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硫酸右旋糖苷对人胃癌细胞腹腔种植转移和整合素β1表达的影响
目的 探讨硫酸右旋糖苷(DS)对人胃癌细胞腹腔种植转移整合素β1表达的影响.方法 培养BGC-823细胞,构建裸鼠动物模型.将90只裸鼠,随机分为对照组(40只)与实验组(50只),对照组与实验组裸鼠在注射肿瘤细胞同时分别注射生理盐水与硫酸右旋糖苷.裸鼠剖腹行HE染色,观察癌结节的腹腔种植数量;应用免疫组化和RT-PCR方法检测整合素β1 mRNA和蛋白表达.结果 剖腹观察的瘤结节数经HE染色证实,实验组明显少于对照组的瘤结节数(P＜0.01).免疫组化和RT-PCR结果显示,实验组整合素β1的表达量明显小于对照组(P＜0.01).结论 硫酸右旋糖苷可能通过下调整合素β1的表达抑制人胃癌细胞的腹腔种植转移,预防性使用大分子硫酸右旋糖苷能够抑制胃癌细胞的腹腔种植转移.
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硫酸右旋糖苷抑制人胃癌细胞黏附以及整合素β1蛋白表达的机制研究
[目的]探讨硫酸右旋糖苷(DS)对人胃癌MKN1细胞的黏附抑制作用机制.[方法]分别在培养液中加入DS或PBS对MKN1细胞进行培养,用荧光免疫细胞染色法进行染色,用共聚焦显微镜对固定细胞和活细胞在培养盘上的贴壁过程及形态变化进行观察,用Western blotting对整合素β1蛋白的表达水平进行测定.[结果]MKN1细胞形成伪足并与其他细胞接触形成单细胞层.整合素β1在细胞膜上有强表达并形成集落.DS使MKM细胞的伪足缩短,表现出维持圆形形状的倾向;抑制整合素β1的表达并使已经形成的整合素集落区域减少.MKN1细胞表达了整合素β1的两种形式(130kDa和110kDa),实验组贴壁细胞整合素β1蛋白的表达分别减少到对照组细胞的64%(130kDa)和57%(110kDa),实验组游离细胞整合素β1蛋白的表达分别减少到对照组细胞的51%(130kDa)和15%(110kDa).[结论]DS对人胃癌细胞MKN1黏附过程的抑制与整合素β1蛋白表达的减少有关.
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硫酸右旋糖苷抑制人胃癌细胞中HIF-1α、VEGF表达
目的 探讨硫酸右旋糖苷(dextran sulfate,DS)对人胃癌细胞(BGC-823)低氧诱导因子-1α(hypoxia inducedfactor-1α,HIF-1α)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的抑制作用.方法 将人胃癌BGC-823细胞分为对照组与实验组,在低氧条件下经不同时间培养后采用免疫细胞化学法及Western blot法检测HIF-1 α、VEGF的表达水平.结果 低氧条件下人胃癌BGC-823细胞中HIF-1α、VEGF的表达呈上升趋势,应用DS后实验组HIF-1α、VEGF的表达明显少于对照组,在12、24 h较为明显(P＜0.001).结论 DS可抑制人胃癌细胞中HIF-1 α和VEGF的表达,并可能通过抑制其表达影响胃癌腹腔种植转移.
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硫酸右旋糖苷抑制人胃癌细胞HIF-1α和整合素β1表达及其相关性
目的 培养人胃癌细胞株BGC-823,探讨硫酸右旋糖苷(dextran sulphate,DS)对人胃癌细胞整合素β1(Integrinβ1)和缺氧诱导因子-1 α(hypoxia induced factor-1α,HIF-1α)的表达及其相关性.方法 培养BGC-823细胞,分别在培养液中加入DS和磷酸缓冲液(phosphate buffered saline,PBS),低氧培养不同时间,应用免疫细胞化学、RT-PCR法检测细胞中HIF-1 α、Integrinβ1的表达,并分析二者的相关性.结果 实验组HIF-1α、Integrinβ1的表达水平明显低于对照组,且HIF-1α和Integrinβ1表达呈正相关.结论 DS可以抑制人胃癌细胞的黏附过程,减弱HIF-1 α、Integrinβ1的表达.DS可能通过抑制HIF-1 α降低IntegrinM的表达,有利于抑制人胃癌细胞的腹腔种植转移.
