首页 > 文献资料
-
紫花前胡素通过JAK2/STAT3抑制EC109细胞的机制
目的 探讨Janus激酶2/信号转导子和转录激活子3(janus kinase 2/signal transducer and activator of transcription 3,JAK2/STAT3)参与紫花前胡素(Decursin,Dec)抑制食管鳞癌细胞增殖的潜在机制.方法 Dec(20、40、80 μmmol/L)处理EC109细胞48 h后,MTT法检测细胞活性;TUNEL标染凋亡细胞;荧光法检测线粒体氧化应激水平;免疫印迹法检测JAK2/STAT3通路和凋亡相关蛋白含量.此外,联合应用特异性阻断JAK2/STAT3(AG490)后,从在体和离体水平观察Dec对EC109的抑制能力.结果 相对于对照组,不同浓度的Dec显著下调p-JAK2[至(55.89±6.04)％]和p-STAT3[至(45.27±8.65)％]表达,抑制EC109细胞活性(至0.43±0.078),增加凋亡率[至(35.31±8.41)％],降低MMP水平[至(37.23±6.89)％],提高活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)含量至(231.81 ±19.63)％,减弱谷胱甘肽(glutathione,GSH)活性至(46.78±6.91)％,(P＜0.05),且呈“剂量依赖性”;但未对正常食管上皮HET-1 A细胞活性产生明显影响(P＞0.05).同时,Dec下调Bcl2,上调Bax,并增加Caspase-3的裂解(P＜0.05).离体和在体水平联合应用AG490均增强Dec抗EC109细胞的能力(P＜0.05).结论Dec通过抑制JAK2/STAT3通路,激活线粒体氧化应激介导的凋亡,从而发挥抗食管鳞癌的作用.
-
不同产地的当归中紫花前胡素HPLC法含量测定
目的:研究HPLC法测定当归中紫花前胡素的方法,明确不同产地当归中紫花前胡素的含量.方法:称取不同产地的当归制备供试品溶液和对照品溶液.设定HPLC法色谱柱为TIANHE C18(250mm×4.6mm,5μm)、流动相为H3PO4-NaH2PO4缓冲液:乙腈(1:1)、流速为1ml/min、检测波长为270nm,然后进行测定方法的精密度考察、稳定性考察、线性相关考察、加样回收率考察及重复性考察等5项考察,然后进行含量测定并获取了不同产地的当归中紫花前胡素含量.结果:HPLC法测定的以上5项考察结果均良好;六种不同产地当归中紫花前胡素含量[/RSD(%)]由低到高依次排序.结论:HPLC法测定不同产地当归中紫花前胡素含量简便、快捷、准确、有效.
-
HPLC法测定6种当归植物中紫花前胡素的含量
目的 建立了6种当归植物中紫花前胡素的含量测定方法,明确当归属6种植物中紫花前胡素含量,并对其进行比较.方法 HPLC法,色谱柱:TIANHEC<,18>(250mm×4.6mm,5μm),流动相H<,3>PO<,4>-NaH<,2>PO<,4>缓冲液(稀释10倍):乙腈(1:1).流速:lmL·min<'-1>,检测波长:270nm.结果 紫花前胡素在0.343～175μg·mL<'-1>之间线性关系良好(r=0.9999),平均回收率:99.3%(n=5),RsD:1.5%.结论 6种植物中,每种植物的紫花前胡素含量有差异,且同一种植物里部位不同,前胡素含量也不同.建立的HPLC法简便易行,准确效率高,在实验研究中适用于当归类植物的紫花前胡素的定量测定.
-
RP-HPLC同时测定不同产地全当归活性成分含量的应用价值
目的 探讨反相高效液相色谱法(RP-HPLC)同时测定不同产地全当归中阿魏酸、紫花前胡素及藁本内酯含量的应用价值.方法 采用Agilent Eclipse XDB C18(250.0 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈(A)-0.05％甲酸溶液(B),梯度洗脱(0～ 10 min,10％～15％A;10 ～ 55 min,15％ ～85％A;55.1 min,10％A;55.1～60 min,10％ A),柱温25℃,流速1.0 ml/min,检测波长320 nm.结果 阿魏酸、紫花前胡素及藁本内酯在21.24～637.20、0.2528～ 7.5840、202.40 ～6 072.00 ng范围内的线性关系良好.平均回收率分别为99.53％、97.99％、99.65％,RSD均＜3.00％.结论 该测定方法准确度、灵敏度高,分离效果理想,可为完善全当归质量标准评价提供依据.
-
紫花前胡素能降低大鼠肾小管上皮细胞活性氧并抑制顺铂诱导的细胞凋亡
目的 研究紫花前胡素抑制顺铂诱导的NRK-52E正常大鼠肾小管上皮细胞凋亡的作用机制.方法 先采用CCK-8法检测(0、10、20、40、80、100、150、200)μmol/L紫花前胡素、(0、5、10、20、30、40、50) μg/mL顺铂处理24h对细胞增殖的影响,确定佳处理剂量;而后采用20 μg/mL顺铂联合(10、50、100) μmol/L紫花前胡素刺激NRK-52E细胞,CCK-8法检测对细胞活力的影响.细胞分为正常对照组、20 μg/mL顺铂刺激组、(10、50、100)μmol/L紫花前胡素处理组.倒置相差显微镜观察细胞形态改变,4,6-二氨基-2-苯基吲哚(DAPI)染色观察细胞核形态改变,流式细胞术检测细胞凋亡水平,二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)染色检测细胞内活性氧(ROS)改变,Western blot法检测细胞凋亡标志蛋白裂解型胱天蛋白酶3(c-caspase-3)、裂解型多腺苷二磷酸核糖聚合酶(c-PARP)的蛋白水平.结果 与正常对照组相比,顺铂能显著抑制细胞活性,其半数抑制浓度(IC50)约为20 μg/mL;与模型组比较,紫花前胡素预处理后,细胞内ROS水平显著降低,c-caspase-3、c-PARP蛋白水平降低,细胞凋亡减少.结论 紫花前胡素能降低NRK-52E细胞ROS水平并抑制顺铂诱导的NRK-52E细胞凋亡.
