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重组腺病毒Ad5/F11p-GFP对不同肿瘤细胞系感染效率的比较研究
目的以 Ad5-GFP 及 Ad5/F35-GFP 为对照,评价Ad5/F11p-GFP 对不同肿瘤细胞系的感染效率。
方法制备并纯化 Ad5-GFP、Ad5/F11p-GFP 及 Ad5/F35-GFP三种重组腺病毒,以不同的感染复数(MOI)感染乳腺癌细胞系 SKBR-3、MCF-7及肾癌细胞系786O。48 h 后,荧光显微镜观察 GFP 的表达,流式细胞仪检测感染效率及不同细胞表面柯萨奇腺病毒受体(CAR)、CD46和桥粒芯糖蛋白质2的表达。
结果 Ad5/F35-GFP 对 SKBR-3、MCF-7及 786O 均具有很高的感染效率,且其在较低的 MOI 时就具有较高的感染效率;Ad5/F11p-GFP 对 CD46高表达的 MCF-7及 786O具有较高的感染效率,5 MOI 感染即可达到60%以上的感染效率;而 Ad5-GFP 仅对 CAR 高表达的细胞系786O具有较高的感染效率,且感染效率随着 MOI 的增加而升高。Ad5/F11p-GFP 和 Ad5/F35-GFP 对三种肿瘤细胞系的感染效率明显高于 Ad5-GFP。
结论对5型腺病毒进行纤维顶球的改造,可增强对肿瘤细胞的感染效率。