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光动力治疗大鼠大面积创伤感染的实验研究
探讨新型卟啉类光敏剂PA1介导的光动力抗菌疗法治疗大鼠大面积创伤感染的效果.体外培养创面易感染的3种菌株,有抗药性金黄色葡萄球菌(MRSA)、大肠杆菌(E.coli和铜绿假单胞菌(P.aeruginosa),探讨3种细菌对PA1的吸收量、光照PA1的小抑菌浓度和低杀菌浓度;取清洁级雄性Wistar大白鼠40只,建立皮肤大面积创伤感染模型,创面滴加光敏剂PA1,用650 nm激光照射治疗,检测各实验组的创面愈合率、不同时相点创面下的菌落数.结果表明,上述3种细菌对PA1的大吸收量都发生于前30 min,以后趋于平稳.光照PA1对3种细菌均有灭活作用,对MRSA和E.coli的低杀菌浓度为31 μM,对P.aeruginosa的低杀菌浓度为62.5 μM.体内实验结果显示,治疗组的各项指标优于模型对照组(P ＜0.05或P＜0.01),高剂量治疗组的各项指标优于中、低量治疗组(P＜0.01),为临床治疗大面积创伤感染积累一定的实验经验.
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采用HPLC方法检测卟啉类光敏剂的研究
光动力学疗法(photodynamic therapy,PDT)具有良好的靶向性、微创性和安全性,已成为肿瘤防治中的重要领域,而光敏剂(photosensitizer)则是PDT的核心和关键.本文报道了一种用于卟啉类光敏剂的新HPLC分析方法,采用Shiseido Capcell PAK C18 (150 mm ×4.6 mm,5μm)色谱柱,柱温30℃,甲醇-1％冰乙酸溶液为流动相,流速1.0 mL·min-1,梯度洗脱,检测波长380 nm.方法学研究表明本方法具有良好的专属性、精密度、准确度和重复性,适用于卟啉类光敏剂的纯度检查和含量测定,已在新型光敏剂华卟啉钠的开发中发挥了重要导向作用.
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羟乙基乙烯基次卟啉Ⅸ的制备
氯化血红素经溴化氢加成、羟基亲核取代和脱水反应制得羟乙基乙烯基次卟啉Ⅸ粗品.粗品经过中压柱色谱和高压制备色谱纯化分别得到3-乙烯基-8-(1-羟基乙基)次卟啉Ⅸ和3-(1-羟基乙基)-8-乙烯基次卟啉Ⅸ,并通过MS、IR、1H NMR和13C NMR确证结构.
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新型水溶性卟啉类光敏剂A1光动力治疗黑色素瘤的实验研究
目的 探讨新型水溶性卟啉类光敏剂A1光动力疗法对人黑色素瘤细胞系A375的体外及体内抑瘤效应及其相关机制,为临床应用提供理论依据.方法 本研究分为空白对照组、单纯激光照射组、单纯光敏剂组及不同剂量光敏剂的光动力治疗组.MTT法检测光动力疗法对A375细胞增殖的影响.利用激光共聚焦显微镜检测A1在A375细胞中的亚细胞定位.利用Hoechst 33342染色和流式细胞术检测细胞凋亡及坏死情况.检测A1光动力治疗后,A375细胞中活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量变化.建立黑色素瘤荷瘤小鼠模型,绘制肿瘤生长曲线,观察治疗效果.结果 体外实验表明,单纯给药或光照对肿瘤细胞的生长无或很小影响,而A1-PDT治疗组能明显抑制A375肿瘤细胞增殖.Hoechst 33342染色和流式细胞术结果显示,与对照组比较,A1-PDT治疗组可以明显诱导A375细胞凋亡.与对照组比较,A1-PDT治疗组可以明显增加A375细胞中ROS含量.激光共聚焦显微镜显示化合物A1主要定位在肿瘤细胞的溶酶体中.体内实验显示,光动力疗法可以明显抑制小鼠黑色素瘤皮下移植瘤生长.结论 光敏剂A1介导的光动力疗法对黑色素瘤细胞及移植瘤的生长抑制作用明显.光动力疗法以细胞凋亡为主,其机制可能与光敏剂A1定位在肿瘤细胞的溶酶体,增加A375细胞中ROS含量,降低谷胱甘肽(GSH)含量相关.
