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CD3AK/iNOS细胞对慢性粒细胞原代细胞白血病体外净化效应
本研究旨在探讨免疫细胞性一氧化氮供体CD3AK/iNOS细胞对慢性粒细胞白血病(CML)原代白血病细胞的体外净化效应.培养并扩增PA317/iNOS细胞并用G418筛选;用MH3T3细胞测定病毒滴度,分离外周血单个核细胞并用抗CD3单克隆抗体激活;病毒感染靶细胞CD3AK及用G418筛选,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测CD3AK/iNOS中iNOS cDNA的转录;用硝酸还原酶法检测CD3AK/iNOS细胞培养上清中NO含量以及iNOS活性;用系列稀释半定量巢式RT-PCR检测CML患者白血病原代细胞经CD3AK/iNOS细胞净化后bcr/abl融合基因的表达水平.结果表明,PA317/iNOS细胞能稳定合成并分泌重组逆转录病毒颗粒;MH3T3细胞测定病毒滴度为1.0×105CFU/ml;RT-PCR检测发现CD3AK/iNOS细胞中有iNOS cDNA的转录;CD3AK/iNOS细胞培养上清中NO含量和iNOS活性较CD3AK细胞明显升高.上述两项指标,经统计学检验,均有显著性差异(P＜0.001,P＜0.001).系列稀释半定量RT-PCR检测发现,经CD3AK/iNOS细胞净化后CML患者白血病细胞bcr/abl融合基因的表达明显下调.实验结果统计分析表明,CD3AK/Neo细胞组净化后与CD3AK/iNOS细胞组净化后bcr/abl mRNA表达的比较具有显著性差异(P＜0.001).结论:逆转录病毒可介导iNOS基因转入CD3AK细胞,成功地构建了CD3AK/iNOS;CD3AK/iNOS能明显地增加NO含量和iNOS活性,应用CD3AK/iNOS可能成为一个有效的AHSCT体外净化方法.
关键词： 慢性粒细胞白血病 CD3AK/iNOS细胞 CD3抗原 一氧化氮 体外净化 -
诊治小细胞变异型间变性大细胞淋巴瘤(ALK阳性)病例体会并文献复习
小细胞变异型ALK阳性间变性大细胞淋巴瘤(ALCL)是非霍奇金淋巴瘤的一种独立类型,归类于外周T细胞淋巴瘤(PTCLS),由于细胞表面表达Ki-1(CD3抗原)亦称小细胞型Ki-1阳性淋巴瘤(small cell variant,SCV),好发于儿童和青少年,常累及皮肤和淋巴结,病变呈进展性.
