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肺鳞状细胞癌血清 CCL11表达及临床意义研究
目的:探讨 CC 修饰趋化因子11(CCL11)在肺鳞状细胞癌(LSCC)患者血清中的表达情况及临床意义。方法分别采用逆转录定量 PCR(qRT - PCR)和酶联免疫吸附(ELISA)法检测90例术前肺鳞状细胞癌及30例健康志愿者血清样本中 CCL11 mRNA 及蛋白的表达,分析血清 CCL11蛋白表达与患者临床特征及预后间的相关性。结果CCL11在肺鳞状细胞癌患者血清中高表达( P <0.05),并与肿瘤淋巴结转移( t =1.871,P =0.022)及高 TNM 分期(III+ IV 期,t =2.219,P =0.015)呈显著正相关;血清 CCL11蛋白高表达的患者3年生存率低于 CCL11蛋白表达阴性患者( P <0.05)。结论 CCL11在肺鳞状细胞癌患者血清中表达上调,血清高水平 CCL11蛋白表达与肿瘤恶性临床病理特征及不良预后有关。
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人 MicroRNA335的预测靶基因 CCL11 CCL26及 SOX4的鉴定
目的:验证人 MicroRNA335(hsa-miR-335)与嗜酸细胞趋化因子1(CCL11)、嗜酸细胞趋化因子3(CCL26)、SOX4的靶向调控关系。方法选择网络在线的生物信息学软件 miRanda 和 TargetScan 共同预测为 hsa-miR-335靶基因的 CCL11、CCL26、SOX4作为研究对象。构建 CCL11、CCL26、SOX4基因3′端非翻译区(3′UTR)双荧光素酶报告基因载体 pMIR-RE-PORT-CCL113′UTR、pMIR-REPORT-CCL263′UTR、pMIR-REPORT-SOX43′UTR;采用 Lipofectamine 2000将真核表达质粒pMIR-REPORT-CCL113′UTR、pMIR-REPORT-CCL263′UTR、pMIR-REPORT-SOX43′UTR、阳性对照质粒分别与 Pre-miRTM miRNA335 Precursor 或阴性对照质粒共转染到293 T7/17细胞;双荧光素酶报告基因检测系统检测 CCL11、CCL26、SOX4基因3′UTR 与 Hsa-mir-335共转染萤火虫(Firefly)和海洋腔肠(Renilla)荧光素酶活性,并与阴性对照对比。结果hsa-miR-335对SOX4的荧光表达有显著的抑制作用(P <0.01),但并不影响 CCL11、CCL26荧光素酶活性(P >0.05)。结论hsa-miR-335可靶向调控 SOX4,而对 CCL11、CCL26的表达无影响。