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家蝇3龄幼虫抗肿瘤肽促K562细胞凋亡作用及其机制研究
目的 观察家蝇3龄幼虫抗肿瘤肽对K562细胞核和线粒体膜电位及K562细胞凋亡蛋白半胱天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)的影响,进而探讨家蝇3龄幼虫抗肿瘤肽是否可以影响线粒体膜电位及促进K562细胞凋亡.方法 首先采用Hoechst33258荧光标记法,将家蝇3龄幼虫峰5、峰8组分作用于K562细胞,用荧光显微镜检测K562细胞核荧光强度的变化；其次采用荧光探针罗丹明123标记K562细胞,在激光扫描共聚焦显微镜下观察K562细胞中罗丹明123荧光强度,以细胞内荧光强度表示线粒体膜电位大小；后用caspase-3检测试剂盒和酶标仪测定K562细胞caspase-3的含量.结果 采用Hoechst33258荧光标记法,用荧光显微镜观察到家蝇3龄幼虫峰5、峰8组分作用于K562细胞后部分细胞核的荧光强度增强,说明其可以引起K562细胞发生凋亡；用罗丹明123标记,激光共聚焦显微镜观察发现,家蝇3龄幼虫峰5、峰8组分作用组的K562细胞荧光强度值明显低于对照组(t1=21.30,t2=196.23,P＜0.05),说明家蝇3龄幼虫抗肿瘤肽可以使K562细胞线粒体膜电位降低；峰5、峰8组分作用组caspase-3的含量明显高于对照组(t1=146.92,t2=189.56,P＜0.05),说明3龄幼虫抗肿瘤肽可以促进K562细胞发生凋亡.结论 家蝇3龄幼虫抗肿瘤肽峰5、峰8组分对K562细胞核具有损伤作用,可以引起K562细胞发生凋亡,作用机制是通过降低K562细胞线粒体膜电位,激活caspase-3,扰乱其生理功能,促使其凋亡.
关键词： 抗肿瘤肽 荧光标记法 线粒体膜电位 半胱天冬氨酸蛋白酶-3 凋亡 -
抗肿瘤肽AP-9的固相合成
建立了抗肿瘤肽AP-9的Fmoc固相全合成方法,产品纯度大于98%.着重研究了Fmoc-Arg(Pbf)-OH与H-Pro-Trt树脂的缩合反应.结果表明,以THF-NMP(1∶1)为溶剂,于30℃微波辐射反应6 min,缩合产率达80.2%.
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贻贝水解物抗肿瘤活性肽的分离纯化
采用超滤法、DEAE-sepharose离子交换法、Sephadex G-25凝胶层析法和反相高效液相色谱法从贻贝水解物中分离得到一个具有抗肿瘤活性的多肽.以CCK-8法作为各分离阶段抗肿瘤活性的筛选方法.终获得一个高纯度多肽,经检测该肽的氨基酸序列为Asp-Leu-Tyr.
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无尾两栖类抗肿瘤肽的研究进展
无尾两栖类动物所含有的生理活性物质数量巨大、种类繁多、功能复杂,是发掘天然抗肿瘤肽的巨大资源库.本文主要概述了无尾两栖动物中抗肿瘤肽的组织分布、分类、理化性质及主要作用机制,为开发两栖类动物多肽有效成分提供理论参考.
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抗肿瘤肽的研究进展
随着人们对肿瘤认识的加深和分子生物学技术的迅速发展,抗肿瘤肽的研究已成为热点.本文对近年来抗肿瘤肽的研究及其应用进行一个概括性的介绍.
