首页 > 文献资料
-
血清Fractalkine因子水平与肥胖和2型糖尿病的相关性研究
目的 探讨血清Fractalkine (FKN)因子水平与肥胖和T2DM的相关性. 方法 根据BMI将88名健康体检者即糖耐量正常者(NGT)分为体重正常组(A组,n=44,BMI＜24 kg/m2)和超重肥胖组(B组,n=44,BMI≥24 kg/m2);将88例新诊断T2DM患者(T2DM组)分为体重正常组(C组,n=44,BMI＜24 kg/m2)和超重肥胖组(D组,n=44,BMI≥24 kg/m2).ELISA测定FKN和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平. 结果 T2DM患者FKN(0.625±0.090) ng/ml高于NGT者(0.395±0.110) ng/ml(P＜0.01),C组FKN(0.55±0.08) ng/ml高于A组(0.34±0.14) ng/ml和B组(0.45±0.08) ng/ml(P＜0.01).T2DM患者FKN与FPG、HbA1c、WHR、BMI、C-RP、HOMA-IR、TNF-α呈正相关(r=0.578、0.592、0.616、0.596、0.909、0.872和0.827,P＜0.01),与HDL-C呈负相关(r=-0.216,P＜0.05).多元回归分析显示,C-RP、BMI及TNF-α是FKN的独立相关因素(β=0.441、0.158和0.221,P＜0.05). 结论 T2DM患者FKN与炎症反应密切相关,可能参与了肥胖及T2DM的发生发展.
关键词： 趋化因子Fractalkine 糖尿病 2型 肥胖 -
淫羊藿苷干预自然衰老模型大鼠大脑皮质趋化因子Fractalkine及其受体CX3CR1的表达
背景:趋化因子Fractalkine(FKN)不仅涉及到趋化、黏附和炎症反应,在脑组织中也参与神经细胞的增殖和凋亡.目的:观察淫羊藿苷对自然衰老大鼠大脑皮质趋化因子Fractalkine及其受体CX3CR1的影响.方法:选用3月龄雄性SD大鼠80只,随机分为4组:青年组、自然衰老组、淫羊藿苷低剂量组、淫羊藿苷高剂量组.淫羊藿苷组从16月龄开始分别灌胃淫羊藿苷30,60 mg/kg,连续60 d,青年组和自然衰老组灌胃等量生理盐水60 d至取材前.采用苏木精-伊红染色法观察大鼠脑组织形态学变化;β-半乳糖苷酶染色测定脑组织衰老情况;免疫组织化学检测皮质趋化因子Fractalkine和CX3CR1的表达;酶联免疫吸附法检测脑组织中白细胞介素6和肿瘤坏死因子α水平;免疫印迹检测脑组织Caspase-3蛋白表达,比色法检测Caspase-3活性.结果与结论:①自然衰老组趋化因子Fractalkine表达明显低于青年组,CX3CR1表达、Caspase-3表达及活性、SA-β-gal阳性颗粒数、炎性指标白细胞介素6、肿瘤坏死因子α明显高于青年组;而淫羊藿苷用药后能逆转上述现象,且淫羊藿苷高剂量组好于淫羊藿苷低剂量组;②结果提示淫羊藿苷能够低脑组织中的炎性因子水平,抑制神经细胞凋亡,可能与影响趋化因子Fractalkine及CX3CR1表达有关.
-
Mito-KATP对缺氧复氧大鼠心肌微血管内皮细胞凋亡的影响及作用机制
目的 探讨线粒体ATP敏感性钾通道(mito-KATP)开放影响缺氧复氧大鼠心肌微血管内皮细胞(MMECs)凋亡的作用机制.方法 培养大鼠心肌微血管内皮细胞,随机分为四组:对照组(N组)、模型组(H/R组)、开放剂组(DZ组)、阻断剂组(5-HD组).DZ组加入100 μmol/L二氮嗪预处理2h,5-HD组在加入100μmol/L二氮嗪前,先用100 μmol/L 5-羟葵酸预处理2h,然后上述两组和H/R组同样进行缺氧2h复氧2h.Hoechst染色方法观察凋亡细胞形态,Annexin V-FITC/PI双标记法测定各组细胞凋亡率、RT-PCR法检测各组NF-κB、FKN和p53 mRNA转录水平.结果 与N组比较,H/R组可见大量细胞坏死、脱落,细胞凋亡率升高(P＜0.01),NF-κB、FKN和p53 mRNA表达上调(P＜0.01)；与H/R组比较,DZ组可见部分细胞坏死脱落,细胞凋亡率降低(P＜0.01),NF-κB、FKN和p53 mRNA表达下调(P＜0.01)；5-HD组与H/R组比较无显著差异.结论 mito-KATP开放可抑制缺氧复氧所致MMECs凋亡,其机制可能与抑制NF-κB、FKN及p53 mRNA表达有关.