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硫酸右旋糖苷对人胃癌细胞腹腔种植转移和VEGF表达的影响
目的 通过观察人胃癌细胞在裸鼠大网膜上的种植转移情况和测定血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达水平,探讨硫酸右旋糖苷(dextran sulfate,DS)对人胃癌细胞腹腔种植转移和VEGF表达的影响.方法 采用细胞培养,建立动物模型,将108只裸鼠随机分为对照组与实验组两组,在注射胃癌细胞的同时分别注射生理盐水与DS.剖腹观察腹腔种植的癌结节数量,应用免疫组化和RT-PCR法检测VEGF蛋白及mRNA的表达.结果 实验组癌结节数明显少于对照组(P＜0.001),免疫组化和RT-PCR检测结果均显示实验组VEGF蛋白及mRNA的表达量明显小于对照组.结论 DS可以抑制VEGF的表达并有可能通过抑制其表达降低胃癌的腹腔种植转移.
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DS对胃癌细胞整合素β1表达及腹腔种植转移的影响
目的 探讨硫酸右旋糖苷(dextran sulfate,DS)对胃癌细胞腹腔种植转移的影响.方法 采用细胞培养,建立裸鼠动物模型.剖腹并行HE染色观察胃癌细胞腹腔种植转移情况,采用RT-PCR和免疫组化SP法检测DS对黏附分子整合素β1 mRNA和蛋白的影响.结果 剖腹观察瘤节数经HE染色证实,DS实验组腹腔种植转移的瘤节数明显少于对照组(P<0.05).RT-PCR技术和免疫组化检测结果 显示,DS实验组大网膜整合素β1 mRNA和蛋白表达与对照组相比均明显降低,P均=0.000.结论 DS抑制胃癌细胞的腹腔种植转移,且伴有整合素β1表达下降.DS可能是通过下调整合素β1 mRNA影响其蛋白的表达进而抑制肿瘤的种植转移,黏附分子整合素β1的mRNA和蛋白表达下降可能是DS抑制胃癌细胞种植转移的机制之一.
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硫酸右旋糖苷对人胃癌MKN1细胞的形态学影响
目的 探讨硫酸右旋糖苷(DS)对人胃癌MKNl细胞株的形态学影响.方法 用位相差显微镜、荧光免疫细胞染色法和共聚焦显微镜观察固定细胞和活细胞在培养盘上的附着过程及形态变化.结果 MKN1细胞通过变形,形成伪足黏附到培养盘,并与其他细胞接触形成单细胞层.DS抑制了MKNI细胞的黏附,培养48 h后仍有部分细胞处于游离状态.结论 DS阻止人胃癌细胞株MKN1的黏附过程.
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硫酸右旋糖苷抑制人胃癌细胞粘附以及整合素β1基因表达的机制研究
目的 通过观察人胃癌MKN1细胞的粘附过程和测定整合素β1cDNA的表达水平,研究硫酸右旋糖苷(dextran sulfate,DS)对人胃癌MKN1细胞粘附的抑制作用的机制.方法 分别在培养液中加入DS或PBS对MKN1细胞进行培养,用荧光免疫细胞染色法和共聚焦显微镜对固定细胞和活细胞在培养盘上的贴壁过程及形态变化进行观察,用RT-PCR测定整合素β1的cDNA表达.结果 MKN1细胞通过变形,形成伪足粘附到培养盘,并与其他细胞接触形成单细胞层.免疫染色可见整合素β1在细胞膜上有强烈的表达,并且形成整合素集落.DS抑制整合素β1的表达并使已经形成的整合素集落区域减少;使MKN1细胞的伪足缩短,表现出维持圆形的倾向.在使用DS培养4 h后仍有部分细胞处于游离状态,分别收集游离细胞和贴璧细胞,用RT-PCR测定整合素β1的cDNA表达.实验组贴壁细胞和游离细胞内整合素β1的cDNA的表达水平分别减少到对照组细胞的74%和38%.结论 DS对人胃癌细胞MKN1粘附过程的抑制与整合素β1表达的减弱有关.
