首页 > 文献资料
-
α-细辛醚对Fmr1基因敲除小鼠跳台行为和海马P-Akt表达的影响
目的通过观察α-细辛醚对Fmr1基因敲除小鼠（ KO鼠）跳台行为和海马磷酸化蛋白激酶B（ P-Akt）表达的影响，初步探讨α-细辛醚对KO鼠学习记忆缺陷的治疗作用及其可能的机制。方法采用4周龄纯合子（-/-）FVB Fmr1基因敲除型及4周龄纯合子（＋/＋）FVB野生型（ WT）近交系小鼠小鼠共计231只。KO及WT小鼠各分7组，分别为：空白对照组，阴性对照组（生理盐水组），α-细辛醚治疗组3 mg/kg组，6 mg/kg组，9 mg/kg组，12 mg/kg 组，24 mg/kg组，KO小鼠每组16只；WT小鼠每组17只。4周龄小鼠予连续腹腔注射生理盐水及α-细辛醚6 d，第7天腹腔注射30 min后行跳台实验（第1天），测定小鼠避暗及跳台潜伏期和错误次数，第8天腹腔注射30 min后行跳台实验（第2天），测定小鼠避暗及跳台潜伏期和错误次数，第9天腹腔注射30 min后取脑海马，并通过Western blot观察小鼠海马内P-Akt及Akt表达。结果跳台实验结果：KO小鼠阴性对照组，3 mg/kg，6 mg/kg，9 mg/kg及12 mg/kg用药组的跳台潜伏期较空白对照组有明显增高（ P ﹤0.05），而在24 mg/kg组，虽然潜伏期较空白组有增加，但是无统计学意义差异（ P ﹥0.05）。KO小鼠各组的跳台实验错误次数之间无统计学差异（ P ﹥0.05）。WT小鼠腹腔注射生理盐水及不同剂量α-细辛醚后，各组间的跳台实验的潜伏期及错误次数均无统计学差异（ P ﹥0.05）。KO小鼠海马中的P-Akt均较WT小鼠明显减少。而Akt的表达在KO及WT小鼠中均无统计学意义的变化（ P ﹥0.05）。用药后KO小鼠各用药组之间P-Akt表达变化无统计学差异（ P ﹥0.05）。结论部分α-细辛醚剂量可改善KO小鼠的跳台行为， KO小鼠的Akt通路可能受损，这可能是导致KO小鼠学习记忆受损的可能原因之一。
-
烟碱型乙酰胆碱受体α7在Fmr1基因敲除小鼠中的表达及意义
目的 观察烟碱型乙酰胆碱受体α7在Fmr1基因敲除小鼠前额皮层及海马的表达,探讨其在Fmr1基因敲除小鼠学习记忆中的作用.方法 将4周龄FVB小鼠分为WT组和KO组,用跳台实验分别检测KO及WT小鼠学习记忆的能力,利用Western blotting和免疫组化方法检测KO及WT小鼠前额皮层及海马α7 nAChR的表达.结果 跳台实验结果显示,与WT空白组比较,KO空白组第一天及第二天的潜伏期均显著缩短,错误次数明显增多,差异均具有统计学意义(P＜0.05);免疫组化结果显示,与WT空白组相比,KO空白组前额皮层和海马区α7 nAChR免疫阳性细胞数均显著减少(P＜0.05);Western Blotting结果显示,KO空白组前额皮层及海马区α7 nAChR表达量均较WT空白组减少,海马区更为显著,差异均具有统计学意义(P＜0.05).结论 Fmr1基因敲除小鼠前额皮层、海马区的α7 nAChR表达量较野生型小鼠减少,提示α7 nAChR参与了Fmr1基因敲除小鼠学习记忆障碍的发病机制.
关键词： Fmr1基因敲除 跳台实验 学习记忆 α7烟碱型乙酰胆碱受体 -
30日龄Fmr1基因敲除小鼠的避暗实验观察
目的 实验对30日龄的Fmr1基因敲除小鼠的避暗实验进行观察.方法 采用30 d龄的KO鼠和WT鼠分别连续进行2d的避暗实验,根据所获得的数据进行多因素方差分析处理.结果 KO鼠的电击次数与WT鼠相比显著增多,具有统计学意义P＜0.05,潜伏期只有第2天雄性相比显著(P＜0.05),其他均无明显差异；同周龄KO鼠潜伏期比WT鼠明显少(P＜0.05)；而KO鼠的错误次数比WT鼠明显多(P＜0.05)；不同周龄KO鼠或WT鼠的潜伏期、错误次数无差异(P＞0.05)；第1天KO鼠的潜伏期和错误次数与第2天相比无差异(P＞0.05)；第1天WT鼠的潜伏期和错误与第2天相比有差异(P＜0.05).结论 30日龄Fmr1基因敲除小鼠的认知能力相对低下.
-
三十日龄Fmr1基因敲除小鼠的水迷宫实验观察
目的 实验对30日龄的Fmr1基因敲除(KO)小鼠的经典Morris水迷宫实验进行观察.方法 采用Morris水迷宫实验,测试1月龄KO小鼠与WT小鼠的学习记忆功能.水迷宫实验共训练4 d,记录每天的潜伏期与游泳轨迹,第5天去除平台,记录小鼠停留各象限的时间百分比.根据所获得的数据进行多因素方差分析处理.结果 ①空间航行实验第1天至第3天实验中KO鼠与WT鼠的潜伏期和穿越平台次数差异无统计学意义(P>0.05);在第4天实验中KO鼠的潜伏期和穿越平台次数比WT鼠差异有统计学意义(JP<0.05).②空间搜索实验4周龄WT鼠在目标象限停留时间比其它象限停留时间长;4周龄KO鼠在第二象限停留时间长.结论 30日龄KO小鼠存在认知功能障碍.