-
转染CX3CR1基因对小鼠骨髓间充质干细胞向Fractalkine趋化能力的影响
目的:研究在Transwell共培养体系中,转染CX3CR1基因对小鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)向趋化因子Fractalkine(FKN)趋化能力的影响.方法:采用差速贴壁法分离纯化小鼠MSCs,体外培养、传代扩增,流式细胞术检测细胞表面抗原标志和细胞周期;将携带有趋化因子受体CX3CR1基因及绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因的慢病毒(LV-CX3CRl-EGFP)及空载体病毒(LV-CON-EGFP)转染小鼠MSCs细胞,RT-PCR法分别检测空白对照组、实验组、阴性对照组细胞中CX3CRl mRNA表达情况,Western blot印记法检测CX3CR1蛋白的表达水平,并通过Transwell共培养体系观察不同转染组细胞向趋化因子FKN的迁移情况.结果:成功获得了细胞形态均一,生长状态良好的MSCs;细胞CD29、CD44、CD34有阳性表达;阴性对照组和空白对照组小鼠MSCs不表达CX3CR1基因;构建的慢病毒过表达载体pUbi-MSC-CX3CR1-EGFP能成功转染至小鼠MSCs中,并使转染后的MSCs表达CX3CR1 mRNA及蛋白.在Transwell共培养体系中,转染CX3CR1基因的小鼠MSCs向趋化因子FKN趋化能力明显强于各对照组(P=0.000),其中阴性对照组浸润至下室的细胞数为:(13.80±2.17)个每高倍镜视野(n=5).实验组浸润至下室的细胞数为:(35.80±3.34)个每高倍镜视野(n=5).FKN抗体阻断组浸润至下室的细胞数为(14.80±1.92)个每高倍镜视野(n=5).结论:转染CX3CR1基因能有效增加小鼠MSCs向趋化因子FKN趋化的能力.
-
趋化因子Fractalkine通过调控IL-6/STAT3信号通路对人胰腺癌细胞株增殖和侵袭的影响研究
目的 探讨趋化因子Fractalkine(FKN)通过调控白细胞介素(IL)-6/信号传导与转录激活因子(STAT)3信号通路对人胰腺癌细胞株PANC-1和SW-1990增殖、侵袭的影响.方法 以腺病毒为载体构建、合成FKN-小干扰RNA(siRNA)并转染PANC-1和SW-1990.应用CCK-8法和Transwell检测细胞增殖和侵袭力,蛋白质印迹法(Western blot)和实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)法检测FKN、IL-6和STAT3蛋白及mRNA的表达.结果 转染FKN-siRNA 24 h时,PANC-1及SW-1990各组细胞吸光度值(A值)无明显变化,在48 h和72 h时,FKN-siRNA组A值明显高于对照组和FKN-siRNA阴性组(P＜0.05).转染FKN-siRNA后,PANC-1及SW-1990 FKN-siRNA组细胞侵袭力明显强于对照组和FKN-siRNA阴性组(P＜0.05).PANC-1及SW-1990转染FKN-siRNA后,与对照组和FKN-siRNA阴性组相比较,FKN-siRNA组细胞FKN蛋白和mRNA的表达明显减少(P＜0.05),IL-6与STAT3蛋白和mRNA的表达明显增加(P＜0.05).结论 趋化因子FKN可能通过IL-6/STAT3信号通路对胰腺癌细胞生物学活性发挥了抑制作用.
关键词： 趋化因子Fractalkine 转染 胰腺癌细胞株 白细胞介素6 STAT3
