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急性髓系白血病亚型5'-核苷酸酶超微结构分析
5'-核苷酸酶(5'NT)为嘌呤代谢酶,能水解核苷酸为核苷与磷酸,兼有磷酸转移酶活性,对维持核苷酸代谢平衡有重要作用.本研究主要探讨急性髓系白血病不同亚型患者及正常人粒细胞5'NT膜表达特点.用白细胞分离液分离33例急性粒细胞白血病患者和5例正常人骨髓有核细胞,以胞苷-5-单磷酸(CMP)为底物进行电子显微镜和细胞组织化学染色,在观察细胞结构基础上分析粒细胞阳性率和阳性指数.结果表明,阳性反应产物主要分布于粒细胞膜,正常人大部分粒细胞呈阴性反应,或反应很弱;急性髓系白血病M0、M1、M2和t(8;21)各型粒细胞阳性率和阳性指数升高,但M0.M1+M2和t(8;21)三组之间差别不明显.t(15;17)细胞阳性率和阳性指数低于其它亚型;与正常人相比无统计学差别.结论:5'NT表达强弱可能与急性白血病粒细胞分化程度有关,t(15;17)白血病可能属于高分化性髓系向血病.
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大肠侧向发育型肿瘤细胞株的建立及其鉴定
目的为了深入研究大肠侧向发育型肿瘤(LST)细胞的生物学特性及其发生发展的机制.方法采用人LST组织进行肿瘤细胞建株及细胞分离与原代培养,传代至70代进行细胞鉴定,包括细胞的形态结构分析、染色体分析和免疫组化分析等,并与非LST细胞作对比.结果 LST细胞为上皮来源的肿瘤细胞,多形性上皮细胞占大多数,其有近似肿瘤细胞的生长特性,群体倍增时间为36h;染色体数量为42～66,85%在三倍体范围内,并具有异常染色体核型;免疫组织化学观察ESA、CK20均呈阳性;超微结构具肿瘤细胞样表现和特征.结论成功建立了1个LST细胞株,并命名为LST-R1细胞,为进一步深入研究LST细胞的生物学特性及大肠癌的发生发展机制奠定了基础.
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小鼠胚胎卵黄囊与成体间充质干细胞的比较:生物学特性相似吗?
背景:与成体间充质干细胞相比,来源于早期胚胎的卵黄囊间充质干细胞有更强的自我更新能力和可塑性,且在胚胎发育过程中可分化为成血管细胞和造血干细胞,启动胚胎血管发生和造血组织发育.目的:探讨小鼠卵黄囊间充质干细胞的生物学特征.设计、时间及地点:重复测量设计,细胞学体外观察,于2006-03/2007-01在首都医科大学组织学与胚胎学实验室完成.材料:妊娠10 d的ICR小鼠80只,由首都医科大学动物部提供.方法:显微分离ICR小鼠胚胎卵黄囊,经Ⅰ型胶原酶消化得到卵黄囊细胞,取贴壁细胞培养,于接近90%融合时按1:2进行传代.取生长状态良好的第1代细胞,以地塞米松、胰岛素定向诱导卵黄囊间充质干细胞向脂肪细胞方向分化;以血管内皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子体外诱导其向血管内皮细胞方向分化.主要观察指标:相差显微镜下观察卵黄囊间充质干细胞形态;流式细胞仪检测卵黄囊间充质干细胞表面标志和细胞周期;钙钴法测定卵黄囊间充质干细胞碱性磷酸酶活性;细胞组织化学检测卵黄囊间充质干细胞化学变化;油红O检测诱导成脂能力;免疫荧光法鉴定诱导成血管内皮细胞能力.结果:体外培养获得的小鼠卵黄囊间充质干细胞大多数呈梭形;原代和第1代细胞均为CD44,CD105阳性,CD34也有少量表达;67.4%细胞处于G0/G1期,13.9%细胞处于S期;P1代细胞碱性磷酸酶染色及苏丹黑B反应呈阴性,PAS染色呈阳性;成脂诱导1周后,胞浆中有脂滴形成,经油红O染色脂滴为鲜红色;成血管内皮细胞诱导后,细胞由原来梭形或多角形渐变为圆形或椭圆形,且内皮细胞标志物FLK1染色呈阳性.结论:小鼠卵黄囊间充质干细胞的生物学特征与成体间充质干细胞相似.
