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富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白1、E-Cadherin和EGFR在胃癌中的表达和临床意义
目的 探讨富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白1(LRIG1)、上皮钙黏蛋白(E-Cadherin)和表皮生长因子受体(EGFR)在胃癌中的表达和及其与临床病理特征的相关性.方法 选取50例胃癌患者作为研究对象,并选取正常胃黏膜组织50例作为对照.用免疫组化方法检测两组患者卵巢组织中的LRIG1、E-Cadherin和EGFR的表达,分析LRIG1、E-Cadherin和EGFR的阳性表达率在胃癌患者不同临床病理特征中的差异.采用spearson秩相关分析LRIG1,E-Cadherin和EGFR的阳性表达率的相关性.结果 胃癌组的LRIG1、E-Cadherin的阳性表达率显著低于正常胃黏膜组,胃癌组的EGFR的阳性表达率显著高于正常胃黏膜组.胃癌中LRIG1、E-Cadherin和EGFR阳性表达率与临床分期、病理分级和淋巴结转移有关(P<0.05),而与年龄、组织学类型无关(P>0.05).LRIG1、E-Cadherin和EGFR在胃癌患者中的阳性表达率具有相关性,共同调控参与胃癌的发生和发展.结论 LRIG1、E-Cadherin在胃癌中低表达和EGFR在胃癌中高表达,与胃癌的进展和转移相关.
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富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白1基因特异性RNA干扰表达载体的构建、鉴定和稳定株筛选
背景:有研究表明富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白1(leucine-rich repeats and immunoglobulin-like domains 1,LRIG1)基因在神经胶质瘤细胞中呈低表达,LRIG1基因过表达后对神经胶质瘤细胞的 LRIG1 mRNA和蛋白表达均明显增强和抑制其生物学行为,但却很少有研究从阻断LRIG1基因的表达的角度进行论证.目的:构建针对LRIG1基因的特异性RNA干扰质粒,稳定转染人脑胶质瘤GL15细胞系,观察其对目的基因LRIG1表达的影响.方法:根据GenBank提供的LRIG1基因序列设计2条RNA干扰序列,命名为LRIG1-shRNA1和LRIG1-shRNA2,并设计1条非特异性序列作为阴性对照,命名为pGenesil2-negative shRNA.合成各自的寡核苷酸链,退火后与pGenesil2质粒载体连接,转化扩增后测定序列.用不同浓度的G418作用于GL15细胞确定G418对GL15细胞的筛选浓度.将3种重组表达载体转染GL15细胞,G418筛选后挑单克隆并扩增获得稳定株.Western blot检测LRIG1蛋白的表达.结果与结论:构建的重组pGenesil2-LRIG1- shRNA质粒经限制性酶切及DNA测序分析证明其序列插入正确.转染pGenesil2- LRIG1-shRNA1(LRIG11)细胞和pGenesil2- LRIG1-shRNA2(LRIG12)细胞LRIG1蛋白表达水平较阴性对照组pGenesil2-negative shRNA分别下降47.9%(P < 0.01)和32.8% (P > 0.05).结果证实,实验成功构建了针对LRIG1基因的特异性shRNA表达载体pGenesil2-LRIG1-shRNA1,其转染GL15细胞后可抑制LRIG1的表达.
关键词： 富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白1 RNA干扰 胶质母细胞瘤 转染 组织工程 -
富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白1在垂体瘤中的表达及其预后意义
目的 探讨富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白1(LRIGl)在垂体瘤中的表达及意义.方法 应用免疫组织化学链菌素抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)法检测74例垂体瘤、20例正常脑组织中LRIG1的表达,分析其表达与患者预后的关系.结果 LRIG1在正常脑组织中的阳性表达率为100.0％,明显高于垂体瘤中的表达(54.1％),差异有统计学意义(P＜0.05).同时,LRIG1在非侵袭性垂体瘤中的阳性表达率为66.7％,明显高于在侵袭性垂体瘤中的表达(20.0％).Kaplan-Meier生存分析表明LRIG1及垂体瘤类型与患者的预后明显相关(P＜0.05).Cox多因素生存分析表明LRIGI可作为患者预后评估的独立因素.结论 LRIG1参与了垂体瘤的发生及发展,低表达患者预后较差.
