首页 > 文献资料
-
双酚A(BPA)对人原代绒毛外滋养细胞(EVT)迁移和侵袭能力的影响
目的:研究双酚A(bisphenol A,BPA)对绒毛外滋养细胞(extravillous trophoblasts,EVT)迁移和侵袭能力的影响.方法:本研究共收集98例胎盘绒毛标本,采用随机分组的方式将EVT细胞分为对照组和不同浓度的BPA处理组(每组≥3例).用免疫荧光法(immunofluorescence,IFC)对分离的对照组EVT细胞进行鉴定;BPA暴露48 h后,用流式细胞术(FCM)检测BPA暴露对EVT细胞活力、凋亡和增殖的影响;用Transwell法检测EVT细胞的迁移和侵袭能力.结果:①IFC显示EVT细胞中人类白细胞抗原G (human leukocyte antigen G,HLA-G)阳性细胞的比例即EVT细胞的纯度＞92.7％;②流式细胞术和免疫印迹法显示非毒性剂量的BPA不影响EVT细胞的凋亡(F=1.808,P=0.233)、活力(F=0.624,P=0.609)和增殖能力(F=0.174,P=0.913;F=0.260,P=0.852);③Transwell显示EVT的迁移和侵袭能力随BPA浓度的增高而呈剂量依赖性增强(F=24.080,P=0.000;F=144.900,P=0.000).结论:BPA以剂量依赖的方式增强EVT细胞的迁移和侵袭能力.
关键词： 双酚A(BPA) 绒毛外滋养细胞(EVT) 迁移和侵袭 -
红花黄色素对乳腺癌细胞增殖和迁移的抑制作用及其分子机制
目的 研究红花黄色素(CY)对乳腺癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响以及相关的分子机制.方法 采用CCK-8法检测不同浓度和时间红花黄色素对人乳腺癌细胞MDA-MB-231的抑制作用;采用流式细胞术检测不同浓度红花黄色素对人乳腺癌细胞MDA-MB-231的促凋亡作用;采用Transwell法检测不同浓度红花黄色素对人乳腺癌细胞MDA-MB-231迁移和侵袭的影响;在不同浓度的红花黄色素的干预后,通过western blot技术检测凋亡相关蛋白Cleaved-Caspase-3和生存相关蛋白p-Akt以及转移相关蛋白MMP2的表达.结果 (1)红花黄色素对乳腺癌细胞的抑制作用具有浓度依赖性和时间依赖性;(2)不同浓度的红花黄色素干预能显著促进乳腺癌细胞的凋亡(<0.01);(3)不同浓度的红花黄色素干预能显著抑制p-Akt的表达并同时促进Cleaved-Caspase-3的表达;(4)不同浓度的红花黄色素能够显著抑制乳腺癌细胞的迁移和侵袭能力(<0.01),并且能够抑制迁移相关蛋白MMP2的表达.结论 红花黄色素能在体外通过激活凋亡通路而促进凋亡,并能通过抑制MMP2来抑制乳腺癌细胞的转移.红花黄色素是一种潜在的治疗乳腺癌的药物.
-
柴胡皂苷D通过逆转EMT抑制人成骨肉瘤细胞MG-63的迁移和侵袭
目的:研究柴胡皂苷D对人成骨肉瘤细胞MG-63的迁移和侵袭能力的影响并初步探讨其潜在分子机制.方法:运用MTT试验检测柴胡皂苷D对细胞增殖的影响,划痕试验和Transwell迁移试验检测柴胡皂苷D细胞迁移能力的影响,Transwell侵袭试验研究柴胡皂苷D对细胞侵袭能力的影响,Western-blot检测柴胡皂苷D对EMT相关蛋白的影响.结果:对MG-63增殖无明显影响浓度的柴胡皂苷D显著抑制细胞的迁移和侵袭能力(P<0.001),柴胡皂苷D上调E-cadherin的表达而下调N-cadherin和Vimentin的表达.结论:柴胡皂苷D通过逆转EMT改变抑制人成骨肉瘤细胞MG-63的迁移和侵袭.
-
低剂量内皮－单核细胞激活多肽Ⅱ对人 U87MG 胶质瘤干细胞迁移和侵袭能力的影响
目的：研究低剂量内皮－单核细胞激活多肽Ⅱ（EMAP Ⅱ）对脑胶质瘤干细胞（GSCs）迁移和侵袭能力的影响及相关分子机制。方法：应用免疫荧光方法对分离提取的细胞球进行干细胞表面标志性分子 CD133和 nestin 的检测。EMAP Ⅱ（0．05nmol／L）处理 GSCs 后，采用 Transwell 小室实验及 Matrigel Transwell 小室实验检测 GSCs 迁移和侵袭能力的变化；应用 Western blot 方法检测 PI3K 和 p －PI3K 的表达变化；应用胰岛素样生长因子（IGF －1）检测 EMAP Ⅱ作用下 GSCs 迁移和侵袭能力的改变。结果：分离提取的细胞球表面CD133和 nestin 呈阳性表达；EMAP Ⅱ作用0．5h 和1h 时产生了对 GSCs 迁移和侵袭能力的抑制作用；与EMAP Ⅱ作用0h 组相比，PI3K 的表达无变化，p －PI3K 的表达在 EMAP Ⅱ作用0．5h 和1h 时显著下降；此外， IGF －1明显阻断了 EMAP Ⅱ对 GSCs 迁移和侵袭能力的抑制作用。结论：EMAP Ⅱ能明显抑制 GSCs 的迁移和侵袭能力，其机制可能与 p －PI3K 的表达下调有关。
关键词： 内皮 -单核细胞激活多肽Ⅱ 胶质瘤干细胞 迁移和侵袭 -
Notch1对人胰腺癌细胞迁移及侵袭能力影响的体外实验研究
目的 探讨人胰腺癌细胞转染Notch1后细胞迁移及侵袭能力变化与骨架蛋白的相关性.方法 将携带Notch1的慢病毒载体转染人胰腺癌SW-1900细胞株,经流式细胞筛选后培养、传代.将细胞分为空白组(未经处理)、空载组(空载体转染)和病毒组(慢病毒转染),3组细胞分别利用细胞划痕和Transwell小室检测细胞迁移、细胞侵袭能力;采用Western Blot检测不同组细胞株中Notch1、Fascin、F-actin蛋白表达水平变化.结果 成功建立稳定转染Notch1的胰腺癌SW-1900细胞株.空白组、空载组、病毒组划痕试验及Transwell小室显示:24 h后病毒组和空白组划痕间距无差异,2组细胞粘附到基质胶基底膜的数目均很少,大体相同;而48,72 h后病毒组较空白组划痕间距变窄,细胞侵袭透膜数较多,差异有统计学意义,上调Notch1后能明显促进SW-1900细胞的迁移和侵袭能力(P＜0.05).随着时间延长,细胞穿膜率增高和划痕间距明显减小;Western Blot检测结果显示,空白组和空载组中Notch1、骨架蛋白Fascin、F-actin的蛋白表达相近,差异无统计学意义(P＞0.05),但病毒组与其他2组相比,Notch1、Fascin、F-actin的蛋白表达明显增高,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 人胰腺癌细胞中Notch1蛋白高表达可以增强细胞迁移、侵袭能力和细胞中Fascin和F-actin蛋白含量.胰腺癌细胞侵袭和转移能力的增强其机制之一可能是通过加强细胞中微丝微管运动性来实现的.
