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Twist1通过NF-κB信号通路对人乳头状甲状腺癌上皮-间质转化的调控机制研究
目的探究Twist1对人乳头状甲状腺癌的侵袭转移的影响及相关蛋白表达的影响。方法利用MTT检测Twist1对人乳头状甲状腺癌乳头状癌细胞（ IHH-4）细胞增殖能力的影响；利用转孔小室（ Transwell小室）实验检测Twist1对人乳头状甲状腺癌 IHH-4细胞侵袭能力的影响；采用免疫印迹试验（ Western Blot ）检测上皮-间质转化（ EMT）相关标志蛋白和核因子（ NF-κB）信号通路的分子蛋白的改变情况。结果在人乳头状甲状腺癌IHH-4细胞中沉默Twist1后，细胞的增殖能力没有发生显著变化；通过沉默Twist1可以降低人乳头状甲状腺癌IHH-4细胞侵袭和迁移能力，降低了EMT的恶性程度；Western Blot检测沉默Twist1后EMT相关蛋白上皮钙黏蛋白（ E-Cadherin）、神经钙黏蛋白（ N-cadherin）、波形蛋白（ Vimentin）和NF-κB信号通路的p-NF-κB P65均发生明显改变。结论在人乳头状甲状腺癌中Twist1起到癌基因的作用，并且通过NF-κB信号通路对人乳头状甲状腺癌上皮-间质转化起到促进作用，为临床治疗人乳头状甲状腺癌提供科学依据及新的治疗靶点和思路。
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长链非编码 RNA CCAT1对人乳头状甲状腺癌侵袭和迁移能力的影响
目的 检测长链非编码RNA CCAT1在人乳头状甲状腺癌中的表达,并观察下调表达CCAT1对人乳头状甲状腺癌细胞侵袭和迁移能力的影响.方法 检测人正常甲状腺细胞Nthy-ori 3-1及人乳头状甲状腺癌细胞TPC-1中CCAT1的水平,在TPC-1细胞中转染CCAT1 siRNA质粒,利用Transwell小室及划痕实验观察下调表达CCAT1对细胞侵袭和迁移能力的影响,通过Western blot检测BRAF、MUC15、RKIP蛋白的变化.结果 人乳头状甲状腺癌细胞TPC-1中CCAT1的水平明显高于人正常甲状腺细胞Nthy-ori 3-1;在TPC-1细胞中下调表达CCAT1后能够明显抑制细胞的侵袭和迁移能力;Transwell 侵袭实验和迁移实验显示下调表达CCAT1组TPC-1细胞的穿膜数与对照组比较明显减少.划痕实验中下调表达CCAT1后细胞间距较对照组明显增大,提示细胞运动能力减弱.同时下调表达CCAT1可明显降低细胞中BRAF、MUC15的表达,增高RKIP蛋白的表达.结论 人乳头状甲状腺癌中长链非编码RNA CCAT1较正常甲状腺细胞明显升高;在乳头状甲状腺癌中下调表达CCAT1可抑制细胞的侵袭、迁移运动能力,并且可能通过影响BRAF、MUC15、RKIP蛋白的表达发挥上述功能.
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促性腺激素释放激素受体在人乳头状甲状腺癌中的表达及意义
目的:研究促性腺激素释放激素受体(GnRH-R)在人乳头状甲状腺癌组织中的表达及其可能的临床意义.方法:采用免疫组织化学ABC法和原位杂交技术检测28例人乳头状甲状腺癌病理标本中GnRH-R的表达与细胞定位,并采用图像分析法比较该受体在正常组织与癌组织的相对含量是否存在显著差异.结果:人乳头状甲状腺癌组织中,GnRH-R呈较强的免疫反应阳性,阳性物质为棕褐色,主要分布在癌细胞胞质, 胞核呈阴性.原位杂交结果同免疫组化染色结果基本一致,癌细胞胞质可以检测到较强的GnRH-R mRNA阳性杂交信号,呈棕褐色.胞核淡染或不着色.图像分析结果表明甲状腺癌中GnRH-R在转录和翻译水平上的相对含量均显著高于正常组织(P＜0.05).结论:人乳头状甲状腺癌不仅可以表达GnRH-R,而且可以自身合成GnRH-R.GnRH和GnRH-R可能参与了乳头状甲状腺癌的发病机制.
关键词： 促性腺激素释放激素受体 人乳头状甲状腺癌 免疫组织化学 原位杂交
