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哇巴因对乳腺癌MCF7细胞能量代谢的影响研究
目的 检测哇巴因对人乳腺癌MCF7细胞能量代谢的影响,初步探索相关作用机制.方法 联合使用ATP检测系统及海马生化分析仪检测哇巴因作用后细胞内ATP水平及线粒体呼吸作用的变化;使用葡萄糖氧化酶法检测哇巴因对MCF7细胞葡萄糖吸收水平的影响;使用 AMPK 活性检测探针检测 AMPK 活性的变化;通过 Western blot 实验初步检测哇巴因对 MCF7细胞内相关激酶蛋白水平的影响.结果 哇巴因能够时间依赖性地降低 MCF7 细胞内 ATP水平,剂量依赖性地降低线粒体呼吸作用,同时 25 ~50 nmol/L 的哇巴因作用 24 h 后能够促进葡萄糖吸收.该化合物可激活 AMPK 活性,在 12 h 表现出佳活性.Western blot 实验结果证实哇巴因能够升高 AMPK 和底物蛋白乙酰辅酶 A 羧化酶(ACC)的磷酸化水平,抑制Na+/K+-ATP 酶 α1 亚型(NKAα1)的表达.结论 哇巴因可抑制人乳腺癌 MCF7 细胞的线粒体氧化呼吸作用,促进糖酵解.哇巴因对肿瘤代谢的影响可能与其调控 AMPK 活性有关.
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PTEN、CPT1A、COX4在高原鼠兔脂代谢相关组织中的表达和意义
目的 检测PTEN、CPT1A及COX4在高原鼠兔脂代谢相关组织中的表达水平,探讨其在能量代谢及环境适应过程中可能的作用.方法 同一时间从青海门源地区捕捉20只高原鼠兔,运用western blotting法检测白色脂肪、棕色脂肪、肝脏、肌肉组织中PTEN、CPT1A及COX4蛋白的表达水平.结果 Western blotting显示,PTEN、CPT1A及COX4蛋白表达存在显著的组织水平差异.PTEN在肝脏高表达,而在棕色脂肪、白色脂肪和肌肉组织中表达相对较少(P=0.001);CPT1A与COX4在四种组织中的表达呈现一致的趋势,即在肝脏、肌肉、棕色脂肪组织中高表达,而在白色脂肪组织中表达很少甚至不表达(P＜0.001).结论 PTEN可能参与肝脏脂代谢过程.CPT1A主要参与脂肪酸β氧化,与肝脏脂肪酸氧化、骨骼肌能量摄取以及棕色脂肪产热供能有关.为高原鼠兔在高寒环境中生存提供能量.COX4作为线粒体氧化呼吸链末端的酶,促进线粒体氧化呼吸作用,通过肝脏脂肪酸氧化提供能量,促进骨骼肌能量摄取,并诱导棕色脂肪产热供能,进而调节机体能量代谢平衡.
