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微囊化牛肾上腺嗜铬细胞多巴胺含量的检测
目的检测体外培养微囊化牛嗜铬细胞分泌多巴胺的动态变化,为用微囊化肾上腺髓质细胞移植治疗帕金森病提供实验依据.方法常规培养牛肾上腺髓质嗜铬细胞,用人工APA微囊对之微囊化后再培养20d,高效液相色谱(HPLC)动态检测多巴胺含量,并分别在光镜及电镜下观察微囊内牛嗜铬细胞的形态变化.结果 牛嗜铬细胞在微囊内生长良好,在培养液内可持续检测到多巴胺.第8 d左右多巴胺的分泌达到高峰,随后逐渐下降,14 d后分泌量处于一种恒定的状态.结论微囊化牛嗜铬细胞分泌的多巴胺可以通透微囊,可以考虑用来进行异种细胞移植治疗帕金森病.
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大电导钙激活钾离子通道与糖尿病视网膜动脉病变
大电导钙激活钾离子通道,即BKca通道,早于1981年在牛嗜铬细胞中发现,1991年其α亚基从果蝇中克隆并表达出来,由于α亚基位点上的突变与肌肉和神经元的钙激活钾电流相关,因此又称为dSIo通道[1],随后在哺乳动物、人和线虫上也克隆了出来.后续研究证明,BKcα通道广泛分布于各种组织细胞中,犬及人平滑肌细胞中多[2].近年来膜片钳技术的应用为BKcα通道电生理特性的研究提供了技术支持,BKcα通道在各种疾病状态下的功能改变成为了新的研究热点.
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微囊化牛嗜铬细胞分泌功能的评价
嗜铬细胞移植治疗晚期癌痛是近年来慢性疼痛治疗领域的一个研究热点,微囊包膜技术是近年出现的一种克服宿主对移植物免疫排斥反应的免疫隔离新方法[1].本研究通过观察体外培养微囊化牛嗜铬细胞(BBC)的生长形态及检测生物分泌功能,为微囊化BCC移植的开展提供依据.
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微囊化牛嗜铬细胞及冷冻保存的体外培养研究
目的 观察体外培养的微囊化牛嗜铬细胞及其冷冻保存复苏后的细胞活力,探索微囊化牛嗜铬细胞的冻存保存方法,为将来进行大规模细胞移植治疗疼痛奠定临床基础.方法 经胶原酶消化成单细胞,微囊包裹,并取部分进行冷冻保存及复温,观察细胞的生长情况;放免法分别检测其培养液中去甲肾上腺素、甲-脑啡呔的含量和在高钾、乙酰胆碱刺激下的分泌量来观察其功能活性.结果 微囊化牛嗜铬细胞及其冷冻复苏后的细胞形态结构完整,生长良好;冻存复苏后的微囊保留了儿茶酚胺和甲-脑啡呔的的分泌功能,基础与刺激分泌量大约为冻存前微囊化牛嗜铬细胞分泌量的92%;同时刺激后去甲肾上腺素、甲-脑啡呔水平较其基础值均有明显增加(P<0.01).结论 微囊化牛嗜铬细胞及其冷冻复苏后的细胞具有良好的细胞功能,冷冻保存的微囊化牛嗜铬细胞是有效和成功的.
关键词: 海藻酸钠-多聚赖氨酸-海藻酸钠微囊 牛嗜铬细胞 冻存