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现场应用粪抗原检测法诊断犬细粒棘球绦虫感染的效果评价
目的评价粪抗原检测法在包虫病流行病学监测中的实际应用价值.方法家犬在采集粪便后,进行槟榔碱导泻,应用粪抗原检测法检测粪样中的细粒棘球绦虫抗原,并与槟榔碱导泻法的驱虫结果比较,同时分析犬肠道中寄生的其它蠕虫对粪抗原检测结果的影响.结果在294只槟榔碱导泻成功的家犬中,45只检出细粒棘球绦虫,粪抗原阳性犬共46只.二者的符合率为97.8%.在249只未检出细粒棘球绦虫的家犬中,粪抗原阳性者1只.结论粪抗原检测法诊断犬细粒棘球绦虫感染具有较高的敏感性和特异性.可作为包虫病常规监测方法推广应用.
关键词： 细粒棘球绦虫 包虫病监测 粪抗原 犬 双抗体夹心ELISA -
抗幽门螺杆菌单克隆抗体的制备与特性研究
幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染是人类常见的慢性细菌感染,可导致胃炎、消化性溃疡和胃癌等,还可引起口腔溃疡,与一些非胃肠疾病如发育不良、冠心病、糖尿病和胆石症等的发生有关[1,2].幽门螺杆菌粪抗原(Hp stool antigen,HpSA)检测是一种诊断Hp感染的新技术,其诊断准确性可达90%以上,同时具有简便快速、价格低廉、对病人无任何创伤,可不需任何仪器等优点[3,4].本研究采用传统的杂交瘤细胞技术,通过制备效价高、特异性好的抗Hp单克隆抗体,为Hp抗原检测技术的建立等奠定实验基础.
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ELISA检测粪抗原诊断寄生虫感染的研究进展
双抗体夹心法ELISA检测寄生虫粪抗原,用于诊断寄生虫病或确定寄生虫感染,特别是肠道寄生虫感染,具有敏感、特异、快速,可区分现症感染与既往感染,且具有早期诊断和疗效考核价值等特点,是临床或现场个体检查及群体流行病学调查与监测的重要工具和手段.
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西藏自治区犬棘球绦虫感染现状调查与分析
目的 分析西藏自治区犬棘球绦虫的感染情况. 方法 于2016年8-11月,采取分层整群随机抽样法,在西藏自治区抽取那曲、阿里、山南、拉萨、昌都、日喀则、林芝等7个地区(市).根据不同生产类型,将7个地区(市)下辖的县按牧区、半农半牧区、农区和城镇进行分层,按比例抽取调查村数.以行政村(居委会)为单位,每村随机抽取20个养犬户,每户采集1条犬的粪样,ELISA检测犬粪棘球绦虫抗原.利用x2检验比较不同组间阳性率的差异. 结果 西藏自治区犬粪棘球绦虫抗原阳性率为6.31％ (458/7 259),那曲、阿里、山南、拉萨、昌都、日喀则、林芝等7个地区(市)阳性率依次为10.08％(109/1 081)、8.04％ (34/423)、6.87％ (64/932)、6.30％ (66/1 047)、5.74％ (78/1 358)、4.64％ (89/1 917)和3.59％ (18/501),差异有统计学意义(x2=44.671,P＜0.01).家犬和无主犬粪棘球绦虫抗原阳性率分别为6.28％ (133/2 119)和6.32％ (325/5 140),差异无统计学意义(x2=0.005,P＞0.05).牧区犬粪棘球绦虫抗原阳性率高,为8.41％(187/2 224).不同生产类型地区犬粪棘球绦虫抗原阳性率的差异有统计学意义(x2=25.221,P＜0.01). 结论 西藏自治区犬粪棘球绦虫抗原阳性率较高,那曲、阿里地区和山南市属于高风险地区,尤以牧区更为严重.