-
30日龄FMR1基因敲除小鼠的旷场行为观察
目的 观察30日龄FMR1基因敲除小鼠的旷场行为进行.方法 在旷场实验中采取4个区域分割采用VIEWER软件及目测对30 日龄的FMR1基因敲除小鼠和野生型小鼠进行旷场行为观察,数据采用多因素方差分析处理.结果 采用VIEWER软件分析发现:FMR1基因敲除小鼠在第4区域的停留时间、运动长度、进入格次数、伸头较野生型小鼠显著增加,而在在第1区域的Tailmoves较野生型小鼠显著减少,FMR1基因敲除小鼠在各区的速度,站立不动与野生型小鼠无明显差别.FMR1基因敲除小鼠在第3区域的运动长度和进入格次数也较野生型小鼠显著增加,FMR1基因敲除小鼠在第2区域和第3区域的点头较野生型小鼠显著增加,P<0.05.采用目测分析发现:FMR1基因敲除小鼠在第4区域进入次数较野生型小鼠增加(P<0.05),FMR1基因敲除小鼠跨线次数较野生型小鼠显著增加,P<0.05.结论 30日龄FMR1基因敲除小鼠的行为异常,运动性和兴奋性较野生型小鼠增高.采用VIEWER软件较目测更更加灵敏、客观、准确.
-
跳台实验训练后 FMR1基因敲除小鼠学习记忆与细胞外信号调节激酶1／2的关系
目的：探讨跳台实验训练后FMR1基因敲除（ KO）小鼠学习记忆与海马CA1、CA3区细胞外信号调节激酶1／2（ERK1／2）信号通路的关系。方法将20只4周龄FVB近交系KO及20只野生型（WT）小鼠分为KO组和WT组。利用跳台实验观察各组小鼠被动学习记忆能力，并通过Western blot检测海马CA1、CA3区ERK1／2及p－ERK1／2的表达。结果跳台实验第1天KO组的潜伏期较WT组短，错误次数较WT组多。跳台实验第2天KO组的潜伏期较WT组短，错误次数较WT组多。 Western blot结果显示跳台后KO组海马组织CA1区p－ERK1／2表达增加，与WT组比较差异有统计学意义（ P＜0.05）；跳台后KO组海马CA3区p－ERK1／2表达虽有增加，但与WT组比较，差异无统计学意义；跳台后KO组海马组织CA1及CA3区ERK1／2的表达与WT组比较差异无统计学意义。跳台后KO组和WT组ERK1／2及p－ERK1／2的表达与跳台前比较差异无统计学意义。结论 FMR1基因敲除小鼠学习记忆障碍与海马p －ERK1／2的异常表达有关。
关键词： 跳台实验 Fmr1基因敲除 细胞外信号调节激酶1/2 -
GSK3抑制剂氯化锂对FMR1基因敲除小鼠的自主活动的干预作用
目的:探讨GSK3抑制剂氯化锂对FMR1基因敲除小鼠的自主活动的干预作用及机制.方法:通过对90只30日龄FMR1基因敲除小鼠连续腹腔注射不同剂量氯化锂5d,行自主活动行为学实验,观察能否改善KO鼠的过度活动的表型;同时利用免疫印迹技术检测KO及WT鼠的海马和皮层的GSK3β和P-GSK3β的变化.结果:在自主活动行为学实验中,KO鼠的活动次数比WT鼠的活动次数增多而站立次数比WT鼠减少,差异具有统计学意义(P＜0.05)；使用氯化锂后,KO鼠的活动次数明显减少及站立次数明显增多,差异均有统计学意义(P＜0.05)；免疫印迹实验结果:KO鼠P-GSK3β表达比WT鼠少,用氯化锂后,KO鼠P-GSK3β的表达增多.KO鼠和WT鼠使用氯化锂后,总的GSK3β无明显改变(P＞0.05).结论:GSK3β的抑制剂氯化锂能改善KO鼠的活动过度的表型,可能与氯化锂导致的P-GSK3β的表达增加有关,对FMR1基因敲除小鼠有治疗作用.
-
α-细辛醚对Fmr1基因敲除小鼠的自主活动的干预作用
目的 探讨α-细辛醚对Fmr1基因敲除小鼠的自主活动的干预作用.方法 选取30日龄Fmr1基因敲除小鼠(KO小鼠)和FVB野生型小鼠(WT小鼠)为研究对象,将KO和WT两种类型的小鼠分别分为7小组,每组15只.其中1组作为对照组给予生理盐水,另外6小组连续腹腔注射不同剂量α-细辛醚(3 mg/kg、6 mg/kg、9 mg/kg、12 mg/kg、24 mg/kg、36mg/kg)5天,用药第5天进行自主活动行为学实验,观察α-细辛醚能否改善KO鼠的过度活动的表型.结果 在行为学自主活动实验中,KO鼠的活动次数比WT鼠的活动次数多,站立次数比WT鼠的站立次数少,差异具有统计学意义(P＜0.05);使用α-细辛醚后,KO鼠的活动次数明显减少,站立次数明显增多,差异均具有统计学意义(P均＜0.05).结论 α-细辛醚能改善KO鼠的的活动过度的表型,可能对Fmr1基因敲除小鼠有治疗作用.
