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荧光原位杂交联合染色体分析提高急性白血病的诊断率
目的:探讨荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)检测联合染色体分析提高急性白血病(acute leukemia,AL)的临床诊断率.方法:无菌抽取2011年1月到2012年12月410例初诊为AL患儿的骨髓标本,经细胞培养后,采用G显带方法进行染色体分析,其中57例患儿用FISH技术进行相应的基因检测.结果:在410例AL患儿中,包括明确诊断为急性髓系白血病(acute myeloblastic leukemia,AML) 132例,急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)251例,未明确诊断27例,染色体异常检出率为41％(168/410).在57例AL患儿检测的染色体和FISH中,染色体异常检出率为52.6％(30/57);而FISH检测异常率为68.4％(39/57),两种方法检测的一致性为82.5％.结论:FISH方法是检测白血病患儿染色体异常的有效技术,可提高染色体异常检出率,明显优于单纯G显带染色体分析法,联合应用FISH及染色体分析对急性白血病的诊断结果更加准确、可靠,更适合于临床诊断、疗效判定.
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烤片对染色体G显带标本质量的影响分析
目的:探讨制备高质量人类染色体G显带标本的适烤片温度和时间.方法:选择130名健康学生外周血淋巴细胞常规培养、制备染色体标本,按不同的烤片温度和时间分组,对比各组标本的显带效果.结果:烤片温度60℃30 min、70℃ 3-6h、80℃3～6 h和100℃时显带效果差;而60 ℃:1-6 h、70℃和80℃ 30 min-2h显带效果好.结论:烤片温度的高低和时间的长短会影响G显带标本的质量,掌握好适宜的烤片温度和时间,才能制备高质量的显带标本.
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用高分辨G带和人工细菌染色体荧光原位杂交技术分析中国儿童孤独症患者的染色体改变
目的检测中国儿童孤独症患者的特征性染色体改变.方法应用高分辨G带和人工细菌染色体(bacterial artificial chromosome, BAC)荧光原位杂交(flourescence in situ hybridization, FISH)分析68例中国儿童孤独症患者的染色体改变.结果用G带分析观察到有染色体改变的4例患者,分别为1例t(4;6)(q23-24;p21)、1例21p+和2例9号染色体臂间倒位.BAC FISH进一步证实易位病例,而且更精确[t(4;6)(q25-26;p21.1)];涉及7号、15号、2号染色体的BAC FISH均未观察到文献中报道的染色体改变;而9号染色体的臂间倒位和21p+因无BAC克隆而无法证实.结论用G带和BAC FISH发现少数中国孤独症患者有染色体改变,但远没有文献中报道的10%～48%那么高.BAC FISH有助于精确地确定染色体易位断裂点.
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微阵列比较基因组杂交技术产前诊断5q35缺失综合征一例
目的 对一例5q35缺失综合征胎儿进行产前诊断,探讨G显带联合微阵列比较基因组杂交技术(array comparative genomic hybridization,aCGH)在产前诊断超声异常胎儿中的应用价值.方法 应用常规G显带分析胎儿及其父母的染色体核型,应用aCGH技术分析胎儿及其父母的DNA拷贝数变异(copy number variations,CNVs)并对核型分析结果进行精确定位.结果 胎儿父母外周血染色体核型分析及aCGH分析结果均未见异常,胎儿核型为46,XY,t(5;10)(q35;p13);aCGH检测发现胎儿5号染色体存在1.68 Mb的新发缺失,缺失区位于5q35.2q35.3,为5号染色体长臂缺失综合征,10号染色体存在1.44 Mb的染色体重复,重复区位于10p14p13.结论 aCGH技术具有更高的分辨率和准确性,是G显带核型分析的有益补充,可应用于临床分子细胞遗传诊断,特别是对缺失或者重复片段较小的非平衡易位患者的诊断中.
