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A549细胞光镜及电镜制样收缩系数测试
目的 测试A549细胞经过光镜及电镜制样处理后的收缩系数,为定量研究A549细胞及其超微结构奠定基础.方法 对A549细胞分别进行涂片HE染色、涂片巴氏染色、石蜡包埋3μm切片HE染色及透射电镜制样半薄(3μm)切片HE染色处理.通过光学显微镜获取细胞图像,用Image-Pro Plus图像分析软件测试细胞的平均直径,然后以A549培养之等渗重悬细胞之平均直径为基准计算细胞的收缩系数.结果 A549培养之等渗重悬细胞的平均直径为14.93μm.经涂片HE染色、涂片巴氏染色、石蜡切片HE染色和透射电镜制样半薄(3μm)切片HE染色处理后的A549细胞的平均直径分别9.88 μm、9.98μm、10.29μm和10.59μm.以等渗重悬细胞之平均直径为基准,经涂片HE染色、涂片巴氏染色、石蜡切片HE染色和透射电镜半薄切片HE染色之细胞的收缩系数分别为0.66、0.67、0.69和0.71.结论 经涂片HE染色、涂片巴氏染色、石蜡切片HE染色和透射电镜制样半薄切片HE染色处理后,A549细胞收缩明显,直径约收缩了1/3.因此,在实际测试中,欲知细胞收缩前之结构大小,须据细胞收缩程度进行必要的校正.
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石蜡包埋对心、肺和脾组织的收缩影响
在石蜡包埋过程中,酒精、二甲苯和石蜡等都对组织产生明显的收缩影响,严重地影响了显微镜下对细胞和组织的观察及测量结果.1998年我们曾对石蜡切片和恒冷切片进行比较,认为石蜡切片距新鲜组织结构的距离相差甚远[1].后来我们又系统地研究了石蜡包埋过程对肝、肾组织的收缩影响,并对其收缩系数进行了推算[2],为显微镜下研究细胞和组织的大小提供了数据.但不同的组织由于其细胞密度和细胞间质的多少不同,表现的收缩影响程度各不相同,因此,有必要对全身其它组织作进一步的调查,为显微镜下准确地判断和测量各种组织的大小提供参考依据.