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青海省果洛藏族自治州棘球蚴病和棘球绦虫病流行情况调查
目的 了解青海省果洛藏族自治州(简称果洛州)人与动物棘球蚴病的流行情况. 方法 2012年6-8月,在果洛州班玛、达日、甘德、久治、玛多、玛沁等6个县各抽取2～3个乡(镇),对1岁以上常住居民进行B超检查,计算人群棘球蚴病检出率;使用IgG抗体检测试剂盒ELISA检测血清抗棘球蚴抗体,计算人群血清抗体阳性率.采用内脏剖检法调查啮齿动物鼠类及牲畜棘球蚴感染情况,现场随机采集家犬粪,ELISA检测粪抗原阳性情况. 结果 B超检查共15 890人,查出患病者826例,检出率为5.20％ (826/15 890).ELISA检测共1 200人,血清抗体阳性率为16.75％ (201/1200).达日县人群棘球蚴病检出率高,为11.93％ (430/3 605);甘德县血清抗体阳性率高,为48.15％ (65/135),其次为班玛县(12.77％,136/1 065).女性棘球蚴病检出率和血清抗体阳性率分别为6.37％(499/7 839)和26.01％(142/546),均高于男性的4.06％ (327/8 051)和9.02％(59/654) (P＜ 0.01).牧民、宗教人士、学生和家务人员的棘球蚴病检出率均较高,分别为5.24％ (700/13 370)、6.46％ (41/635)、8.39％ (25/298)和5.68％ (18/317).60～、30～和≥70年龄组棘球蚴病检出率均较高,分别为6.91％ (76/1 100)、6.25％ (255/4 078)和8.08％ (37/458);≥70、60～、40～年龄组血清抗体阳性率均较高,分别为48.28％(14/29)、28.57％ (20/70)、23.12％ (40/173).文盲人群的棘球蚴病检出率和血清抗体阳性率均高,为5.85％(431/7 365)和62.61％ (72/115).冬季定居夏季游牧人群的棘球蚴病检出率和血清抗体阳性率高,为6.36％(642/10 087)和60.49％ (147/243).不同地区、性别、职业、年龄组、文化程度以及不同居住方式间差异有统计学意义(P＜0.05).果洛州鼠类棘球蚴感染率为2.41％ (98/4 058),其中久治县高,为4.82％ (49/1 016);终宿主犬粪抗原阳性率为14.90％ (303/2 034),其中玛沁县高,为18.76％ (160/753);中间宿主牛棘球蚴感染率为28.37％ (570/2 009),其中达日县高,为62.80％ (314/500).不同地区间中间宿主牛、啮齿动物鼠类的感染率和终末宿主犬粪抗原阳性率的差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 果洛州棘球蚴病疫情流行严重,犬是主要传染源.
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2015年西藏措美县野外棘球绦虫犬粪污染调查
目的 了解西藏山南地区野外棘球绦虫犬粪污染情况,为制定相关的防治策略提供依据. 方法 于2015年5月在西藏山南地区措美县哲古镇哲古村周边按机械抽样法选取调查点,记录调查点坐标、犬粪数量、营地类型、牧场类型、地形分类、植被类型、地表覆盖类型、有无生活垃圾等信息,并计算调查点距村中心直线距离.采集调查点内犬粪样并应用粪抗原ELISA检测粪便的感染情况,应用x2检验、Fisher确切概率检验法、Kruskal-Wallis秩和检验和Nemenyi多重比较法分析粪便污染分布特征. 结果 共选取79个调查点,有粪便分布的37个,共采集犬粪226份.ELISA检测结果显示,犬粪抗原阳性率为23.9％ (54/226),粪便密度和阳性粪便密度均数分别为0.317 9个/100 m2和0.075 9个/100 m2,大值分别为2.555 6个/100 m2和0.555 6个/100 m2.夏营地的粪便密度和阳性粪便密度分别为0.601 9个/100 m2和0.157 4个/100 m2,均高于非营地(0.170 2个/100 m2和0.033 1个/100 m2)(x2=18.248 4,P＜0.01;x2=15.274 3,P＜0.01);有生活垃圾的调查点的粪便密度和阳性粪便密度分别为0.679 0个/100 m2和0.177 0个/100 m2,高于无生活垃圾的调查点(0.130 3个/100 m2和0.023 5个/100 m2) (x2=34.634 7,P＜0.01;x2=26.109 1,P＜0.01);距村中心直线距离≥10 km的调查点的粪便密度和阳性粪便密度分别为0.403 7个/100 m2和0.107 4个/100 m2,高于距村中心直线距离＜10 km的调查点(0.265 3个/100 m2和0.056 7个/100 m2) (x2=4.432 7,P＜0.05;x2=4.045 5,P＜0.05). 结论 西藏山南地区措美县野外棘球绦虫阳性犬粪污染严重,夏营地、有生活垃圾的区域、距村中心直线距离≥10 km的区域可作为今后棘球蚴病的防治重点范围.