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G显带联合Array-CGH技术在产前超声异常胎儿诊断中的应用研究
目的 探讨孕中晚期超声异常的胎儿与染色体异常的关系以及微阵列比较基因组杂交技术(array comparative genome hybridization,array-CGH)在产前诊断中的应用价值.方法 收集因各种原因错过孕早期诊断、并在中晚期妊娠发现超声异常并怀疑染色体异常的高风险胎儿122例,同时采用常规核型分析和array-CGH对胎儿进行脐血染色体分析.结果 孕妇平均年龄为31岁(22～38岁),其中年龄≥35岁的孕妇17人,诊断时平均孕龄为27+5周(18～37周),常见的B超异常为心脏、中枢神经系统和骨骼方面.B超显示多发畸形的胎儿有49例,单一畸形的胎儿有73例.两种方法联合检测成功率为100％.共检出染色体异常核型24例,异常率为19.7％.其中两种技术均检测到的16例(占13.1％).核型分析共检出异常17例,其中有3例array-CGH检测到额外的基因拷贝数变异.多态性变异4例.array-CGH分析共检出异常23例,核型分析提示正常、但array-CGH检测到异常有7例.核型分析提示异常染色体低比例嵌合、但array-CGH显示正常有1例.结论 胎儿多发畸形与染色体异常明显相关.对于产前超声异常的胎儿,array-CGH技术能在分子细胞遗传的水平上提高染色体病检测的敏感性.
关键词： 产前超声 G显带 微阵列比较基因组杂交 -
人类外周血染色体G显带失败标本的补救措施
目的 比较不同方法对染色体核型分析G显带失败标本的处理效果,探索佳的补救措施.方法 实验组80份样本采用二甲苯脱油,固定液脱色后消化显带;对照组76份样本采用固定液脱油脱色后消化显带.结果 实验组处理后74份可进行核型分析,成功率为92.5％ (74/80);对照组处理后51例可进行核型分析,成功率为67.1％(51/76).两组成功率差异有统计学意义(x2=15.78,P＜0.01).结论 二甲苯脱油、固定液脱色后重新消化显带方法可对染色体G显带失败标本进行有效的补救,降低染色体检查的复查率.
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改进同步化法制备外周血染色体500条G显带技术的临床应用研究
目的 研究改进同步化法制备外周血染色体500条G显带技术用于染色体核型分析的意义.方法 对100份在本院细胞遗传室行外周血染色体检查样本,用常规制备法和改进同步化制备法同时进行外周染色体制备,观察两种方法制备玻片中的500条带分裂相数量和比例,并分别进行400条G显带和500条G显带核型分析.结果 两种方法的制备成功率均为100％.同步化法制备500条带核型分析结果为87份正常,9例Y染色体多态性,4例异常.常规法制备400条带核型分析漏诊1例染色体异常.同步化法获得的大于500条带分裂相显著多于对照组,差异有统计学意义(P＜0.01),而且500条带核型分析准确率高于400条带.结论 改进同步化制备法可以显著增加500条带分裂相,应用于染色体核型分析,有利于发现染色体异常,且操作简单,可以在临床推广应用.
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G显带和aCGH技术联合检测92例早期自然流产妊娠物核型分析
目的:探讨影响早期自然流产妊娠物染色体异常的因素以及微阵列比较基因组杂交技术(aCGH)在流产妊娠物核型检测中的应用价值.方法:收集在我院妇产科门诊确诊为“胚胎停育”的病例共92例,对清宫后获得的妊娠物进行绒毛染色体G显带核型分析,绒毛体外培养或G显带分析失败的进行aCGH检测.结果:本实验对92例自然流产妊娠物的绒毛组织进行体外培养,85例(92.4％)G显带染色体核型分析成功,失败的7例进行aCGH检测,两种方法联合分析的成功率100％.其中异常核型50例(异常率54.3％),非整倍体40例(非整倍体率43.5％).复发性流产和偶发性流产患者的异常率分别是50.0％和58.3％,差异无统计学意义(P＞0.05).年龄≥35岁患者妊娠物核型为非整倍体的概率(61.5％)大于年龄＜35岁的患者(36.4％),差异有统计学意义(P＜0.05).流产儿男女性别比约为1∶1.2,男性胚胎核型异常率(42.9％)小于女性(64.0％),差异有统计学意义(P＜0.05).超声检查示妊娠囊内无胎芽和有胎芽患者的核型异常率分别为53.3％和54.8％ (P ＞0.05)；曾见胎心和从未见胎心患者的异常率分别为58.7％和50.0％,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论:自然流产妊娠物核型异常的风险与流产次数以及有无胎芽或胎心无关,非整倍体妊娠的风险随母体年龄增大,女性胚胎在早孕期更易发生染色体异常.aCGH技术在检测流产妊娠物核型中有优越性.