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硫酸右旋糖苷调节HIF-1α的表达对人胃癌细胞腹膜种植转移的影响
目的:探讨硫酸右旋糖苷(DS)通过调节HIF-1α (hypoxia induced factor,HIF-1α)的蛋白表达而抑制人胃癌细胞腹膜转移的相关机制.方法:(1)体外实验:培养BGC-823细胞,分别在培养液中加入DS和PBS,低氧培养不同时间,用免疫细胞化学和WB检测HIF-1α表达.(2)动物实验:构建胃癌腹膜转移模型,实验组与对照组分别注射DS和PBS.剖腹观察癌细胞在腹膜上种植转移情况;应用免疫组化和WB方法检测HIF-1α表达.结果:(1)体外实验:免疫细胞化学和WB结果显示实验组HIF-1 α表达明显低于对照组.(2)动物实验:实验组瘤结节数明显少于对照组,免疫组化和WB结果显示实验组HIF-1α的蛋白表达明显低于对照组.结论:硫酸右旋糖苷可以调节人胃癌细胞HIF-1α的蛋白表达,其可能会通过下调HIF-1α的表达从而抑制人胃癌细胞大网膜种植转移.
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硫酸右旋糖苷预防人胃癌BGC-823细胞裸鼠大网膜种植转移的研究
目的 通过测定整合素β1 mRNA和蛋白的表达水平,研究硫酸右旋糖苷(DS)对人胃癌细胞(BGC-823)在裸鼠大网膜上种植转移的影响,从而观察DS预防胃癌细胞在腹腔种植转移中的作用.方法 裸鼠共80只,实验组40只和对照组40只.实验组裸鼠腹腔内同时注入1×107 BGC-823悬液(0.2mL·只-1)和0.3％的DS(1 mL·只-1);对照组腹腔内同时注入1×10 7胃癌细胞悬液(0.2 mL·只-1)和生理盐水(1mL·只-1).分别于注射后1、3、7、14 d处死,取大网膜组织,应用免疫组化、RT-PCR方法测定DS对整合素β1 mRNA和蛋白的影响.结果 随着BGC-823在大网膜上种植时间的延长,DS实验组与对照组大网膜上瘤节数目增多且体积逐渐增大,实验组大网膜瘤结节数量与体积均显著低于对照组;免疫组化检测示,在不同时间点实验组细胞膜整合素β1的表达均显著高于对照组(P＜0.05);在不同时间点上,实验组整合素β1 mRNA的表达均显著高于对照组(P＜0.05).结论 DS抑制胃癌细胞在裸鼠大网膜上的种植转移与整合素β1表达下调有关.
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硫酸右旋糖苷对人胃癌MKN1细胞的黏附以及整合素β1表达影响的研究
目的通过观察细胞的黏附过程和整合素β1的cDNA的表达,研究硫酸右旋糖苷(DS) 抑制人胃癌MKN1细胞株的黏附过程的机制.方法用位相差显微镜对MKN1细胞在培养盘上的附着过程及形态变化进行了观察.用半定量RT-PCR法对整合素β1 的cDNA的表达水平进行了测定.结果 DS抑制了MKN1细胞在培养盘上的附着,培养48小时后仍有部分细胞处于游离状态.在DS治疗组,黏附细胞和游离细胞内整合素β1的cDNA的表达水平分别减少到非治疗细胞的74% 和38%.结论 DS对人胃癌细胞株MKN1的黏附过程的抑制与对整合素β1 cDNA表达的抑制有关.