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四川省藏族牧区家犬棘球绦虫病流行病学调查研究
目的 对四川省甘孜县达通玛藏族牧区家犬感染细粒棘球棘球绦虫和多房棘球棘球绦虫进行流行病学调查和评价感染风险因素.方法 分别对甘孜县达通玛藏族牧区查龙、卡龙、大德和查扎等4乡的犬主进行问卷调查,了解家犬感染棘球绦虫的相关因素.剖检流浪犬,检测棘球绦虫感染率,并用此结果 评价粪抗原-ELISA方法 .用该方法 检测家犬感染棘球绦虫的阳性率,评价犬驱虫效果.用X2检验和方差分析对结果 进行统计. 结果 2000年流浪犬棘球绦虫感染率为60.9%(14/23),其中细粒棘球绦虫感染率为26.1%(6/23),多房棘球绦虫感染率为34.8%(8/23).粪抗原-EUSA特异性为80.0%,敏感性为9213%.家犬粪抗原-EUSA阳性率平均为50%(290/580).从2003年起,经每半年1次吡喹酮犬驱虫(5 mg/kg),2005年同一犬群粪抗原阳性率降为17.0%(99/580).犬感染风险因素调查发现敞放犬粪抗原阳性率[40.4%(65/161)]明显高于半栓养犬[白天拴养夜晚放养的犬32.3%(109,337);夜晚拴养白天放养的犬29.2%(21/72)]及一直栓养的犬[20%(2/10)1(P＜0.01);主人缺乏防治相关知识的犬[38.1%(121/318)]和不进行驱虫的犬[47.7%(92/193)],阳性率明显高于主人具有相关知识[28.6%(75/262)]和驱虫犬120.4%(79/387)](P＜0.05和P＜0.01).粪抗原-ELISA阳性率与犬的年龄、性别和饲养家畜的种类无关.结论 四川省甘孜县达通玛藏族牧区是家犬两种棘球绦虫病流行区.粪抗原-EUSA法可用于检测犬棘球蚴病.犬敞放和不对犬驱虫,以及牧民缺乏相关知识是造成家犬棘球蚴病传播、流行的重要原因.
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江苏省苏南地区家犬感染棘球绦虫现状调查与分析
目的 掌握江苏省苏南地区包虫病流行情况,制订有效的防治策略和措施. 方法 选择本省近几年来有包虫病病例的宜兴溧阳2市的病例所在镇或村,收集这些镇村所有犬的粪便标本进行粪抗原检测,并对抗原阳性粪样进行镜检或犬进行药物导泻查找病原体;同时调查和走访当地猪、羊屠宰场,对相关人员进行问卷调查.结果 共查犬粪791份,阳性12份,阳性率1.52%;未发现棘球绦虫虫卵或成虫.结论 尚不能进一步证明疑似本地发生的包虫病病例为本地感染病例,需继续做好包虫病的调查和监测工作.
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粪抗原检测法诊断犬细粒棘球绦虫感染的研究Ⅲ.双抗体夹心ELISA法检测粪抗原诊断家犬细粒棘球绦虫感染的现场评价
本文报道用槟榔碱驱虫法对检测粪抗原诊断家犬细粒棘球绦虫感染的应用价值进行现场比较评价的结果.73只受试犬中有16只对槟榔碱无反应.在导泻成功的57只犬中粪抗原阳性者11只阳性率19.2%.其中驱虫阴性的38只犬中粪抗原阳性者仅2只(5.3%).在10只驱出细粒棘球绦虫的家犬中8只粪抗原阳性.5只驱出泡状带绦虫的犬中粪抗原阳性者1只,但反应强度低.粪抗原的反应强度与细粒棘球绦虫的感染强度呈正相关(r=0.94).证明本法可用于家犬细粒棘球绦虫感染的调查.
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粪抗原检测法诊断犬细粒棘球绦虫感染的研究Ⅱ.粪抗原检测的敏感性、特异性及实验感染犬排出粪抗原的动态观察
用细粒棘球绦虫成虫虫体抗原及其抗体建立的双抗体夹心ELISA滴定成虫抗原的结果A450值与抗原含量呈指数曲线关系,高度相关(r=0.98).实验感染家犬粪抗原含量在2.5-8.0μg/ml之间,因此本法在检测粪抗原中具有足够的敏感性.家犬泡状带绦虫的感染引起的交叉反应是影响本法特异性的主要问题.选择适的抗体包被浓度可消除交叉反应.用细粒棘球蚴原头节感染家犬后,粪抗原呈低滴度阳性,至21天后迅速升高.实验感染泡状带绦虫的家犬观察50天粪抗原均在临界水平之下.作者推荐本法可用于家犬细粒棘球绦虫成虫感染的诊断.
