首页 > 文献资料
-
adipophilin及蛋白激酶C在动脉粥样硬化模型中的表达
目的 探讨动脉粥样硬化病变区动脉壁增厚与adipophilin表达及蛋白激酶C(PKC)活性三者之间的关系.方法 将24只新西兰白兔随机分为对照组(12只)和实验组(12只).高TC饮食喂饲12周,动脉切片HE染色;采用PepTag(R)Assay法检测PKC活性变化,Western blot印迹和免疫组织化学染色检测PKCa和adipophilin表达.并进一步在细胞学水平观察平滑肌细胞、巨噬细胞和内皮细胞PKC活性的分布及adipophilin的表达.结果 主动脉病变区可见内膜增生、中层增厚,脂质条纹突起,增生内膜内蓄积大量的泡沫细胞.病变区PKC活性和adipophilin表达上调,与adipophilin阳性颗粒仅局限于增生内膜不同,PKCa在内膜、近内膜的中层区均呈强阳性表达.细胞学实验显示adipophilin表达于巨噬细胞,而PKC活性则以平滑肌细胞强,内皮细胞弱.结论 动脉粥样硬化病变区内膜增生、中层增厚可能与PKC介导的细胞增殖凋亡紊乱及adipophilin介导的脂质蓄积有关.在巨噬细胞adipophilin的表达可能与细胞膜PKC活性的改变有着某种潜在联系.
关键词： 动脉硬化 蛋白激酶C 模型 动物 adipophilin -
Adipophilin在动脉粥样硬化脂质蓄积中的作用
Adipophilin是胞浆脂滴的一个不完全包被蛋白,可作为动脉粥样硬化脂质蓄积的标记物,能促进细胞中脂质的蓄积和脂滴的形成,抑制胆固醇的外流,从而在泡沫细胞形成过程中发挥重要的作用.下调adipophilin的表达有利于动脉粥样硬化的防治.
关键词： adipophilin 脂滴 脂质蓄积 修饰性LDL 动脉粥样硬化 -
Adipophilin和NCEH在动脉粥样硬化中作用的研究进展
Adipophilin作为一种脂肪分化相关蛋白分布在脂滴表面,是脂质蓄积的特异性标记物,其过度表达可能促进细胞内胆固醇酯的蓄积,与动脉粥样硬化、病理性肥胖、胰岛素抵抗等病理过程密切相关.中性胆固醇酯水解酶(NCEH)是一种微粒体酶,可以在中性pH值环境中发挥胆固醇酯水解作用,在胆固醇逆向转运中发挥限速作用,在人类动脉粥样斑块区大量表达.Adipophilin与NCEH是细胞内脂滴形成和水解过程中起相反作用的两个蛋白,参与维持脂滴形成与水解的动态平衡.当机体受病理因素影响时,Adipophilin与NCEH之间的动态平衡被打破,细胞内胆固醇酯大量蓄积,导致动脉粥样硬化的发生发展.然而,目前关于Adipophilin和NCEH两者在脂滴的合成与水解中的相关机制及其在动脉粥样硬化发生中的具体作用尚不清楚,本文拟对该问题进行综述.
关键词： adipophilin 中性胆固醇酯水解酶 脂滴 动脉粥样硬化 -
Adipophilin介导脂质蓄积及炎症反应的研究进展
脂质蓄积与炎症反应在动脉粥样硬化中发挥关键作用,两者相互促进,相互影响.而Adipophilin作为胞浆脂滴的一种不完全包被蛋白,不仅可以作为动脉粥样硬化脂质蓄积的一种标记物,而且能够促进脂质蓄积、抑制细胞内胆固醇外流,并介导TNF-α、MCP-1和IL-6等炎症介质分泌,其表达受核受体、脂肪酸、修饰脂蛋白、激素类物质等多种因素的调控.本文就Adipophilin在脂质蓄积与炎性反应中的作用及其调控做一简要综述,为通过调控Adipophilina防治动脉粥样硬化提供新的思路.
关键词： adipophilin 脂滴 脂质蓄积 炎症反应 动脉粥样硬化 -
PAT家族蛋白研究进展
PAT家族蛋白(PAT)是脂质代谢中的一类小蛋白分子,它们定位于细胞质脂滴的表面,介导着脂质代谢.PAT家族蛋白并不直接参与脂质的合成和分解,它们通过与其它分子的相互作用而介导脂质代谢.本文将阐述PAT家族蛋白的发现、命名和成员组成,并重点介绍成员围脂滴蛋白(perilipin)和脂肪分化相关蛋白(adipophilin,ADRP)的代谢调控和与其它分子的相互作用.
