,前体细胞增殖分化活跃.结论 以SVF,成熟脂肪颗粒,PLGA和NPY成功构建了性能良好的组织工程材料,明显提高脂肪颗粒移植效果.
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脂肪组织血管基质部分中克隆形成细胞治疗膝骨关节炎的能力
背景:脂肪组织消化后得到的血管基质部分是多种细胞的混合体,其中以克隆样生长的细胞组分可能是真正具有“干性”维持能力的脂肪间充质干细胞。目的:分离、传代、培养脂肪组织血管基质部分中的克隆形成细胞,并检测其在动物模型中修复膝关节软骨的能力。方法:培养新鲜分离得到的脂肪组织血管基质部分,挑选其中以克隆样生长的贴壁细胞,消化、传代、培养至第3代。通过手术建立骨关节炎兔模型,将第3代克隆形成细胞移植入模型兔关节腔,与未进行细胞移植治疗的模型兔进行比较,观察兔膝关节软骨的再生情况。结果与结论:脂肪组织中血管基质部分细胞接种后第3天,贴壁细胞中出现克隆样生长的细胞集落,生长至第5天时,克隆样生长的细胞集落数和周围的单个细胞数均增加,传代至第3代时,仍然呈克隆样的集落生长,梭形形态。大体观察和MRI检查此类克隆形成细胞能在关节腔内帮助软骨修复,增加滑液分泌,同时有助于控制炎症,溃疡面积呈缩小趋势。实验结果有助于优化脂肪间充质干细胞的体外分离、培养体系,并为临床上治疗骨关节炎提供了新的思路。
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血管基质部分与神经肽Y联合应用对颗粒脂肪移植存活率的影响
目的 观察脂肪组织中血管基质部分(SVF)与神经肽Y联合应用对颗粒脂肪移植存活率的影响.方法 从兔脂肪组织提取SVF,混合成熟颗粒脂肪组织,自体移植到兔背部皮下,同时种植含有或不含有神经肽Y的小球,于2周、1、3个月后通过大体观察、B超、组织学、免疫组织化学法分组对照来评价脂肪颗粒的存活情况;同法将人体SVF与脂肪颗粒混合物联合神经肽Y异体移植到无胸腺小鼠皮下,观察并评价人体脂肪细胞在无胸腺小鼠的存活.结果 联合应用组脂肪移植存活率(>80%)明显高于其他对照组(<66%),SVF和神经肽Y可以刺激脂肪组织的生长,并且可以增加3个月兔和无胸腺小鼠异体脂肪移植物的存活和血供.结论 SVF与神经肽Y联合应用在体内脂肪生成中起关键作用,可增加脂肪移植存活或者刺激重新脂肪生成,明显提高颗粒脂肪移植的存活率.