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实验性松质骨缺损修复过程中血管内皮生长因子与转化生长因子β1的表达
目的 观察实验性松质骨缺损修复过程中血管内皮生长因子(VEGF)和转化生长因子β1(TGF-β1)的表达情况,探讨实验性松质骨缺损愈合的分子生物学机制.方法 选用中国家兔60只,在其双侧股骨髁造成一直径6.0mm、深12.0 mm之孔洞状骨缺损.将左侧作为实验侧,右侧作为对照侧.4周后,对实验侧采用自制微型剥离器插入骨缺损处做反复切割,以造成二次创伤模型.于经皮骨折端二次创伤术后1 d(总4周+1 d)、1周、2周、4周、8周各处死6只实验兔,行X线片检查后,于双侧骨缺损区取材.使用免疫组化染色技术对标本进行检测和观察.结果 实验侧松质骨缺损多在12周时得以修复.而未经二次创伤处理的对照侧松质骨缺损则不能自行修复;VEGF和TGF-βl的局部表达贯穿于松质骨修复的全过程,但经二次创伤处理,实验侧的表达强度明显高于对照侧,且VEGF和TGF-B1的表达呈正相关关系.结论 二次创伤可以促进松质骨缺损的修复和内源性VEGF和TGF-β1在骨缺损局部的表达,而VEGF和TGF-β1表达增强可能是其促进松质骨缺损修复的重要因素.
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二次创伤对实验性松质骨缺损修复的影响
目的 观察二次创伤对实验性松质骨缺损修复的影响.方法 选用中国家兔60只,在其双侧股骨髁各造成一个直径6.0 mm、深12.0 mm的孔洞状骨缺损,左侧为实验组,右侧为对照组.4周后,对实验侧采用自制微型剥离器插入骨缺损处做反复地切割,以造成二次创伤模型.分别于骨缺损模型制成后1 d、1周、2周、3周、4周各处死6只家兔;于经皮骨折端二次创伤术后1 d(骨钻孔术后4周+1 d)、1周、2周、4周、8周各处死6只家兔,行X线拍片检查后,于双侧骨缺损区取材.使用HE染色技术对标本进行检测和观察.结果 大体观察,实验组二次创伤后8周(骨钻孔术后12周)可见新骨充填骨缺损区;对照组骨钻孔术后12周孔洞内组织质软,色黄,缺损依然为纤维结缔组织填充.X线观察,实验组从二次创伤后4周开始有修复倾向,缺损范围渐小,二次创伤后8周时几乎看不到明显缺损;对照组骨缺损一直未修复,骨钻孔术后12周可见典型硬化环.HE染色观察,实验组二次创伤后缺损内可见成纤维细胞、成骨细胞和骨细胞等逐渐增多,二次创伤后8周时新骨逐渐填充缺损,但骨小梁较正常松质骨稀疏,仍可见少量纤维结缔组织.对照组骨钻孔术后12周时,缺损内可见少量成骨细胞,但缺损绝大部分由成熟的纤维结缔组织充填,同时可见大量脂肪组织.结论 二次创伤可以促进松质骨缺损的修复,推测二次创伤能促进骨缺损区域血液循环改善,进而达到促进骨缺损愈合的目的.
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BMSCs胶原刮膜对松质骨缺损的修复
目的研究成骨蛋白-2(hBMP-2)基因转染骨髓间充质干细胞(BMSCs)胶原刮膜对兔股骨髁松质骨缺损的修复能力.方法应用影像学、组织学、形态计量学和生物力学等方法,观察未经诱导、OS液诱导和hBMP-2基因转染BMSCs胶原刮膜植入兔股骨髁部直径6 mm、深12 mm松质骨缺损后的修复情况.结果未经处理的兔股骨髁缺损不能自行愈合; 细胞刮膜植入对股骨髁松质骨缺损的修复能力,在8和12周时hBMP基因转染BMSCs组＞OS液诱导BMSCs组＞未诱导BMSCs组(P<0.05),12周时hBMP基因转染BMSCs组的骨缺损区生物力学强度接近正常松质骨.结论hBMP基因转染BMSCs胶原刮膜是治疗大块松质骨缺损的理想修复材料.
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复合骨髓间充质干细胞生物陶瓷修复兔松质骨缺损
目的评估复合骨髓间充质干细胞(MSCs)的生物陶瓷在修复兔松质骨缺损中的作用.方法分别对单纯煅烧骨、复合MSCs煅烧骨、三磷酸钙(β-TCP)及复合MSCs β-TCP行:①体外研究:电镜观察复合后MSCs的生物学行为;②裸鼠异位成骨研究;③兔股骨髁松质骨缺损( 6 mm、深12 mm)修复:18只兔32侧骨缺损分为5组(其中一组未加任何处理),于2、4、8周末分别行组织学检查.结果①MSCs在煅烧骨及β-TCP上的黏附及生长情况良好,4 d基本长满表面,6 d起开始重叠生长;②在裸鼠体内,单纯β-TCP或煅烧骨无成骨,而复合MSCs组自2周开始成骨,并随时间延长而增加,但β-TCP组成骨与材料降解相平衡,而煅烧骨组仅在孔壁周围形成板层骨;③兔股骨髁缺损:未经处理不能自行愈合,2周内各组均无骨长入,4周开始由周边长入,8周时各组的骨长入率分别为40%、56%、45%、60%,无论在煅烧骨抑或β-TCP组中复合MSCs组的成骨量均高于对照组(P＜0.05).结论复合MSCs的生物陶瓷是修复负重区松质骨缺损的一种有效方法.
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同种异体间充质干细胞复合纤维蛋白修复骨缺损
[目的]探讨骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的体外培养,以及同种异体MSCs复合纤维蛋白修复兔股骨髁松质骨缺损的效果.[方法]在日本大耳兔双侧股骨髁制作0.6 cm ×1.0 cm松质骨缺损,左侧植入同种异体MSCs纤维蛋白复合物,右侧单纯植入纤维蛋白.分别于术后2、5、8周行放射学、组织学检查,以了解骨缺损修复情况.[结果]单纯植入纤维蛋白的一侧不能自行愈合.植入复合物的一侧术后2周可见少量骨组织生成,5周可见大量模糊骨痂,术后8周骨缺损基本愈合.除少量炎性细胞浸润外,各期均未见明显免疫排斥反应.[结论]同种异体MSCs复合纤维蛋白可有效修复兔股骨髁松质骨缺损,8周内机体的免疫排斥反应较弱.