关键词： PAT家族蛋白 perilipin adipophilin -
Adipophilin真核表达载体的构建与表达分析
目的 构建能在真核细胞中表达的adipophilin表达质粒pcDNA3.1-HA-adi.方法 从培养的C57BL/6J小鼠血管平滑肌细胞提取总RNA,在PCR引物中加入HA序列,用RT-PCR及TOPO克隆技术得到HA-adi克隆栽体,测序后,把HA-adi定向插入pcDNATM3.1/myc-His(-)-C的多克隆住点.阳离子聚合物介导转染人THP-1巨噬细胞,用R.T-PCR及Western blot的方法检测目的 蛋白在细胞中的表达.结果 限制性内切酶酶切和DNA测序分析证实成功获得HA-adi基因片段,HA-adi准确克隆入pcDNATM3.1/myc-His(-)-C的多克隆位点.转染THP-1巨噬细胞后,检测到目的 蛋白的表达.结论 成功构建pcDNA3.1-HA-adi,并在THP-1巨噬细胞中得到表达.
关键词： adipophilin 基因重组 脂滴 动脉粥样硬化 -
Adipophilin通过PI3 K/Akt通路促进细胞内脂质蓄积
目的:探讨adipophilin促进细胞内脂质蓄积的可能机制,为动脉粥样硬化的防治提供参考.方法:分别通过qPCR、Western blot和油红O染色观察氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)处理RAW264.7细胞不同时间后,细胞内Akt、p-Akt和adipophilin的蛋白水平及脂质蓄积情况;并检测PI3K/Akt抑制剂LY294002处理后,上述指标的变化;HEK293细胞过表达adipophilin后,检测Akt的活性;并用免疫共沉淀实验检测adipophilin与Akt之间的相互作用.结果:oxLDL处理细胞后,随着时间的延长,脂滴增多,Akt被活化,adipophilin表达增加,而LY294002处理则可抑制上述变化;过表达adipophilin后,p-Akt水平增高,但adipophilin与Akt之间未见直接相互作用.结论:Adi-pophilin可通过PI3K/Akt途径促进细胞内脂质蓄积,但可能不是通过直接相互关系发挥作用的.
-
Adipophilin 通过 ERK1／2－AP－1途径诱导炎症因子的表达
目的：观察巨噬细胞中脂肪分化相关蛋白（ adipophilin）对炎症因子表达的影响，阐明adipophilin促进巨噬细胞炎症因子表达的机制。方法：将已构建成功的adipophilin稳定高、低表达逆转录病毒载体转染入PA317包装细胞，制备adipophilin高和低表达的RAW264．7细胞；收集已转染成功的各组细胞上清液，用ELISA方法检测IL－6、TNF－α、MCP－1等炎症因子在细胞培养液中的浓度。 Western blot检测各组细胞AP－1、p－AP－1、ERK1／2及p－ERK1／2的蛋白水平；用ERK1／2抑制剂PD98059或AP－1抑制剂curcumin孵育细胞，检测各组细胞中以上指标的变化情况。结果：高表达adipophilin的细胞上清液中炎症因子IL－6、MCP－1和TNF－α浓度明显增高，adipophil－in siRNA组细胞中的炎症因子降低；高表达adipophilin的细胞中p－ERK1／2和p－AP－1的蛋白水平增高，adipophilin siRNA组则减少；ERK1／2抑制剂PD98059使AP－1蛋白活性明显下调；给予AP－1抑制剂curcumin后，细胞培养液中的IL－6、MCP－1和TNF－α浓度明显下降。结论：Adipophilin在RAW264．7巨噬细胞中能够促进炎症因子的表达。
关键词： adipophilin 炎症因子 ERK1/2 AP-1 -
Adipophilin--脂肪细胞早期分化的标志
Adipophilin,又名脂肪分化相关蛋白(ADRP),是一种广泛存在的亲脂肪细胞的脂肪结合蛋白,主要表达于分化早期的脂肪细胞.Adipophilin是细胞内脂肪贮存滴囊泡的主要成分之一,也是脂肪细胞、单核巨噬细胞脂质沉积的标志.它参与胰岛素抵抗、胰岛β细胞功能异常、动脉硬化、糖尿病肾损害及肿瘤等病理过程.
关键词： adipophilin 脂肪细胞因子 胰岛素抵抗