关键词： 细粒棘球绦虫 犬 槟榔碱 粪抗原 双抗体夹心ELISA -
四川省包虫病流行区犬感染棘球绦虫规律性研究
目的 了解棘球蚴病传染源犬驱虫后再感染棘球绦虫的规律,探索犬驱虫的佳时机,促进棘球蚴病防治工作的可持续开展.方法 采用简单随机抽样的方法在石渠县随机抽取4个乡(镇),其中3个乡(镇)作为试验组在2015-03、2015-06、2015-08、2015-11以及2016-03进行家犬粪便收集并用吡喹酮驱虫,另外1个乡(镇)作为对照组按照试验组收集家犬粪便的时间收集粪便,并进行月月驱虫.同时在这4个乡(镇)收集野犬粪便.对收集的犬粪便用ELISA粪抗原检测法测定犬棘球绦虫感染状况.结果 经Fisher确切概率检验法分析,家犬吡喹酮驱虫后每隔2月或3月家犬棘球绦虫感染率无上升趋势(P＞0.05),月月驱虫与隔2月或3月驱虫家犬棘球绦虫感染率比较差异无统计学意义(P＞0.05),野犬棘球绦虫感染率相邻2次比较差异无统计学意义(P＞0.05),2016年3月家犬与野犬棘球绦虫感染率比较差异有统计学意义(P =0.001),其他月份比较家犬与野犬棘球绦虫感染率比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 经过多年防治措施的实施,针对传染源犬采取的“犬犬投药、月月驱虫”的驱虫模式已取得突出成效,已将犬棘球绦虫感染率降低到较低水平,且可将“犬犬投药、月月驱虫”模式调整为“每隔2月或3月驱虫”模式,同时应加强对野犬的驱虫与管理.
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犬粪便棘球绦虫抗原的双抗体夹心酶联免疫吸附试验检测法建立与应用
目的 研究双抗体夹心酶联免疫吸附检测犬粪便棘球绦虫虫体抗原的方法并评价其在实际工作中的应用价值.方法 实验犬12只,分实验组和对照组,实验组用活化绵羊源原头蚴(G1型)作人工感染;感染后08周内收集粪便,56 d宰杀实验犬,收集成虫;制备成虫抗原和虫体代谢/分泌抗原,蛋白酶K处理抗原并分别免疫成年绵羊和新西兰白兔;绵羊抗血清用80%饱和硫酸铵沉淀、透析,兔抗血清过IgG亲和层析柱,分别获得纯化抗体;观察犬粪便在PBS液中-80 ℃冷冻3 d或在含1% Formalin 的PBS液中70 ℃80 ℃加热8 h的处理方法对检出结果的影响.运用该方法对四川省甘孜县达通玛区4个乡的580只家犬吡喹酮每6月一次驱虫前后的粪抗原进行监测.结果 试验系统的敏感性为92.3%,特异性为80%;粪抗原从感染后的第23周可检出;两种样品处理方法都可以灭活虫卵但不影响检出效果;检测方法可同时用于对细粒棘球绦虫和多房棘球绦虫感染的诊断;达通玛区家犬粪抗原阳性率从2000年的50%下降到2005年的17%.结论 检测方法具有较高的特异性和敏感性;推荐粪便用加热的方法处理可以灭活虫卵以防止生物污染;该方法可以在基层推广应用.
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包虫病流行地区家犬中细粒棘球绦虫感染的监测研究
1999～2002年期间在新疆北部4个地州共7个县进行了家犬细粒棘球绦虫感染的监测,不同地区家犬感染率低11.4%,高51.%,一般牧区感染率高于农区,个别农区感染率也可高于牧区,家犬感染水平与当地家畜屠宰方式和生活习惯密切相关,监测结果表明目前新疆北部地区家犬中细粒棘球绦虫的平均感染率仍然很高(26.4%),保持着相当高的感染压力,这种态势与居民包虫病的感染率和家畜包虫病的患病率保持着较高的水平是一致的,在对家犬实行有效驱虫措施的情况下,粪抗原阳性率迅速降低.
