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心肌缺血过程中磷酸肌醇4-激酶变化的研究
目的观察大鼠心肌缺血后心肌细胞和红细胞膜上磷酸肌醇4-激酶活性的变化,探讨其在心肌缺血过程中的调控机理.方法建立大鼠体内心肌缺血模型,在蛋白水平上分别检测心肌细胞和红细胞膜上磷酸肌醇4-激酶活性在缺血后不同时间(缺血后1、8、25及48h)的变化,用免疫组织化学方法检测磷酸肌醇4-激酶蛋白表达水平的变化.结果 (1)心肌细胞膜上磷酸肌醇4-激酶活性在心肌缺血后1 h达到高,为对照组的6.1倍,随着时间的延长,其活性逐渐下降,48h接近于正常水平;免疫组织化学结果显示:与正常组相比,缺血组磷酸肌醇4-激酶蛋白表达水平明显升高.(2)红细胞膜上磷酸肌醇4-激酶活性在缺血后1 h和25 h达到高,随后酶活性开始下降,缺血后48 h酶活性水平低于正常水平.结论心肌缺血早期(1 h)心肌细胞和红细胞膜上磷酸肌醇4-激酶活性显著提高,提示磷酸肌醇4-激酶参与了心肌缺血后的调节过程,其活性升高可能与心肌受损伤程度相关.
关键词： 1-磷脂酰肌醇4-激酶 心肌缺血 红细胞膜 -
人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因/磷脂酰肌醇激酶/血管内皮生长因子信号通路在兔川崎病模型中的表达变化
目的 探讨人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)/磷脂酰肌醇激酶(PI3K)/血管内皮生长因子(VEGF)信号通路在兔川崎病模型中的表达变化.方法 通过日本大耳幼兔耳缘静脉注射10％牛血清白蛋白(2.5 ml/kg,共2次,间隔2周),建立川崎病模型.将24只日本大耳幼兔分为4组:对照组(不注射10％牛血清白蛋白,共6只);建模后1d组(建立川崎病模型后第1天处死,共6只);建模后7d组(建立川崎病模型后第7天处死,共6只);建模后30 d组(建立川崎病模型后第30天处死,共6只).取各组的冠状动脉组织进行病理学检查,采用免疫组织化学法检测冠状动脉PTEN和PI3K的表达水平,应用酶联免疫吸附法检测血清VEGF和肌酸激酶水平,并检测血中白细胞的数量.结果 (1)各组间比较显示,建模后冠状动脉管壁逐渐变薄、变形,同时管腔增大.(2)建模后1d组、建模后7d组和建模后30 d组的冠状动脉PTEN表达水平分别为58.5±12.9、73.2±9.9和109.6±24.4,均高于对照组的25.5 ±6.8(P＜0.01或0.05).(3)建模后1d组和建模后7d组的冠状动脉PI3K表达水平分别为57.2±11.1和39.9±4.8,均高于对照组的19.1±3.5(P＜0.01或0.05);建模后30 d组的PDK表达水平为18.8±7.5,与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05),但与建模后1d组和建模后7d组比较差异均有统计学意义(P均＜0.05).(4)建模后1d组、建模后7d组和建模后30 d组的血清VEGF水平分别为(89.1±15.5)、(76.9±9.9)和(19.8±4.4)ng/L,与对照组的(33.9±6.7) ng/L比较,差异均有统计学意义(P＜0.01或0.05);建模后1d组与建模后7d组之间的VEGF水平差异有统计学意义(P＜0.05);建模后7d组与建模后30 d组之间的VEGF水平差异也有统计学意义(P＜0.01).(5)建模后30 d组的血清肌酸激酶水平高于对照组(P＜0.05),对照组、建模后1d组和建模后7d组之间的血清肌酸激酶水平差异均无统计学意义(P均＞0.05).(6)建模后1d组、建模后7d组和建模后30 d组的全血白细胞数量均高于对照组(P均＜0.01).结论 PTEN/PI3K/VEGF信号通路的表达水平在建立兔川崎病模型后发生变化,可能参与了川崎病的发生.
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慢性乙型肝炎患者血清磷脂酰肌醇-4-磷酸酶的表达与HBV DNA载量的相关性
目的 探讨慢性乙型肝炎患者血清磷脂酰肌醇-4-磷酸酶(P14KA)表达与HBV载量的关系.方法 收集2012年6月-2013年4月在青岛市立医院就诊的180例慢性乙型肝炎患者的血清,利用荧光定量PCR检测其HBV DNA的载量,根据其HBVDNA载量的高低,分为3组,每组60例:高病毒载量组(HBVDNA＞1x107拷贝/ml)、中病毒载量组(1×105拷贝/ml≤HBV DNA≤1×107拷贝/ml)及低病毒载量组(HBV DNA ＜1×105拷贝/ml),同时以60名健康人作对照.采用ELISA法,检测各组外周血清中的PI4KA的浓度.多组间血清HBV DNA定量的比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验.PI4KA水平与HBV DNA载量之间的相关性分析采用Spearman检验.结果 健康人血清PBKA的浓度为(2.29±0.75) ng/ml;低、中、高病毒载量组血清PI4KA的浓度分别为(2.73 ±0.71)、(3.52±0.78)及(4.72±0.77) ng/ml.慢性乙型肝炎患者不同病毒载量组与健康对照组间血清PI4KA的浓度差异有统计学意义(F=119.958,P＜0.01),并且不同病毒载量组都显著高于对照组.随着HBV DNA载量的升高,PI4KA的浓度增加,两者呈正相关(r=0.758,P＜0.01).结论 慢性乙型肝炎患者血清PI4KA的浓度与HBV DNA载量密切相关,这一结果提示PI4KA可能在HBV DNA的复制中起到重要作用.