关键词： 早期自然流产 G显带 微阵列比较基因组杂交技术 染色体异常 -
慢性粒细胞白血病患者Ph染色体检查及其临床意义
慢性粒细胞白血病(CML)是一种起源于多能干细胞的恶性克隆增殖性疾病,各种年龄均可发病,以中年为多见,男性略多于女性.CML起病缓慢,患者早期常无自觉症状,常在偶然的情况下或因其他疾病原因检查血液,或因脾脏肿大引起腹部不适就诊而被发现.
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辐射后淋巴细胞的G显带染色体畸变分析
目的:通过染色体G显带技术研究辐射后染色体的结构畸变情况.方法:4MV的X线辐射离体入血,淋巴细胞培养后,应用染色体G显带技术,分析辐射后染色体的结构畸变情况,包括双着丝粒、缺失、易位、环状染色体、染色体片段,等.结果:辐射后观察分散良好、形态清晰的细胞核型100个,染色体畸变总数为428,其中双着丝粒、缺失、易位、环状染色体、染色体片段的发生数分别为 86、41、111、9、181.分析各号染色体辐射后畸变情况,未见明显差异.结论:染色体G带分析可以提供较丰富的染色体结构畸变信息.
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西宁地区45例染色体异常核型分析
目的:对西宁地区45例外周血染色体异常核型和临床表现资料进行回顾性分析,了解遗传咨询中的疾病类型和染色体异常核型分布.方法:采集外周血(1～2)mL,置于37℃恒温培养箱中培养72h,培养完成后再经低渗固定,收获中期分裂相细胞,制片,胰酶消化做G显带处理.结果:对45例异常核型进行分析,常染色体结构及数目异常20例,性染色体结构和数目异常11例,染色体异态14例,异常核型占染色体数目的32.6％.结论:染色体异常是导致自然流产、胚胎停止发育、不良孕产史和不孕不育及发育异常的重要原因,对这些患者进行遗传咨询、生育和康复指导非常必要.
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人外周血淋巴细胞高分辨染色体制备技术的研究
目的:建立一种具有分裂指数高和染色体分散好等优点的550～850条带纹高分辨染色体的制备方法.方法:取10例健康人外周血为样本制备淋巴细胞高分辨染色体.固定5-氟尿嘧啶核苷、尿嘧啶核苷、胸腺嘧啶核苷、溴化乙锭、秋水仙胺的剂量,进行5个因素3个水平的正交设计15种实验方案.5个因素分别为培养时间、胸腺嘧啶核苷、溴化乙锭、秋水仙胺作用时间以及低渗时间.3个水平分别为培养时间64、72、80 h；胸腺嘧啶核苷作用时间16、17、18 h；溴化乙锭作用时间3、4、5h;秋水仙胺作用时间10、15、20 min以及低渗时间30、40、50 min.每例样本同时采用15种方案进行实验,比较各方案带纹在550条以上时染色体分裂指数和分裂相分散的情况.结果:在15种方案中培养时间以及秋水仙胺作用时间对分裂指数有显著影响(P＜0.01),其中培养72 h后加5-氟尿嘧啶核苷和尿嘧啶核苷进行同步化和秋水仙胺作用15 min高分辨染色体分裂指数大.37℃低渗40 min高分辨染色体分散效果佳.结论:本实验方案的高分辨染色体制备方法,具有分裂指数高和染色体分散好等优点,具有较好的推广价值.
