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电磁脉冲对恒河猴淋巴细胞的损伤效应及其机制
目的:研究电磁脉冲对恒河猴淋巴细胞的损伤作用及其机理,为其防护提供参考依据.方法:用本实验室建立的电磁脉冲发生源进行照射,照射场强为6×104V/m,在5min内重复照射30次.脉宽为25～30 ns,单次脉冲前沿为20ns.用原位末端标记技术和麦格-姬姆萨染色检测凋亡细胞,用碱磷酶免疫组化技术检测Bax和Bcl-2凋亡相关蛋白的表达.结果:(1)上述场强照后1d,淋巴细胞凋亡即开始增多,照后3d接近峰值,一直持续到照后14d,与对照(照前)值比较,在照后3、7、14d淋巴细胞凋亡指数分别为对照值的2.2、2.5和2.2倍.(2)照射后外周血淋巴细胞数量也迅速减少,相同场强照射后3、7、14d约为对照值的74%,77%79%.(3)照射后3d,淋巴细胞Bax蛋白即出现增加,7d达到峰值,Bax阳性的淋巴细胞约为对照值的3.1倍.而Bcl-2蛋白照射后出现减少,于照后7d降至低,Bcl-2阳性的淋巴细胞约为对照值的36%.这些结果提示Bax能促进EMP诱发的淋巴细胞凋亡,而Bcl-2则起抑制作用.结论:EMP能够诱发恒河猴外周血淋巴细胞的太量凋亡,细胞凋亡可能是导致EMP照射后淋巴细胞数量迅速降低和免疫功能出现抑制的主要原因之一.Bax和Bcl-2在EMP诱发的淋巴细胞凋亡调控中起重要作用.
关键词： 电磁脉冲 猴淋巴细胞 凋亡 Bax和Bcl-2蛋白 -
中低强度电磁脉冲诱发大鼠淋巴细胞凋亡及其机制的研究
目的:探讨中低强度EMP对大鼠淋巴细胞的损伤效应及其机制,为其防护提供依据.方法:用本院动物中心饲养的Wistar大鼠(体重154±20g)共24只,随机分为对照、0.6×5、2.0×5和6.0×5万伏/m 4个组,每组6只.用本实验室建立的电磁脉冲发生源进行照射,每个剂量组在2min内重复照射5次.于照后24和48h分别取大鼠胸腺、脾脏和淋巴结制取细胞悬液并制成离心涂片,用原位末端标记法和麦格-姬姆萨染色检测凋亡细胞,用免疫组化技术检测Bax和Bcl-2凋亡相关蛋白的表达.结果:①照后24h,0.6万伏组淋巴细胞即出现凋亡;随着照射场强增加,凋亡率持续升高,在6万伏组达到峰值,胸腺、脾脏和淋巴结淋巴细胞凋亡率分别为对照值的6.7、4.7和8.2倍.照后48h,亦出现相同的变化趋势,三种免疫组织经6万伏照射后其凋亡率分别为对照值的6.4、4.9和8.0倍,与照后24h相同,亦显示较好的剂量效应关系.②0.6万伏照后48h,胸腺、脾脏和淋巴结三种组织Bax阳性淋巴细胞数即出现明显升高,随照射剂量增大Bax蛋白表达逐渐增强,在6万伏时达到峰值,其阳性细胞数分别为对照值的6.6,8.6和4.2倍.与Bax表达呈现相反趋势,0.6万伏照射后,Bcl-2蛋白在三种免疫组织中的表达呈减弱趋势,且随照射场强增加下降愈明显,在6.0万伏时达低值,其阳性细胞数分别为对照值的30%、24%和23%.结论:①中低强度EMP照射后可引起大鼠淋巴组织出现明显的细胞凋亡,表明此种强度EMP亦同样能损伤淋巴细胞,导致机体免疫功能的降低.②EMP照射后,Bax和Bcl-2蛋白也出现规律性改变,表明二者在该强度EMP诱发的大鼠淋巴细胞凋亡调控中起着重要作用.上述实验为进一步探讨低水平的电磁辐射对人体的危害作用提供了一定参考.
关键词： 电磁脉冲 免疫组织 凋亡 Bax和Bcl-2蛋白 -
放射复合伤口愈合中外周血淋巴细胞凋亡及其与愈合延迟的关系
目的:研究放射复合伤口愈合中外周血淋巴细胞凋亡规律并探讨其与愈合延迟的关系.方法:用原位末端标记(TUNEL)方法检测细胞凋亡,碱磷酶免疫组织化学方法检测Bax、Bcl-2蛋白表达.结果:创伤复合照射组动物白细胞数出现下降,伤后3 d降至低,伤后5 d仍显著低于单伤组;伤后两组动物外周血淋巴细胞凋亡率均出现升高,然而在整个伤口愈合过程中,伤照组凋亡率始终高于单伤组;伤后不同时间淋巴细胞Bax蛋白出现升高,伤照组明显高于单伤组,而Bcl-2呈现相反的变化趋势.结论:照射后外周血白细胞数的降低和淋巴细胞凋亡的增加是辐射延迟伤口愈合的重要原因;Bax和Bcl-2蛋白参与了淋巴细胞凋亡的调控.
关键词： 放射 淋巴细胞凋亡 伤口愈合 Bax和Bcl-2蛋白 -
小鼠胸腺淋巴细胞辐射损伤与修复的分子机理研究
目的探讨细胞凋亡在小鼠胸腺淋巴细胞辐射损伤中的作用，为阐明淋巴细胞辐射损伤特点和机理以及急性放射病的防治提供重要依据。方法应用原位末端标记、DNA电泳和免疫组化技术观察经2、4、6和8 Gy不同剂量γ-线整体照射后，小鼠胸腺淋巴细胞凋亡的动态变化过程和Bax、Bcl-2蛋白在其中的作用。结果 (1)照射后早期淋巴细胞凋亡率迅速增加，如6 Gy照后4 h和1天凋亡率分别为对照值的3.6和9.3倍；凋亡率还还随照射剂量的增加而迅速升高。(2)胸腺和外周血淋巴细胞数在照射后急剧减少与淋巴细胞凋亡成相反趋势，提示凋亡可能是急性照射后淋巴细胞减少的主要途径之一。(3)透射电镜观察表明，6Gy γ-线照射后，小鼠胸腺淋巴细胞出现早、中、晚期典型凋亡细胞的形态学特征。(4)DNA凝胶电泳显示2～6Gy照后4和8 h，胸腺淋巴细胞出现特征的DNA梯形谱。(5)照射后Bax、Bcl-2蛋白的异常表达证实二者在淋巴细胞凋亡的调控中起重要作用。结论 细胞凋亡在不鼠胸腺淋巴细胞辐射损伤全过程中起重要作用，而Bax和Bcl-2蛋白参与了淋巴细胞凋亡的调控。
关键词： 淋巴细胞凋亡 辐射 Bax和Bcl-2蛋白 小鼠胸腺
