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  • 肺腺癌组织中miR-206的表达及其对肺腺癌细胞迁移侵袭的影响

    作者:周健;蒋国军;冯俊成;陈明治;汪茜茜

    目的:研究miR-206在人肺腺癌组织中的表达情况,探讨miR-206是否通过下调SOX4影响肺腺癌细胞系( A549)细胞的侵袭。方法收集94例肺腺癌组织标本及癌旁正常肺组织,通过实时荧光定量PCR( RT-PCR)检测各组组织中与肺腺癌相关的miR-206、miR-21、miR-34、miR-378、miR-138、miR-32、SOX4 mRNA的表达情况,Pearson相关分析检验miR-206表达量与SOX4的相关性;免疫印迹法检测两组标本中SOX4的表达情况,进一步在细胞实验中,通过转染miR-206mimic和miR-NC至离体培养的A549细胞中,免疫印迹法检测A549细胞中MMP-2、MMP-9、SOX4表达情况,划痕试验和Transwell法观察细胞迁移侵袭情况,利用荧光素酶素试验验证SOX4是miR-206的靶基因;再通过转染过表达SOX4的质粒至A549细胞,检测A549细胞中MMP-2、MMP-9、SOX4的表达情况,划痕试验和Transwell法观察细胞迁移侵袭情况。结果相比于正常肺组织,miR-206、miR-21在肺腺癌组织中的表达降低(P<0.01);miR-34、miR-378、miR-138、miR-32的表达在两组之间没有明显区别;肺腺癌组织中SOX4 mRNA的表达增加(P<0.01);miR-206与SOX4 mRNA的表达量成负相关(r=-0.344,P<0.01)。在细胞实验中,相比于miR-NC组,转染miR-206mimic后,A549细胞中MMP-2、MMP-9、SOX4的表达减少( P<0.05), A549细胞的迁移侵袭减少( P <0.01);荧光素酶试验结果显示, miR-206能降低SOX4-3'-UTR质粒的荧光素活性(P<0.05);转染过表达SOX4质粒后,相比于miR-206+空质粒组,A549细胞中MMP-2和MMP-9表达增加(P<0.05),细胞的迁移侵袭增加(P<0.01)。结论在肺腺癌组织中,miR-206低表达;miR-206可以通过下调SOX4从而抑制A549的迁移和侵袭。

  • miRNA-138模拟物转染对人乳腺癌细胞迁移、侵袭能力的影响及其机制

    作者:董超;黄远丽;徐正丰

    目的 观察miRNA-138模拟物(miRNA-138 mimics)对人乳腺癌细胞迁移、侵袭能力的影响,并探讨其可能机制.方法 选取人高侵袭性乳腺细胞系(MDA-MB-231、MDA-MB-468)及人低侵袭性乳腺癌细胞系(MCF-7)和人正常乳腺上皮细胞系(HBL-100),qRT-PCR法检测微小 RNA-138 (miRNA-138);取 MDA-MB-231并分为两组, miRNA-138 mimics组细胞系以miRNA-138 mimics转染,miR-NC组细胞系以miR阴性对照模拟物(miR-NC)转染, qRT-PCR法检测miRNA-138,Transwell迁移和侵袭实验测算迁移细胞数、侵袭细胞数,Western blotting法检测SOX4蛋白及上皮间质转化(EMT)相关标志物(E-cadherin、Fibronectin、Vimentin蛋白).结果 MDA-MB-231、MDA-MB-468、MCF-7、HBL-100中miRNA-138相对表达量分别为0.23 ± 0.08、0.42 ± 0.05、0.56 ± 0.11、1.03 ± 0.04,MDA-MB-231、MDA-MB-468、MCF-7与HBL-100比较,MDA-MB-231、MDA-MB-468与MCF-7比较,P均<0.05.miRNA-138 mimics组和miR-NC组miRNA-138相对表达量分别为13.35 ± 0.35、0.98 ± 0.05,两组比较,P<0.05.miRNA-138 mimics组和miR-NC组迁移细胞数分别为(210 ± 30)、(340 ± 18)个,侵袭细胞数分别为(100 ± 16)、(190 ± 26)个,两组比较,P均<0.05.miRNA-138 mimics组SOX、E-cadherin、Fibronectin、Vimentin蛋白灰度值分别为0.16 ± 0.08、0.59 ± 0.16、0.42 ± 0.14、0.17 ± 0.09,miR-NC组分别为0.77 ± 0.19、0.12 ± 0.06、1.19 ± 0.21、0.44 ± 0.12,两组比较,P均<0.05.结论 miRNA-138 mimics能够抑制乳腺癌细胞侵袭和迁移,机制可能与其调控SOX4基因抑制乳腺癌细胞EMT有关.

  • 大肠癌组织中SOX4蛋白的表达变化及意义

    作者:杨红军;陈娟芝;丁彦青

    目的 观察SOX4蛋白在大肠癌组织中的表达变化,并探讨其意义.方法 采用免疫组化SP法对大肠正常黏膜及原发大肠癌组织中的SOX4蛋白进行检测.结果 SOX4蛋白在大肠癌组织中的表达水平显著高于大肠正常黏膜组织(P<0.01);有淋巴结转移的大肠癌组织中SOX4蛋白表达水平明显高于无淋巴结转移者(P<0.01);SOX4蛋白表达水平与癌组织浸润肠壁深度有关(P<0.01),而与癌细胞分化程度无关(P>0.05).结论 SOX4蛋白在大肠癌组织中高表达,与大肠癌的浸润转移有关,可作为大肠癌发生发展的预测指标之一.

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