关键词： 富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白1 垂体瘤 预后 -
LRIG1过表达对顺铂诱导的胶质瘤细胞凋亡的影响及其机制
目的 研究过表达富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白1(leucine-rich repeats and immunoglobulin-like domains-1,LRIG1)对顺铂(cisplatin,CDDP)诱导的胶质瘤细胞U251凋亡的影响及其机制.方法 应用脂质体介导的基因转染技术将对照质粒(EGFP-N1)及LRIG1质粒(EGFP-N1-LRIG1)分别转染胶质瘤细胞系U251,设为对照组和LRIG1过表达组,用Real-time PCR检测转染后LRIG1表达水平;用Annexin Ⅴ/7AAD双标流式细胞术检测细胞凋亡;用Western blot检测各目的 蛋白表达水平.结果 LRIG1过表达组LRIG1 mRNA及蛋白均较对照组明显增高;0、10、20 μg/mL CDDP作用下,LRIG1过表达组细胞凋亡率均明显高于对照组(P<0.01);随着CDDP浓度增加,胶质瘤细胞U251磷酸化表皮生长因子受体(P-EGFR)表达增加;不同浓度CDDP作用下,LRIG1过表达组P-EGFR水平均较对照组明显降低,促凋亡蛋白Bax,Caspase-3表达增加,抗凋亡蛋白Bcl-2表达降低.结论 LRIG1通过下调P-EGFR水平而促进顺铂诱导的胶质瘤细胞凋亡,增强胶质瘤细胞对顺铂的敏感性.
关键词： 富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白1 顺铂 胶质瘤 细胞凋亡 -
垂体瘤病灶内LRlG1、Gadd45g表达量与肿瘤细胞自噬、凋亡、侵袭的相关性研究
目的:研究垂体瘤病灶内LRIG1 、Gadd45g表达量与肿瘤细胞自噬、凋亡、侵袭的相关性.方法:选择2014年6月～2017年12月期间在我院接受手术切除的垂体瘤患者并留取侵袭性垂体瘤组织、非侵袭性垂体瘤组织,另取同期因颅脑外伤在我院接受手术治疗的患者作为对照并留取正常脑组织;测定组织样本中LRIG1 、Gadd45g及自噬、凋亡、侵袭基因的mRNA表达量.结果:侵袭性垂体瘤病灶和非侵袭性垂体瘤病灶组织中LRIG1 、Gadd45g 、Beclin1 、LC3-II 、Bax 、NKG2D 、E-cadherin的 mRNA 表达量均显著低于正常脑组织,PTTG1 、c-Myc 、Gal-3 、Bcl-2 、EphA2 、HSP27 、MMP14 、VEGF的mRNA 表达量均显著高于正常脑组织且侵袭性垂体瘤病灶组织中 LRIG1 、Gadd45g 、Beclin1 、LC3-II 、Bax 、NKG2D E-cadherin的mRNA表达量均显著低于非侵袭性垂体瘤病灶组织,PTTG1 、c-Myc 、Gal-3 、Bcl-2 、EphA2 、HSP27 、MMP14 、VEGF的 mRNA 表达量均显著高于非侵袭性垂体瘤病灶组织;LRIG1 、Gadd45g的mRNA表达量与Beclin1 、LC3-II 、Bax 、NKG2D 、E-cadherin的mRNA表达量呈正相关,与PTTG1 、c-Myc 、Gal-3 、Bcl-2 、EphA2 、HSP27 、MMP14 、VEGF的 mRNA 表达量呈负相关.结论:垂体瘤病灶内LRIG1 、Gadd45g的低表达能够抑制肿瘤细胞的自噬及凋亡、促进肿瘤细胞的侵袭.
