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miRNA-138模拟物转染对人乳腺癌细胞迁移、侵袭能力的影响及其机制
目的 观察miRNA-138模拟物(miRNA-138 mimics)对人乳腺癌细胞迁移、侵袭能力的影响,并探讨其可能机制.方法 选取人高侵袭性乳腺细胞系(MDA-MB-231、MDA-MB-468)及人低侵袭性乳腺癌细胞系(MCF-7)和人正常乳腺上皮细胞系(HBL-100),qRT-PCR法检测微小 RNA-138 (miRNA-138);取 MDA-MB-231并分为两组, miRNA-138 mimics组细胞系以miRNA-138 mimics转染,miR-NC组细胞系以miR阴性对照模拟物(miR-NC)转染, qRT-PCR法检测miRNA-138,Transwell迁移和侵袭实验测算迁移细胞数、侵袭细胞数,Western blotting法检测SOX4蛋白及上皮间质转化(EMT)相关标志物(E-cadherin、Fibronectin、Vimentin蛋白).结果 MDA-MB-231、MDA-MB-468、MCF-7、HBL-100中miRNA-138相对表达量分别为0.23 ± 0.08、0.42 ± 0.05、0.56 ± 0.11、1.03 ± 0.04,MDA-MB-231、MDA-MB-468、MCF-7与HBL-100比较,MDA-MB-231、MDA-MB-468与MCF-7比较,P均＜0.05.miRNA-138 mimics组和miR-NC组miRNA-138相对表达量分别为13.35 ± 0.35、0.98 ± 0.05,两组比较,P＜0.05.miRNA-138 mimics组和miR-NC组迁移细胞数分别为(210 ± 30)、(340 ± 18)个,侵袭细胞数分别为(100 ± 16)、(190 ± 26)个,两组比较,P均＜0.05.miRNA-138 mimics组SOX、E-cadherin、Fibronectin、Vimentin蛋白灰度值分别为0.16 ± 0.08、0.59 ± 0.16、0.42 ± 0.14、0.17 ± 0.09,miR-NC组分别为0.77 ± 0.19、0.12 ± 0.06、1.19 ± 0.21、0.44 ± 0.12,两组比较,P均＜0.05.结论 miRNA-138 mimics能够抑制乳腺癌细胞侵袭和迁移,机制可能与其调控SOX4基因抑制乳腺癌细胞EMT有关.
