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亚铁氧化酶Hephaestin的研究进展
Hephaestin(HP)作为铜蓝蛋白的同系物,是近年来发现的铁转运蛋白.HP具有一个位于羧基末端的跨膜结构域,主要分布于肠、肾、肺、皮肤、肝、胎盘等组织.目前已知HP在肠上皮细胞中与ferroportin1协同作用介导铁的跨膜转运.HP属亚铁氧化酶家族成员,具有亚铁氧化酶的活性,参与体内铁代谢.HP的表达可受铁、铜及锌等金属离子的调节.
关键词： hephaestin 铁 亚铁氧化酶 -
铁与脂质代谢相关蛋白在动脉粥样硬化中的表达与调节机制
目的 了解动脉粥样硬化(AS)斑块与巨噬细胞内铁代谢之间的关系,探讨造成AS斑块内巨噬细胞铁代谢紊乱的分子机制.方法 取AS斑块组织、正常动脉组织各25份,油红染色和酶联免疫法检测脂质含量.检测铁代谢相关蛋白[铁蛋白(FT),膜铁转运蛋白(FPN1),亚铁氧化酶(HP),铜蓝蛋白(CP)]含量.免疫组化、免疫荧光定位FPN1在巨噬细胞的表达情况.取12名AS患者及12名正常人血清样品,测定血清铁调素(Hep)浓度.结果 AS斑块脂质富集,结合胆固醇含量明显高于正常对照(P＜0.001).正常人血清Hep浓度显著低于AS患者,差异具有统计学意义(P＜0.01).AS患者斑块处FT含量明显高于正常组织,细胞中FPN1含量增加,而CP、HP表达量降低(P＜0.01).免疫荧光显示,AS斑块处FPN1主要存在于巨噬细胞胞质内.结论 AS斑块组织中铁代谢紊乱,细胞中FPN1的非细胞膜定位和CP、HP的表达下降,阻止铁从巨噬细胞中排出.同时血清中Hep的水平较高,也加重了巨噬细胞中铁的累积.说明铁的累积可能加剧了AS斑块的形成及发展.
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逆向两点校正测定血清亚铁氧化酶
目的探讨一种血清铜蓝蛋白亚铁氧化酶活性的新的测定方法,并使实验方法和步骤可用于自动化分析.方法用亚铁离子作底物,37℃pH5.8 0.45mol/L醋酸盐缓冲液条件下Fe2+被血清铜蓝蛋白亚铁氧化酶氧化成Fe3+,一定时间后,加入亚铁嗪显色,λ570nm下测定未被氧化的Fe2+离子的含量,依据反应前后底物浓度的变化,用逆向两点校正计算出被氧化的Fe2+所对应的亚铁氧化酶活性.结果亚铁嗪与Fe2+显色稳定,效果好.标本平均回收率105.2%,线性可达780U/L;精密度:批内CV:4.8%,批间:5.5%,标本存放4℃下稳定时间可达1周以上;脂血、溶血标本不影响亚铁氧化酶测定;EDTA能完全络合Fe2+离子.测定正常人标本30人份,平均值262.1U/L.SD:69.2U/L.结论运用逆向两点校正法,用EDTA作第二校准物取代铜蓝蛋白标准,克服了酶易失活的弱点,使校准更加可靠.可用于自动化分析,检测速度快、精密度较高,易于推广.
